目的:（1）觀察右美托咪定預處理是否通過抑制過度的內(nèi)質網(wǎng)應激及PERK通路介導的細胞凋亡對缺血再灌注損傷心肌起保護作用;（2）探討PERK通路與?₂腎上腺素能受體的關系。方法:將符合實驗標準的60只雄性SD大鼠隨機分為5組（n=12）:（1）對照組（Control組）:用K-H溶液持續(xù)灌注205min;（2）缺血再灌注組（I/R組）:平衡灌注15min后,K-H溶液持續(xù)灌注30min,繼之停止灌注40min,隨后再灌注120min;（3）右美托咪定預處理組（DEX組）:平衡灌注15min后,用含右美托咪定（10 nM）的K-H溶液持續(xù)灌注30min,余處理同I/R組;（4）?₂腎上腺素能受體阻滯劑育亨兵處理組（YOH組）:平衡灌注15min后,用含育亨兵（1?M）的K-H溶液持續(xù)灌注30min,余處理同I/R組;（5）右美托咪定預處理+育亨兵處理組（DEX+YOH組）:用含有右美托咪定（10 nM）以及育亨兵（1?M）的K-H溶液持續(xù)灌注30min,余處理同I/R組。經(jīng)Lab Chart系統(tǒng)記錄大鼠平衡末（T₁）、缺血前... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

心臟Langendorff離體灌注及缺血再灌注模型實驗分組圖

⑥一抗反應、洗膜：用 TBST 稀釋一抗(anti-GRP78，1/1000；anti-PERK，1/1000；anti-p-PERK，1/1000； anti-eIF2α，1/1000；anti-p-eIF2α，1/1000；anti-ATF4，1/1000；anti- CHOP，1/1000； anti-GAPDH，1/1000)，將⑤中的 PVDF 膜加入一抗工作液，在 4 ℃條件下，孵育過夜，繼之用 TBST 洗滌 3 次；⑦二抗反應、洗膜：用 TBST 按照 1：10000 稀釋熒光二抗，并將⑥中反應膜加入到二抗工作液里避光孵育 2h，接著用 TBST 洗膜 2 次；⑧顯色、成像、測定：按照 ECL 試劑盒說明，將 1：1 混合后的液體在 PVDF 膜上均勻鋪上，而后在室溫中孵育 4min，接著倒掉 PVDF 膜上多余液體，最后目標蛋白用ECL 系統(tǒng)測定。1.3.8 實驗流程圖

21圖 3 各組實驗大鼠在不同時點心功能比較(A)各組大鼠在 T1、T2、T3時點 HR 的比較；(B)各組大鼠在 T1、T2、T3時點 RPP 的比較；(C)各組大鼠在 T1、T2、T3時點+dp/dtmax的比較；(D)各組大鼠在 T1、T2、T3時點-dp/dtmax的比較；(E)各組大鼠在 T1、T2、T3時點 LVDP的比較；(F)各組大鼠在 T1、T2、T3時點 LVEDP 的比較注：與 T1時點比較， P 0.05;T3時點，與 Control 比較，#P 0.05；與 I/R 組比較， P 0.05；與 DEX 組比較， P 0.05

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2971736