骨肉瘤是一種好發(fā)于青少年的惡性骨腫瘤�，F(xiàn)階段主流的治療手段是術(shù)前大劑量化療、根治性切除及術(shù)后繼續(xù)大劑量化療。自上世紀(jì)八十年代以來,骨肉瘤患者總生存率長期處于平臺期,原發(fā)性骨肉瘤患者五年生存率約為60%-70%。現(xiàn)階段骨肉瘤的治療受限于缺乏能直接將藥物遞送到腫瘤細(xì)胞的靶向載體。篩選與鑒別腫瘤細(xì)胞表面受體的特異性配體,是目前腫瘤研究的熱點,新興的噬菌體展示技術(shù)是這一領(lǐng)域的強大工具,將可能促進(jìn)腫瘤診斷和靶向治療的發(fā)展。目的:利用噬菌體展示技術(shù)篩選并鑒定對人骨肉瘤U2OS細(xì)胞具有高度親和力和特異性的多肽,進(jìn)一步將靶向多肽與金納米籠偶聯(lián),評價多肽靶向熱療骨肉瘤細(xì)胞的能力（圖1）,為進(jìn)一步開發(fā)人骨肉瘤的靶向治療提供基礎(chǔ)。方法:1.以U2OS作為靶細(xì)胞,人成骨細(xì)胞hFOB1.19為陰性消減細(xì)胞,對Ph.D.-12噬菌體展示文庫進(jìn)行全細(xì)胞差減篩選。首先將噬菌體文庫與hFOB1.19細(xì)胞充分結(jié)合,排除與hFOB1.19結(jié)合,即非特異性結(jié)合靶細(xì)胞的部分噬菌體,將剩下的文庫與U2OS充分結(jié)合,洗滌后去除特異性與親和力較低的噬菌體,通過洗脫及酸化裂解得到對U2OS具有較高特異性和親和力的噬菌體（包括"細(xì)胞表面... 

【文章來源】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 人骨肉瘤細(xì)胞U20S特異性結(jié)合噬菌體的篩選及鑒定
    1. 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗方法
        1.3 統(tǒng)計分析
    2. 結(jié)果
        2.1 四輪體外篩選后噬菌體滴度測定結(jié)果
        2.2 單克隆噬菌體的DNA序列測定結(jié)果:
        2.3 單克隆噬菌體富集率
        2.4 噬菌體酶聯(lián)免疫吸附測定結(jié)果
        2.5 人骨肉瘤組織體外免疫組織化學(xué)染色檢測結(jié)果
    3. 討論
    4. 小結(jié)
第二章 人骨肉瘤細(xì)胞U20S特異性結(jié)合多肽的篩選及鑒定
    1. 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗方法
        1.3 統(tǒng)計分析
    2. 結(jié)果
        2.1 多肽親和力實驗結(jié)果
        2.2 噬菌體與多肽競爭性結(jié)合人骨肉瘤細(xì)胞U20S實驗結(jié)果
        2.3 多肽與噬菌體競爭性結(jié)合人骨肉瘤細(xì)胞U20S實驗結(jié)果
    3. 討論
    4. 小結(jié)
第三章 靶向多肽偶聯(lián)金納米籠光熱治療人骨肉瘤細(xì)胞U20S的效果研究
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗方法
        1.3 統(tǒng)計分析
    2 結(jié)果
        2.1 多肽偶聯(lián)金納米籠
        2.2 CCK-8法檢測多肽-金納米籠光熱治療效果
        2.3 活細(xì)胞/死細(xì)胞染色檢測多肽-金納米籠光熱治療效果
    3 討論
    4 小結(jié)
結(jié)語
參考文獻(xiàn)
附錄
研究生在學(xué)期間發(fā)表論文情況
統(tǒng)計學(xué)審核證明
致謝



本文編號：3018464