目的:腎上腺皮質(zhì)激素可引起激素性股骨頭缺血壞死,其機(jī)制復(fù)雜,目前研究表明,血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、差異表達(dá)基因的調(diào)控以及骨細(xì)胞自噬等參與了SANFH的發(fā)病過程。但血管內(nèi)皮細(xì)胞與自噬之間的關(guān)系及調(diào)控機(jī)制尚不明確。本研究旨在探討血管內(nèi)皮細(xì)胞自噬在SANFH中的作用,通過研究PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路和自噬相關(guān)基因來探討股骨頭血管內(nèi)皮細(xì)胞自噬與SANFH之間的關(guān)系,同時(shí)研究mTOR-shRNA對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷可能具有的修復(fù)作用。方法:研究采用體外培養(yǎng)大鼠股骨頭血管內(nèi)皮細(xì)胞的方法,同時(shí)進(jìn)行mTOR-shRNA腺病毒轉(zhuǎn)染,分組后于4個(gè)時(shí)間點(diǎn)（12、24、48、72h）利用透射電鏡觀察各組自噬體形成情況;利用RT-PCR檢測(cè)PI3K、Akt、mTOR、Beclin1、MAP1LC3的mRNA表達(dá);利用Western blot、免疫熒光法檢測(cè)上述因子的蛋白表達(dá)情況;利用ELISA法檢測(cè)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷標(biāo)志物6-keto-PGF1α表達(dá)情況。最后應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行分析,統(tǒng)計(jì)各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果:（1）激素抑制了VEC生理性自噬,mTOR-shRNA可增強(qiáng)自噬水平;（2）... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

VEC細(xì)胞CD31和FactorⅧ蛋白染色情況

內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文素抑制了 VEC 生理性自噬，mTOR-shRNA 可增強(qiáng)自噬水平們采用透射電鏡進(jìn)行 VEC 自噬體觀察，由圖 2 可見，三組視野內(nèi)均可見自照組為生理性自噬強(qiáng)度，激素組（MP）中自噬體數(shù)量明顯少于對(duì)照組，mTOR 組則介于這兩組之間，說明甲基強(qiáng)的松龍可抑制 VEC 自噬，作用制自噬的效果也越明顯。而 mTOR-shRNA 可使 mTOR 表達(dá)下調(diào)，抑制了對(duì)自噬的抑制作用，增強(qiáng)了自噬水平，但其仍低于生理性自噬水平。ctrl MP MP+shmTOR

RT-PCR定量檢測(cè)PI3K、Akt、mTOR、Beclin1、LC3的mRNA表達(dá)變化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]祛風(fēng)生脈顆粒對(duì)大鼠缺血心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞自噬及血管新生的影響[J]. 馬培澤,楊春,楊雯晴,姜月華,呂娟.  中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志. 2018(24)
[2]Beclin 1和MAP1-LC3在家兔激素性股骨頭缺血壞死中表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 王文選,趙振群,劉萬(wàn)林,白銳.  實(shí)用骨科雜志. 2017(09)
[3]激素性股骨頭缺血性壞死發(fā)病機(jī)制中的細(xì)胞自噬[J]. 孟晨陽(yáng),劉萬(wàn)林,白銳,趙振群.  中國(guó)組織工程研究. 2017(08)
[4]急性腦梗死患者治療前后血清Hcy和血漿TXB2、6-K-PGF1α檢測(cè)的臨床價(jià)值[J]. 陶曉薇,項(xiàng)國(guó)謙.  檢驗(yàn)醫(yī)學(xué). 2017(01)
[5]Role of Akt signaling in resistance to DNA-targeted therapy[J]. Abolfazl Avan,Ravi Narayan,Elisa Giovannetti,Godefridus J Peters.  World Journal of Clinical Oncology. 2016(05)
[6]激素性股骨頭壞死過程中低氧誘導(dǎo)因子1α與骨細(xì)胞凋亡[J]. 趙振群,張志峰,劉萬(wàn)林,白銳,王文選,孫亮.  中國(guó)組織工程研究. 2015(51)
[7]骨髓造血細(xì)胞DNA氧化損傷與骨細(xì)胞凋亡在早期激素性股骨頭壞死中的表現(xiàn)[J]. 趙振群,劉萬(wàn)林,龔瑜林,白銳,王文選.  中國(guó)組織工程研究. 2015(11)
[8]脂質(zhì)代謝及破骨細(xì)胞活性在激素性股骨頭壞死塌陷發(fā)生過程中的作用研究[J]. 童培建,肖魯偉,季衛(wèi)鋒,田琨.  中國(guó)骨傷. 2009(02)
[9]激素性股骨頭缺血壞死與血管壁中主要促血管生長(zhǎng)因子生理活性關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 馮衛(wèi),劉萬(wàn)林,蘇秀蘭,郝廷,白志剛,黃健,吳一民,托婭,白銳.  中華創(chuàng)傷骨科雜志. 2008 (10)



本文編號(hào)：2989813