發(fā)布時間：2020-11-21 10:51

　　 研究背景和目的:脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)是由外傷、感染、缺血或相關(guān)病變累及引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病,致殘率和致死率極高,給家庭和社會造成沉重負(fù)擔(dān)。如何使受損的神經(jīng)結(jié)構(gòu)進(jìn)行再生和修復(fù),從而促進(jìn)神經(jīng)功能障礙尤其是運動功能障礙的恢復(fù)仍是當(dāng)前治療的難點和研究的熱點。已有研究表明人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(Human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)移植可治療SCI,但少有對其最佳移植時機和機制進(jìn)行探索。本研究的目的是明確hUC-MSCs治療SCI的最佳時間窗以及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)表達(dá)的變化,為臨床應(yīng)用提供參考。方法:購入并通過貼壁法培育hUC-MSCs,采用改良Allen’s法制作大鼠SCI模型。將45只SD大鼠隨機分3大組:假手術(shù)組、模型組和hUC-MSCs組,每組15只。假手術(shù)組只暴露T8~T10節(jié)段椎板,模型組在暴露后予以打擊;hUC-MSCs組按SCI后細(xì)胞移植時間分為0 h組、8 h組、48 h組、1 w組和2 w組,每組3只,分別在SCI后經(jīng)尾靜脈注入1×10~6/ml×1ml hUC-MSCs。在干預(yù)后第3 d、7 d、14 d、21 d和28 d使用大鼠后肢運動功能評分(Basso,Beattie and Bresnahan locomotor rating score,BBB)量表評估各組大鼠后肢運動功能得分,評分完成后用心臟灌注法取脊髓標(biāo)本并采取印跡法測量iNOS表達(dá)水平。使用SPSS軟件中的t檢驗探尋hUC-MSCs治療大鼠SCI的有效性,通過比較移植組內(nèi)各時間窗植入hUC-MSCs后大鼠運動功能得分的差異找出最佳移植時機和iNOS變化規(guī)律。結(jié)果:隨著時間推移,假手術(shù)組BBB評分無明顯變化,模型組和hUC-MSCs組BBB評分逐漸提高,尤其在損傷后1 w和2 w之間上升最顯著。與假手術(shù)組比較,模型組和hUC-MSCs組BBB得分下降且iNOS表達(dá)量增多;hUC-MSCs組與模型組比較,BBB得分提高更明顯(p0.05)且iNOS表達(dá)量更少。hUC-MSCs組內(nèi),48 h組和1w組與其他組比較,BBB評分提高更明顯且iNOS表達(dá)水平更低。討論:本研究結(jié)果表明hUC-MSCs移植治療大鼠SCI是相對安全而有效的,在SCI后48 h或1 w后進(jìn)行移植可能效果更佳,需要進(jìn)一步的大樣本隨機對照研究。
【學(xué)位單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R651.2
【部分圖文】：

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文 從以上表格可看出， hUC-MSCs 移植組和模型組大鼠的 BBB 評分在第 3 d和第 7 d 無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（p＞0.05），而在 14 d、21 d 及 28d 均存在較大統(tǒng)計學(xué)差異，提示在 SCI 后第 7d 和 14d 之間大鼠 BBB 功能出現(xiàn)較顯著的改變，參考相應(yīng)數(shù)值，從統(tǒng)計學(xué)意義上來說，hUC-MSCs 移植組大鼠的運動功能較模型組有所提高。2、為了解假手術(shù)組、hUC-MSCs 移植組和模型組之間大鼠 BBB 評分隨時間變化的規(guī)律，采用折線圖（圖 2-1）：圖 2-1 各組大鼠 BBB 評分隨時間變化圖

2 1 圖 2-2 說明在移植組當(dāng)中，1 w 和 48 h 植入 hUC-MSCs 的大鼠 BBB 得分比其他時間窗植入 hUC-MSCs 的大鼠得分更高，說明 1 w 和 48 h 可能是 SCI 大鼠進(jìn)行hUC-MSCs 移植治療的最佳時間窗。2.3.5 討論 使用 BBB 功能量表對大鼠進(jìn)行后肢運動功能評分是目前受到較廣泛應(yīng)用的大鼠運動功能評定的方法之一，另外斜板實驗可與之互補，斜板實驗一般在 BBB評分后 30 min 進(jìn)行，檢測大鼠抓握、維持姿勢的能力，做法為：將大鼠身體軸線與有紋理橡膠覆蓋的斜板縱軸垂直放置，從 0°開始，斜板每次升高 5°，以大鼠停留 5 s 不滑下的最大角度為其功能值，本實驗中未進(jìn)行。在本次實驗中，在植入 hUC-MSCs 的第 3 d 和第 7 d，移植組大鼠和模型組大鼠 BBB 功能評分尚未見明顯統(tǒng)計學(xué)差異，在 14 d 才看出兩者 BBB 得分的明顯不同，進(jìn)而推斷出本次實驗中 hUC-MSCs 干預(yù)的起效時間可能在第 7d 與第 14d 之
【參考文獻(xiàn)】

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1 黃懷;陳輝強;張旭;沈丹彤;古菁;葉水林;張成;曾雁雁;王志威;;不同時間窗高壓氧治療對脊髓損傷大鼠的神經(jīng)保護作用[J];中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志;2015年02期

2 王欣;馬汝逸;張文娟;韓寧娟;楊麗嘉;張廣政;;大鼠脊髓急性損傷后不同時間脊髓組織中iNOS陽性細(xì)胞與細(xì)胞凋亡的變化[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2012年05期

3 梁袁昕;楊述華;鄧興力;熊蠡茗;;不同時間干細(xì)胞移植對于脊髓損傷大鼠的作用[J];中國中醫(yī)骨傷科雜志;2009年04期

本文編號：2892900