發(fā)布時(shí)間：2021-01-17 02:53

　　目的:建立脊髓損傷（spinal cord injury,SCI）的大鼠模型。通過檢測(cè)不同損傷時(shí)間點(diǎn)大鼠的脊髓組織中的整體DNA（deoxyribonucleic acid,脫氧核糖核酸）的5hmC（5 hydroxymethylated cytosine,5羥甲基化胞嘧啶）的水平,研究脊髓損傷后脊髓組織整體DNA的5hmC水平與損傷時(shí)間的關(guān)系。檢測(cè)損傷組的脊髓組織和對(duì)照組的脊髓組織,通過QPCR（Real-time Quantitative PCR Detecting System,實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(cè)系統(tǒng)）檢測(cè)相關(guān)TET（ten-eleven translocation）基因的轉(zhuǎn)錄水平,通過Western blot來檢測(cè)TET蛋白的表達(dá)變化。通過抑制TET2蛋白的表達(dá)來檢測(cè)脊髓組織的損傷范圍的改變。通過抑制TET2蛋白的表達(dá)來檢測(cè)脊髓組織與壞死性相關(guān)及與保護(hù)相關(guān)的基因的表達(dá)的改變情況。方法:建立脊髓損傷模型。選取32只5-6月齡的SD大鼠,按照時(shí)間點(diǎn)分為8組（對(duì)照組,損傷3h組,損傷6h組,損傷12h組,損傷24h組,損傷48h組,損傷3d組,損傷7d組）,每組4只老鼠。按照選... 

【文章來源】：大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：39 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

脊髓損傷后DNA5hmC的整體水平變化

脊髓損傷后 TET 酶的變化。（A）脊髓損傷后 24h，對(duì)照組和 SCI 組 TET1 / 2/3 mR的 qPCR 分析，GAPDH 用作對(duì)照。 （B）同時(shí)提取脊髓組織中的蛋白質(zhì)。通過蛋白析檢查對(duì)照組和 SCI 組中的 TET2 蛋白水平,并進(jìn)行 TET2 蛋白的定量分析。 *與對(duì)組相比，P <0.05。 N = 4制 TET2 活性增強(qiáng)脊髓損傷后的壞死體積了確定脊髓損傷后 5hmC 的變化是否會(huì)影響繼發(fā)性脊髓損傷，將一種 TE抑制劑 SC-1 注射到大鼠的脊髓組織中再進(jìn)行損傷造模[13]。在造模完成后間點(diǎn)，迅速?gòu)膿p傷部位取出脊髓，然后切成 1mm 切片，用 0.2％TTC 孵n。結(jié)果顯示 SC1 可增加脊髓組織的壞死體積（圖 3）。這些結(jié)果表明 TE的 5hmc 修飾在脊髓損傷中起關(guān)鍵作用。

S、SCI、SCI+S 分別表示：對(duì)照組，SC-1 組，SCI 組，S后的壞死面積。脊髓損傷后，用 SC-1 處理大鼠 24 小時(shí)示了 TTC 的代表性圖片。 （B）進(jìn)行壞死體積的定量分比，P <0.05; #P <0.05，與 SCI 組相比。 N =4。


本文編號(hào)：2982055