腰椎退變肥厚黃韌帶中細(xì)胞凋亡及凋亡因子Caspase-3、Fas、P53的表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2021-02-07 06:42
目的:通過(guò)檢測(cè)腰椎退變肥厚黃韌帶組織中的細(xì)胞凋亡率及凋亡因子Caspase-3、Fas、P53的表達(dá),為深入了解參與腰椎黃韌帶細(xì)胞凋亡的信號(hào)傳導(dǎo)途徑做基礎(chǔ)。方法:實(shí)驗(yàn)組取自腰椎管狹窄癥行手術(shù)減壓的患者50例,所有黃韌帶經(jīng)過(guò)術(shù)前MRI測(cè)量及術(shù)后測(cè)量證實(shí)為屬于退變肥厚黃韌帶組織,其中男性22例,女性28例,年齡32-74歲,平均為54.46歲。對(duì)照組取自腰椎間盤突出癥及爆裂性腰椎骨折行手術(shù)減壓的患者30例,所有黃韌帶經(jīng)過(guò)術(shù)前MRI測(cè)量及術(shù)后測(cè)量證實(shí)為屬于非肥厚黃韌帶組織,其中男性19例,女性11例,年齡19-67歲,平均為47.27歲。取材部位均為L(zhǎng)2-S1節(jié)段黃韌帶。對(duì)兩組黃韌帶厚度進(jìn)行測(cè)量,采用TUNEL染色法檢測(cè)黃韌帶中的凋亡細(xì)胞率,用SP免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)凋亡因子Caspase-3、Fas、P53的表達(dá)水平。結(jié)果:(1)實(shí)驗(yàn)組厚度范圍為4.5-8.0 mm,平均為5.63 mm,對(duì)照組厚度范圍為2.3-4.0 mm,平均為3.56 mm,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;(2)TUNEL染色示實(shí)驗(yàn)組的平均凋亡細(xì)胞率高于對(duì)照組[(37.80±3...
【文章來(lái)源】:新疆醫(yī)科大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)
【文章頁(yè)數(shù)】:56 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
影像學(xué)資料A與B表現(xiàn)為腰椎管狹
新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文7圖2對(duì)照組腰椎間盤突出癥患者M(jìn)RI影像Fig.2MRIimageoflumbardischerniationincontrolgroup圖2:影像學(xué)資料A與B表現(xiàn)為L(zhǎng)5-S1節(jié)段腰椎間盤突出,其椎管未見明顯狹窄,黃韌帶未見明顯增厚。1.2實(shí)驗(yàn)材料名稱廠商4%多聚甲醛溶液武漢博士德生物工程有限公司RapidCal·Immuno脫鈣液美國(guó)Lymed公司PBS漂洗緩沖溶液武漢博士德生物工程有限公司二甲苯試劑天津市大茂化學(xué)試劑有限公司無(wú)水乙醇試劑天津市大茂化學(xué)試劑有限公司過(guò)氧化氫溶液(30%)天津市大茂化學(xué)試劑有限公司檸檬酸緩沖試劑武漢博士德生物工程有限公司封閉用羊血清試劑北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司Anti-Caspase-3抗體試劑英國(guó)abcom有限公司Anti-Fas抗體試劑英國(guó)abcom有限公司Anti-P53抗體試劑英國(guó)abcom有限公司抗體稀釋試劑北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司兔Kit酶標(biāo)山羊抗兔IgG聚合物試劑北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司DAB顯色試劑盒DABKit北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司InSituApoptosisDetection試劑盒英國(guó)abcom有限公司蘇木素染色試劑北京九洲柏林生物科技有限公司鹽酸試劑天津市大茂化學(xué)試劑有限公司中性樹膠北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司AB
新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文14表3實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組黃韌帶凋亡細(xì)胞率比較Table.3Comparisonoftherateofapoptoticcellsintheligamentumflavumbetweentheexperimentalgroupandthecontrolgroup圖3實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組黃韌帶TUNEL染色對(duì)比Fig.3ComparisonofTUNELstainingofligamentumflavuminexperimentalgroupandcontrolgroup圖3-1實(shí)驗(yàn)組TUNEL染色(400倍)圖3-2對(duì)照組TUNEL染色(400倍)Fig.3-1ExperimentalgroupTUNELFig.3-2ControlgroupTUNELstainingstaining(400times)(400times)3免疫組織化學(xué)染色結(jié)果3.1實(shí)驗(yàn)組免疫組化染色退變肥厚黃韌帶組織情況多表現(xiàn)為細(xì)胞核染色呈棕黃色或棕褐色,染色深,細(xì)胞排列紊亂,正常形態(tài)結(jié)構(gòu)消失,胞核變小,胞膜皺縮。①凋亡因子Caspase-3染色陰性為0例,陽(yáng)性為33例,強(qiáng)陽(yáng)性為17例,陽(yáng)性率為100%;②凋亡因子Fas染色陰性為0例,陽(yáng)性為32例,強(qiáng)陽(yáng)性為18例,陽(yáng)性率為100%;③凋亡因子P53染色陰性為0例,陽(yáng)性為34例,強(qiáng)陽(yáng)性為16例,陽(yáng)性率為100%,凋亡因子Caspase-3、Fas、P53均表達(dá)陽(yáng)性率高。3.2對(duì)照組免疫組化染色正常黃韌帶組織情況多表現(xiàn)為細(xì)胞核染色呈淡黃色或棕黃色,染色較淺,細(xì)胞排列規(guī)律,細(xì)胞形態(tài)表現(xiàn)正常。①凋亡因子Caspase-3染色陰性為26例,陽(yáng)性4例,強(qiáng)陽(yáng)性為0例,陽(yáng)性率為13.3%;②凋亡因子Fas染色陰性為25例,陽(yáng)性5例,強(qiáng)陽(yáng)性為0例,陽(yáng)性率為16.7%;③凋亡因子P53染色陰性為27例,陽(yáng)性3例,強(qiáng)陽(yáng)性為0例,陽(yáng)性率為10%,凋亡因子Caspase-3、Fas、P53均表達(dá)陽(yáng)性率較低。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組凋亡因子Caspase-3陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度經(jīng)卡方檢驗(yàn),(2χ=64.78,P<組別標(biāo)本數(shù)(n)凋亡率(%)P實(shí)驗(yàn)組5037.80±3.04<0.001對(duì)照組3013.18±1.34
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]p38絲裂原活化蛋白激酶通路介導(dǎo)TGF-β1/結(jié)締組織生長(zhǎng)因子調(diào)控人腰椎黃韌帶增生肥厚的機(jī)制研究[J]. 盧昌懷,劉志軍,張宏波,段揚(yáng),曹延林. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2019(06)
[2]細(xì)胞因子bFGF和NF-κB在腰椎黃韌帶肥厚中的表達(dá)及意義[J]. 林偉文,凌華軍,鐘思龍,羅鵬剛,吳增志,夏雄超,賴茂松,熊浩. 海南醫(yī)學(xué). 2019(07)
[3]腰椎間盤突出癥患者血清中Caspase-3和Caspase-9活性研究[J]. 趙英倫,馬元,莫森,李東冉,王軍,劉沖,詹新立. 現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2018(02)
[4]腰椎黃韌帶肥厚與細(xì)胞凋亡關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 阿力木江·阿西木,吐爾洪江·阿布都熱西提,艾爾肯·阿木冬. 臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志. 2017(92)
[5]中國(guó)新疆地區(qū)腰椎管狹窄患者腰椎黃韌帶肥厚的危險(xiǎn)因素分析:回顧性、單中心、病例分析[J]. 周綱,張玉坤,黃衛(wèi)民. 中國(guó)組織工程研究. 2017(19)
[6]腰椎黃韌帶增生肥厚中氧自由基H2O2介導(dǎo)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1表達(dá)的作用及意義[J]. 王智清,陳雄生,周盛源,許國(guó)峰. 中國(guó)組織工程研究. 2017(12)
[7]Fas在退變的兔椎間盤終板凋亡中的表達(dá)及作用通路研究[J]. 呂浩然,劉尚禮,黃東生,丁悅,胡寶山,葉偉. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2016 (01)
[8]FAM105A通過(guò)caspase依賴性途徑和Bcl-2家族誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[J]. 袁夢(mèng),趙永浩,王云姝,劉亦倩,張弦,許華曦,張?jiān)莆? 廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(06)
[9]CT橫斷面測(cè)量分析腰椎管狹窄癥與黃韌帶肥厚的關(guān)系[J]. 闞敏慧,程愛國(guó),杜寧. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(52)
[10]兔退變椎間盤中髓核細(xì)胞凋亡與BNIP3基因表達(dá)的意義[J]. 曾順福,劉杰,王建. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2010(11)
博士論文
[1]Fas, caspase-3, bcl-2在骨關(guān)節(jié)炎軟骨中的表達(dá)及意義[D]. 張鐵峰.中國(guó)醫(yī)科大學(xué) 2007
碩士論文
[1]退變黃韌帶組織中細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因Bax和Bcl-2的表達(dá)[D]. 王起騰.新疆醫(yī)科大學(xué) 2019
本文編號(hào):3021842
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【文章頁(yè)數(shù)】:56 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
影像學(xué)資料A與B表現(xiàn)為腰椎管狹
新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文7圖2對(duì)照組腰椎間盤突出癥患者M(jìn)RI影像Fig.2MRIimageoflumbardischerniationincontrolgroup圖2:影像學(xué)資料A與B表現(xiàn)為L(zhǎng)5-S1節(jié)段腰椎間盤突出,其椎管未見明顯狹窄,黃韌帶未見明顯增厚。1.2實(shí)驗(yàn)材料名稱廠商4%多聚甲醛溶液武漢博士德生物工程有限公司RapidCal·Immuno脫鈣液美國(guó)Lymed公司PBS漂洗緩沖溶液武漢博士德生物工程有限公司二甲苯試劑天津市大茂化學(xué)試劑有限公司無(wú)水乙醇試劑天津市大茂化學(xué)試劑有限公司過(guò)氧化氫溶液(30%)天津市大茂化學(xué)試劑有限公司檸檬酸緩沖試劑武漢博士德生物工程有限公司封閉用羊血清試劑北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司Anti-Caspase-3抗體試劑英國(guó)abcom有限公司Anti-Fas抗體試劑英國(guó)abcom有限公司Anti-P53抗體試劑英國(guó)abcom有限公司抗體稀釋試劑北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司兔Kit酶標(biāo)山羊抗兔IgG聚合物試劑北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司DAB顯色試劑盒DABKit北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司InSituApoptosisDetection試劑盒英國(guó)abcom有限公司蘇木素染色試劑北京九洲柏林生物科技有限公司鹽酸試劑天津市大茂化學(xué)試劑有限公司中性樹膠北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司AB
新疆醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文14表3實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組黃韌帶凋亡細(xì)胞率比較Table.3Comparisonoftherateofapoptoticcellsintheligamentumflavumbetweentheexperimentalgroupandthecontrolgroup圖3實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組黃韌帶TUNEL染色對(duì)比Fig.3ComparisonofTUNELstainingofligamentumflavuminexperimentalgroupandcontrolgroup圖3-1實(shí)驗(yàn)組TUNEL染色(400倍)圖3-2對(duì)照組TUNEL染色(400倍)Fig.3-1ExperimentalgroupTUNELFig.3-2ControlgroupTUNELstainingstaining(400times)(400times)3免疫組織化學(xué)染色結(jié)果3.1實(shí)驗(yàn)組免疫組化染色退變肥厚黃韌帶組織情況多表現(xiàn)為細(xì)胞核染色呈棕黃色或棕褐色,染色深,細(xì)胞排列紊亂,正常形態(tài)結(jié)構(gòu)消失,胞核變小,胞膜皺縮。①凋亡因子Caspase-3染色陰性為0例,陽(yáng)性為33例,強(qiáng)陽(yáng)性為17例,陽(yáng)性率為100%;②凋亡因子Fas染色陰性為0例,陽(yáng)性為32例,強(qiáng)陽(yáng)性為18例,陽(yáng)性率為100%;③凋亡因子P53染色陰性為0例,陽(yáng)性為34例,強(qiáng)陽(yáng)性為16例,陽(yáng)性率為100%,凋亡因子Caspase-3、Fas、P53均表達(dá)陽(yáng)性率高。3.2對(duì)照組免疫組化染色正常黃韌帶組織情況多表現(xiàn)為細(xì)胞核染色呈淡黃色或棕黃色,染色較淺,細(xì)胞排列規(guī)律,細(xì)胞形態(tài)表現(xiàn)正常。①凋亡因子Caspase-3染色陰性為26例,陽(yáng)性4例,強(qiáng)陽(yáng)性為0例,陽(yáng)性率為13.3%;②凋亡因子Fas染色陰性為25例,陽(yáng)性5例,強(qiáng)陽(yáng)性為0例,陽(yáng)性率為16.7%;③凋亡因子P53染色陰性為27例,陽(yáng)性3例,強(qiáng)陽(yáng)性為0例,陽(yáng)性率為10%,凋亡因子Caspase-3、Fas、P53均表達(dá)陽(yáng)性率較低。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組凋亡因子Caspase-3陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度經(jīng)卡方檢驗(yàn),(2χ=64.78,P<組別標(biāo)本數(shù)(n)凋亡率(%)P實(shí)驗(yàn)組5037.80±3.04<0.001對(duì)照組3013.18±1.34
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[5]中國(guó)新疆地區(qū)腰椎管狹窄患者腰椎黃韌帶肥厚的危險(xiǎn)因素分析:回顧性、單中心、病例分析[J]. 周綱,張玉坤,黃衛(wèi)民. 中國(guó)組織工程研究. 2017(19)
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[8]FAM105A通過(guò)caspase依賴性途徑和Bcl-2家族誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[J]. 袁夢(mèng),趙永浩,王云姝,劉亦倩,張弦,許華曦,張?jiān)莆? 廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2011(06)
[9]CT橫斷面測(cè)量分析腰椎管狹窄癥與黃韌帶肥厚的關(guān)系[J]. 闞敏慧,程愛國(guó),杜寧. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(52)
[10]兔退變椎間盤中髓核細(xì)胞凋亡與BNIP3基因表達(dá)的意義[J]. 曾順福,劉杰,王建. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2010(11)
博士論文
[1]Fas, caspase-3, bcl-2在骨關(guān)節(jié)炎軟骨中的表達(dá)及意義[D]. 張鐵峰.中國(guó)醫(yī)科大學(xué) 2007
碩士論文
[1]退變黃韌帶組織中細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因Bax和Bcl-2的表達(dá)[D]. 王起騰.新疆醫(yī)科大學(xué) 2019
本文編號(hào):3021842
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