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周期性拉伸應(yīng)力結(jié)合PDMS基底彈性對(duì)兔纖維環(huán)源干細(xì)胞的調(diào)控研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-21 01:20
  目的:將兔纖維環(huán)源干細(xì)胞(AFSCs)種植于不同彈性模量的聚二甲基硅氧烷(PDMS)基底,施加周期性拉伸應(yīng)力(CTS),探討周期性拉伸應(yīng)力結(jié)合不同彈性模量PDMS基底對(duì)AFSCs細(xì)胞相關(guān)代謝的影響。方法:分別以1:40、1:20、1:10的不同比例配制不同彈性PDMS基底,將分離培養(yǎng)出的兔纖維環(huán)源干細(xì)胞種植于不同彈性PDMS基底的硅膠皿上,分別予以連續(xù)三天的靜態(tài)培養(yǎng)及合適條件周期性拉伸應(yīng)力刺激(0.5Hz頻率,5%應(yīng)變量,4小時(shí)/天)。力學(xué)、接觸角測(cè)試PDMS基底的彈性模量、親疏水性。RT-q PCR和Elisa分析檢測(cè)細(xì)胞在不同條件培養(yǎng)后的基因及相關(guān)蛋白的表達(dá)。細(xì)胞增殖及骨架染色試驗(yàn)觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)、形態(tài)變化。結(jié)果:力學(xué)測(cè)試結(jié)果提示三種PDMS基底彈性模量分別為:5.95Mpa,10.33Mpa,15.41Mpa。接觸角測(cè)試顯示三種基底親疏水性無(wú)明顯差異。Col-I基因的表達(dá)量隨著基底彈性模量的增加而增加,Col-II和Aggrecan基因的表達(dá)量則隨之下降。在低彈性基底組,施加CTS的細(xì)胞Col-II和Aggrecan基因的表達(dá)量明顯增高。而在高彈性基底組,施加CTS的細(xì)胞Col-I基... 

【文章來(lái)源】:蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

周期性拉伸應(yīng)力結(jié)合PDMS基底彈性對(duì)兔纖維環(huán)源干細(xì)胞的調(diào)控研究


成形硅膠皿及力學(xué)拉伸儀器2.4AFSCs在不同持續(xù)時(shí)間拉伸力學(xué)刺激后的細(xì)胞形態(tài)觀(guān)察

親疏水性,彈性,細(xì)胞增殖,基底


種不同彈性PDMS基底力學(xué)特性比較,A:應(yīng)力-應(yīng)變曲線(xiàn);B:楊氏模量。*表示計(jì)學(xué)意義。PDMS基底表面親疏水性的表面親疏水性可以影響細(xì)胞的粘附和行為。測(cè)量三種 PDMS 基測(cè)三種彈性模量 PDMS 基底上是否存在表面能的差異,圖 2.2 的結(jié)底的表面親疏水性沒(méi)有明顯差異。

基底,培養(yǎng)條件,靜置培養(yǎng),調(diào)控研究


DMS 基底彈性對(duì)兔纖維環(huán)源干細(xì)胞的調(diào)控研究 第二部分33圖2.3 AFSCs在6組不同條件培養(yǎng)后的細(xì)胞增殖情況2) 細(xì)胞形態(tài)變化AFSCs 在不同培養(yǎng)條件后,應(yīng)用 FITC-Phalloidin 和 DAPI 進(jìn)行細(xì)胞骨架及細(xì)胞核染色,染色結(jié)果如圖 2.4 所示,同樣的外界刺激條件(靜置培養(yǎng)/CTS)下,高彈性模量 PDMS 基底組(1:10)的細(xì)胞在形態(tài)上相對(duì)變得更細(xì)長(zhǎng),近于梭形,而低彈性模量PDMS 基底組(1:40)的細(xì)胞形態(tài)則相對(duì)圓潤(rùn),無(wú)論是靜置培養(yǎng)還是 CTS 刺激培養(yǎng)條件下,都體現(xiàn)這一差異。而在同一彈性模量的 PDMS 基底培養(yǎng)條件下


本文編號(hào):2928914

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