目的觀察絲氨酸/蘇氨酸激酶31（STK31）在骨肉瘤中的表達(dá)及其對骨肉瘤惡性生物學(xué)行為的影響。方法收取15例骨肉瘤組織標(biāo)本及瘤旁正常組織標(biāo)本,利用免疫組織化學(xué)技術(shù)、實時定量PCR技術(shù)和Western blot技術(shù)檢測腫瘤組織及瘤旁正常組織中STK31的表達(dá);構(gòu)建STK31敲除質(zhì)粒pGenesil-STK31-shRNA,以骨肉瘤細(xì)胞系MG63細(xì)胞為靶細(xì)胞轉(zhuǎn)染pGenesil-STK31-shRNA或?qū)φ召|(zhì)粒pGenesil-1,通過CCK8細(xì)胞活性實驗,檢測STK31對MG63細(xì)胞增殖能力的影響;Tanswell實驗觀察STK31對骨肉瘤細(xì)胞遷移能力的影響。結(jié)果免疫組織化學(xué)顯示腫瘤組織中STK31表達(dá)明顯高于瘤旁正常組織;實時定量PCR檢測骨肉瘤STK31mRNA的表達(dá)量顯著高于瘤旁正常組織[（3.65±0.83）vs.（1.05±0.14）,P<0.05];Western blot顯示腫瘤組織中STK31蛋白表達(dá)顯著高于瘤旁正常組織（P<0.05）;CCK8細(xì)胞活性實驗顯示敲除STK31后MG63細(xì)胞增殖能力明顯降低,36h后與對照組相比[（1.71±0.17）vs.（1... 

【文章來源】：重慶醫(yī)學(xué). 2017,46(23)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 免疫組織化學(xué)檢測STK31
    1.3 RNA提取、逆轉(zhuǎn)錄及實時定量PCR
    1.4 Western blot法檢測STK31表達(dá)
    1.5 構(gòu)建STK31敲除質(zhì)粒pGenesil-STK31-shRNA
    1.6 CCK8細(xì)胞活性及Tanswell實驗
    1.7 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 骨肉瘤中STK31表達(dá)升高
    2.2 敲除STK31可抑制骨肉瘤細(xì)胞遷移能力
    2.3 敲除STK31可抑制骨肉瘤細(xì)胞增殖活性
3 討論



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