目的:建立脊髓損傷（spinal cord injury,SCI）的大鼠模型。通過檢測不同損傷時間點大鼠的脊髓組織中的整體DNA（deoxyribonucleic acid,脫氧核糖核酸）的5hmC（5 hydroxymethylated cytosine,5羥甲基化胞嘧啶）的水平,研究脊髓損傷后脊髓組織整體DNA的5hmC水平與損傷時間的關系。檢測損傷組的脊髓組織和對照組的脊髓組織,通過QPCR（Real-time Quantitative PCR Detecting System,實時熒光定量核酸擴增檢測系統(tǒng)）檢測相關TET（ten-eleven translocation）基因的轉錄水平,通過Western blot來檢測TET蛋白的表達變化。通過抑制TET2蛋白的表達來檢測脊髓組織的損傷范圍的改變。通過抑制TET2蛋白的表達來檢測脊髓組織與壞死性相關及與保護相關的基因的表達的改變情況。方法:建立脊髓損傷模型。選取32只5-6月齡的SD大鼠,按照時間點分為8組（對照組,損傷3h組,損傷6h組,損傷12h組,損傷24h組,損傷48h組,損傷3d組,損傷7d組）,每組4只老鼠。按照選... 

【文章來源】：大連醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：39 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

脊髓損傷后DNA5hmC的整體水平變化

脊髓損傷后 TET 酶的變化。（A）脊髓損傷后 24h，對照組和 SCI 組 TET1 / 2/3 mR的 qPCR 分析，GAPDH 用作對照。 （B）同時提取脊髓組織中的蛋白質。通過蛋白析檢查對照組和 SCI 組中的 TET2 蛋白水平,并進行 TET2 蛋白的定量分析。 *與對組相比，P <0.05。 N = 4制 TET2 活性增強脊髓損傷后的壞死體積了確定脊髓損傷后 5hmC 的變化是否會影響繼發(fā)性脊髓損傷，將一種 TE抑制劑 SC-1 注射到大鼠的脊髓組織中再進行損傷造模[13]。在造模完成后間點，迅速從損傷部位取出脊髓，然后切成 1mm 切片，用 0.2％TTC 孵n。結果顯示 SC1 可增加脊髓組織的壞死體積（圖 3）。這些結果表明 TE的 5hmc 修飾在脊髓損傷中起關鍵作用。

S、SCI、SCI+S 分別表示：對照組，SC-1 組，SCI 組，S后的壞死面積。脊髓損傷后，用 SC-1 處理大鼠 24 小時示了 TTC 的代表性圖片。 （B）進行壞死體積的定量分比，P <0.05; #P <0.05，與 SCI 組相比。 N =4。


本文編號：2982055