目的通過(guò)正常和OA大鼠的軟骨細(xì)胞和軟骨下骨的成骨細(xì)胞共培養(yǎng)體系,觀察各組軟骨細(xì)胞中Wnt信號(hào)通路關(guān)鍵分子的表達(dá)及軟骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞代謝相關(guān)因子的表達(dá)并進(jìn)一步探討降鈣素（calcitonin,CT）對(duì)軟骨細(xì)胞-成骨細(xì)胞間交互作用和Wnt信號(hào)通路活性的影響。方法14周齡SPF級(jí)雌性SD大鼠20只,10只通過(guò)前交叉韌帶切斷術(shù)（anterior cruciate ligament transection,ACLT）建立骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis,OA）模型,10只做假手術(shù)對(duì)照,術(shù)后6周頸椎脫臼法處死SD大鼠,無(wú)菌條件下分離出雙側(cè)膝關(guān)節(jié)的軟骨和軟骨下骨,應(yīng)用酶消法培養(yǎng)大鼠原代正常軟骨細(xì)胞（normal chondrocytes,NC）、OA軟骨細(xì)胞（osteoarthritis chondrocytes,OAC）、正常成骨細(xì)胞（normal osteoblast,NOB）、OA成骨細(xì)胞（osteoarthritis osteoblast,OAB）,并傳代培養(yǎng)。通過(guò)阿爾新藍(lán)染色、免疫熒光染色法（immunofluorescence,IF）檢測(cè)Ⅱ型膠原（collagen typeⅡ,CO... 

【文章來(lái)源】：華北理工大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

原代軟骨細(xì)胞培養(yǎng)4天后細(xì)胞形態(tài)（40×）

華北理工大學(xué)碩士學(xué)位論文-14-應(yīng)用酶消法提取成骨細(xì)胞后，培養(yǎng)瓶中呈現(xiàn)渾濁狀態(tài)，原代接種5天后，可見(jiàn)細(xì)胞在細(xì)小骨塊周圍長(zhǎng)出，細(xì)胞呈梭形或多邊形，8天后成骨細(xì)胞生長(zhǎng)聚集成為圓片狀，靠近圓心處細(xì)胞較細(xì)長(zhǎng)，伴有遮光性強(qiáng)的單核細(xì)胞。10天時(shí)細(xì)胞密度較高，呈梭型，折光性較差，呈弱旋渦狀排列(如圖2)。圖2原代成骨細(xì)胞培養(yǎng)10天后細(xì)胞形態(tài)（40×）1.2.2軟骨細(xì)胞阿爾新藍(lán)染色軟骨細(xì)胞阿爾新藍(lán)染色為陽(yáng)性，軟骨細(xì)胞胞漿為藍(lán)色，細(xì)胞核為藍(lán)色（如圖3）圖3軟骨細(xì)胞阿爾新藍(lán)染色（100×）

華北理工大學(xué)碩士學(xué)位論文-14-應(yīng)用酶消法提取成骨細(xì)胞后，培養(yǎng)瓶中呈現(xiàn)渾濁狀態(tài)，原代接種5天后，可見(jiàn)細(xì)胞在細(xì)小骨塊周圍長(zhǎng)出，細(xì)胞呈梭形或多邊形，8天后成骨細(xì)胞生長(zhǎng)聚集成為圓片狀，靠近圓心處細(xì)胞較細(xì)長(zhǎng)，伴有遮光性強(qiáng)的單核細(xì)胞。10天時(shí)細(xì)胞密度較高，呈梭型，折光性較差，呈弱旋渦狀排列(如圖2)。圖2原代成骨細(xì)胞培養(yǎng)10天后細(xì)胞形態(tài)（40×）1.2.2軟骨細(xì)胞阿爾新藍(lán)染色軟骨細(xì)胞阿爾新藍(lán)染色為陽(yáng)性，軟骨細(xì)胞胞漿為藍(lán)色，細(xì)胞核為藍(lán)色（如圖3）圖3軟骨細(xì)胞阿爾新藍(lán)染色（100×）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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