目的在體外建立OGD/R細(xì)胞模型,探究SH-SY5Y細(xì)胞中Nrf2與線粒體分裂存在的調(diào)控關(guān)系,以及這種關(guān)系是否經(jīng)由調(diào)控Drp1實(shí)現(xiàn)。方法正常培養(yǎng)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞（SH-SY5Y細(xì)胞）,通過三氣培養(yǎng)箱和無糖培養(yǎng)基模擬OGD/R的條件,參考文獻(xiàn)選取氧糖剝奪時(shí)間長(zhǎng)度分別為4 h、6 h、8 h和10 h同時(shí)選取恢復(fù)時(shí)間長(zhǎng)度為0 h、6 h、12 h、18 h、24 h,組合得出OGD/R的預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí)間組合,細(xì)胞經(jīng)過不同OGD/R處理后,通過CCK8檢測(cè)細(xì)胞的存活率,以細(xì)胞凋亡明顯但仍有半數(shù)存活時(shí)間組合作為建立細(xì)胞OGD/R模型的時(shí)間條件;根據(jù)分組不同用Nrf2激動(dòng)劑tBHQ、抑制劑Brusatol和賦形劑對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞進(jìn)行4h預(yù)處理后進(jìn)行OGD/R操作,分組如下:（1）OGD/R組:將8000SH-SY5Y細(xì)胞接種于96孔板中,穩(wěn)定一天后,換不含糖的EBSS培養(yǎng)基并放入三氣培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4小時(shí),換成普通培養(yǎng)基并轉(zhuǎn)移至正常含氧的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18小時(shí)（OGD4h/R18h）;（2）OGD/R+tBHQ組:SH-SY5Y細(xì)胞換含有tBHQ的正常培養(yǎng)基（終濃度25μM）預(yù)處理4h,然后進(jìn)行OGD/R操作;... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

SH-SY5Y細(xì)胞和PC-12細(xì)胞中Nrf2、Drp1蛋白的表達(dá)對(duì)比(*P<0.05，#P>0.05)

圖 2 不同氧糖剝奪與再灌時(shí)間下細(xì)胞的存活率ru 對(duì)細(xì)胞內(nèi) Nrf2 的影響rf2 的常用的激動(dòng)劑，處理后，SH-SY5Y 細(xì)胞中 Nrf2 的表 是 Nrf2 的抑制劑，處理后，SH-SY5Y 細(xì)胞中 Nrf2 的表達(dá)

圖 2 不同氧糖剝奪與再灌時(shí)間下細(xì)胞的存活率 和 Bru 對(duì)細(xì)胞內(nèi) Nrf2 的影響Q 是 Nrf2 的常用的激動(dòng)劑，處理后，SH-SY5Y 細(xì)胞中 Nrf2 的表達(dá)檢測(cè)而 Bru 是 Nrf2 的抑制劑，處理后，SH-SY5Y 細(xì)胞中 Nrf2 的表達(dá)檢測(cè)量 3。


本文編號(hào)：2961776