目的研究PPAR-γ激動(dòng)劑,羅格列酮（rosiglitazone,RGZ）對創(chuàng)傷性腦損傷后白質(zhì)的保護(hù)作用,并探討其調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞極化進(jìn)而促進(jìn)復(fù)髓鞘的機(jī)制。方法在體實(shí)驗(yàn)采用C57BL/6小鼠實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)的可控性皮質(zhì)撞擊術(shù),建立腦創(chuàng)傷（traumatic brain injury,TBI）模型。TBI后2 h、12 h、24 h和48 h給與不同劑量的RGZ腹腔注射。在腦損傷后1、3、5、7、14、28天用滾輪、平衡木和水迷宮實(shí)驗(yàn)（術(shù)后30-35天）驗(yàn)證RGZ對小鼠行為學(xué)的影響。腦損傷后35天,用尼氏染色和快藍(lán)染色分別觀察腦組織體積和胼胝體區(qū)髓鞘的變化。采用免疫組織化學(xué)熒光標(biāo)記和實(shí)時(shí)定量PCR檢測M1型小膠質(zhì)細(xì)胞（microglia,MG）和M2型MG極化狀態(tài)。在損傷后第7和35天用免疫組化熒光標(biāo)記和western blotting觀察髓鞘的修復(fù)情況。NG-2/Olig-2與Brdu熒光雙標(biāo)用來觀察OPCs增殖分化。在小鼠胼胝體區(qū)用慢病毒干擾并下調(diào)PPAR-γ三天后,用免疫熒光標(biāo)記觀察MG極化情況,并在蛋白水平上探究組蛋白去乙�；负鸵阴；M蛋白H3、H4表達(dá)變化。離體實(shí)驗(yàn):1)佛波酯（pho... 

【文章來源】：南通大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

小鼠術(shù)后30-35天水迷宮實(shí)驗(yàn)

22圖 4 造模后 35 天尼氏染色和快藍(lán)染色。(A)不同組別小鼠不同層面的腦切片尼式染色；(B)不同組別小鼠大腦；(C)根據(jù)圖 A 定量的腦組織缺損體積；(D)不同組別腦組織的快藍(lán)染色；(E)根據(jù) D 圖統(tǒng)計(jì)的不同組別小鼠 TBI 后胼胝體區(qū)的寬度。n= 4 in pergroup, 2 mg/kg vs.TBI+vehicle，*p< 0.05, **p< 0.01。3.3 RGZ 治療對髓鞘相關(guān)蛋白表達(dá)的影響根據(jù)造模位置和圖 4A，選取前囟前 0.5 mm 運(yùn)用熒光標(biāo)記和蛋白免疫印跡觀察髓鞘相關(guān)蛋白，結(jié)果進(jìn)一步驗(yàn)證得出，無論在 TBI 損傷的前期（圖5B, C, D, E）還是后期(圖 6)，經(jīng) RGZ 治療后，MBP 蛋白（圖中綠色標(biāo)記）表達(dá)顯著增強(qiáng)，SMI-32 熒光強(qiáng)度明顯減弱（圖中紅色標(biāo)記 p< 0.05），都極大提高了損傷周邊區(qū)（圖 5A）髓鞘修復(fù)和軸突的完整性。

結(jié)果進(jìn)一步驗(yàn)證得出，無論在 TBI 損傷的前期（圖5B, C, D, E）還是后期(圖 6)，經(jīng) RGZ 治療后，MBP 蛋白（圖中綠色標(biāo)記）表達(dá)顯著增強(qiáng)，SMI-32 熒光強(qiáng)度明顯減弱（圖中紅色標(biāo)記 p< 0.05），都極大提高了損傷周邊區(qū)（圖 5A）髓鞘修復(fù)和軸突的完整性。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Rosiglitazone ameliorates diffuse axonal injury by reducing loss of tau and up-regulating caveolin-1 expression[J]. Yong-lin Zhao,Jin-ning Song,Xu-dong Ma,Bin-fei Zhang,Dan-dong Li,Hong-gang Pang.  Neural Regeneration Research. 2016(06)



本文編號：2939917