目的:利用非病毒性的基因傳遞方法,將編碼血管生成素（angiogenin,Ang）的基因引入一種真皮替代物——聚乳酸-聚羥基乙酸編織網(wǎng)強(qiáng)化的膠原殼聚糖真皮支架（polylactic-co-glycolic acid knitted mesh reinforced collagen chitosan dermal scaffold,PLGAm/CCS）,構(gòu)建Ang基因活化真皮支架;通過(guò)體外與體內(nèi)實(shí)驗(yàn),證實(shí)其轉(zhuǎn)染效能及介導(dǎo)早期血管化的有效性,揭示Ang功能相關(guān)的機(jī)制及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,為真皮支架早期血管化不足的問(wèn)題提供新的解決方案,為新型真皮替代物的開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。方法:構(gòu)建血管生成素質(zhì)粒DNA并對(duì)其進(jìn)行有效性檢測(cè)。采用pUCm-T載體構(gòu)建出可同時(shí)表達(dá)Ang和強(qiáng)化型綠色熒光蛋白（enhanced green fluorescent protein,EGFP）的質(zhì)粒 DNA（plasmid DNA encoding angiogenin,pAng）,同時(shí)構(gòu)建僅表達(dá)EGFP 的質(zhì)粒 DNA（plasmid DNA encoding EGFP,pEGFP）作為對(duì)照,并通過(guò)基因測(cè)序、核酸電泳等方法驗(yàn)... 

【文章來(lái)源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－２基因載體義合微粒（ＴＥＭ）的徵觀結(jié)構(gòu)

?第一部分??圖１－２基因載體義合微粒（ＴＥＭ）的徵觀結(jié)構(gòu)。??圖１－３?ＰＬＧＡｍ／ＣＣＳ支架（ＳＥＭ）的微觀結(jié)構(gòu)。（Ａ）?ＰＬＧＡｍ／ＣＣＳ巧面結(jié)構(gòu)，??放大倍數(shù)為２０?Ｘ；?（Ｂ）?ＰＬＧＡ網(wǎng)切面結(jié)構(gòu)及ＣＣＳ孔狀結(jié)構(gòu)函，放大倍數(shù)為１００?Ｘ。??３３基因載體復(fù)合傲粒負(fù)載后化ＧＡｍ／ＣＣＳ支架的微觀結(jié)構(gòu)??負(fù)載基因載體復(fù)合微粒后，ＰＬＧＡｍ／ＣＣＳ支架結(jié)構(gòu)及孔隙率基本維持不變，基??因載體復(fù)合微粒主要粗附于孔隙內(nèi)壁，分布較為均勾（圖１－４Ｂ）。??１４??

?ＰＬＧＡｔｎ?ＣＣＳ?ＣＣＳ??圖１－５化ＧＡｍ／ＣＣＳ單位支架質(zhì)量測(cè)定及吸水性能測(cè)試。（Ａ）化ＧＡｍ／ＣＣＳ支??架與ＣＣＳ支架的干重與漫潤(rùn)后４小時(shí)的濕重。（Ｂ）化ＧＡｍ／ＣＣＳ支架與ＣＣＳ??支架的吸水率。??１５??


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