骨肉瘤是一種好發(fā)于青少年的惡性骨腫瘤�，F(xiàn)階段主流的治療手段是術(shù)前大劑量化療、根治性切除及術(shù)后繼續(xù)大劑量化療。自上世紀(jì)八十年代以來,骨肉瘤患者總生存率長(zhǎng)期處于平臺(tái)期,原發(fā)性骨肉瘤患者五年生存率約為60%-70%�，F(xiàn)階段骨肉瘤的治療受限于缺乏能直接將藥物遞送到腫瘤細(xì)胞的靶向載體。篩選與鑒別腫瘤細(xì)胞表面受體的特異性配體,是目前腫瘤研究的熱點(diǎn),新興的噬菌體展示技術(shù)是這一領(lǐng)域的強(qiáng)大工具,將可能促進(jìn)腫瘤診斷和靶向治療的發(fā)展。目的:利用噬菌體展示技術(shù)篩選并鑒定對(duì)人骨肉瘤U2OS細(xì)胞具有高度親和力和特異性的多肽,進(jìn)一步將靶向多肽與金納米籠偶聯(lián),評(píng)價(jià)多肽靶向熱療骨肉瘤細(xì)胞的能力（圖1）,為進(jìn)一步開發(fā)人骨肉瘤的靶向治療提供基礎(chǔ)。方法:1.以U2OS作為靶細(xì)胞,人成骨細(xì)胞hFOB1.19為陰性消減細(xì)胞,對(duì)Ph.D.-12噬菌體展示文庫(kù)進(jìn)行全細(xì)胞差減篩選。首先將噬菌體文庫(kù)與hFOB1.19細(xì)胞充分結(jié)合,排除與hFOB1.19結(jié)合,即非特異性結(jié)合靶細(xì)胞的部分噬菌體,將剩下的文庫(kù)與U2OS充分結(jié)合,洗滌后去除特異性與親和力較低的噬菌體,通過洗脫及酸化裂解得到對(duì)U2OS具有較高特異性和親和力的噬菌體（包括"細(xì)胞表面... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 人骨肉瘤細(xì)胞U20S特異性結(jié)合噬菌體的篩選及鑒定
    1. 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3 統(tǒng)計(jì)分析
    2. 結(jié)果
        2.1 四輪體外篩選后噬菌體滴度測(cè)定結(jié)果
        2.2 單克隆噬菌體的DNA序列測(cè)定結(jié)果:
        2.3 單克隆噬菌體富集率
        2.4 噬菌體酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定結(jié)果
        2.5 人骨肉瘤組織體外免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)結(jié)果
    3. 討論
    4. 小結(jié)
第二章 人骨肉瘤細(xì)胞U20S特異性結(jié)合多肽的篩選及鑒定
    1. 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3 統(tǒng)計(jì)分析
    2. 結(jié)果
        2.1 多肽親和力實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2 噬菌體與多肽競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合人骨肉瘤細(xì)胞U20S實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3 多肽與噬菌體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合人骨肉瘤細(xì)胞U20S實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3. 討論
    4. 小結(jié)
第三章 靶向多肽偶聯(lián)金納米籠光熱治療人骨肉瘤細(xì)胞U20S的效果研究
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3 統(tǒng)計(jì)分析
    2 結(jié)果
        2.1 多肽偶聯(lián)金納米籠
        2.2 CCK-8法檢測(cè)多肽-金納米籠光熱治療效果
        2.3 活細(xì)胞/死細(xì)胞染色檢測(cè)多肽-金納米籠光熱治療效果
    3 討論
    4 小結(jié)
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
附錄
研究生在學(xué)期間發(fā)表論文情況
統(tǒng)計(jì)學(xué)審核證明
致謝



本文編號(hào)：3018464