急性肝損傷作為臨床常見問題之一,受到了廣大醫(yī)學(xué)工作者的長期關(guān)注。其基本病理過程為肝細(xì)胞的大量損傷和肝功能的下降。急性肝功能損傷過程如果不加以控制,則有可能導(dǎo)致會導(dǎo)致肝損傷的進(jìn)一步加重,致使損傷的遷延不愈,形成慢性肝損傷乃肝硬化;更有甚者,短期內(nèi)肝臟損傷程度大大超過肝臟代償能力,導(dǎo)致暴發(fā)性肝衰竭的發(fā)生,嚴(yán)重危害患者生命健康。急性肝損傷的發(fā)病機(jī)制現(xiàn)階段尚未完全闡明,但巨噬細(xì)胞作為機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要組分參與了整個損傷的過程,并在不同階段發(fā)揮出截然不同的生物學(xué)作用。Kv1.3是電壓門控的鉀離子通道,已有多項研究證明其在免疫調(diào)節(jié)中的重要作用。本實(shí)驗室前期研究發(fā)現(xiàn),巨噬細(xì)胞膜上也分布著大量的Kv1.3離子通道。阻斷Kv1.3和/或影響其表達(dá)勢必會對巨噬細(xì)胞功能產(chǎn)生影響其中就包括巨噬細(xì)胞本身的遷移能力。因此,本研究的主要科學(xué)假說為—Kv1.3通過抑制巨噬細(xì)胞遷移能力阻礙巨噬細(xì)胞招募,進(jìn)而減輕急性肝損傷。為了驗證科學(xué)假說及進(jìn)一步探究其可能機(jī)制,我們設(shè)計了以下實(shí)驗:1.建立LPS/D-GaIN聯(lián)合誘導(dǎo)急性肝損傷模型,同時給予MgTX干預(yù)觀察其損傷變化LPS的D-GaIN聯(lián)合誘導(dǎo)的急性肝損傷模型建立成功,模型組肝臟病理學(xué)、血清學(xué)指標(biāo)均較對照組上升,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。同時使用了Kv1.3特異性阻滯劑后,肝損傷指標(biāo)減輕。單獨(dú)運(yùn)用Kv1.3阻滯劑對小鼠本身未產(chǎn)生不良影響。2.檢測急性肝損傷過程中巨噬細(xì)胞招募情況針對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的涂片和對肝臟的CD68免疫組化染色,結(jié)果發(fā)現(xiàn)L/D組小鼠,腹腔巨噬細(xì)胞大量滲出。同時,肝內(nèi)巨噬細(xì)胞比例增高。提示大量單核細(xì)胞來源的巨噬細(xì)胞被招募至肝臟。而MgTX處理后,腹腔巨噬細(xì)胞滲出減少,招募至肝臟的炎性巨噬細(xì)胞相對應(yīng)減少。3.體外探究MgTX對巨噬細(xì)胞遷移能力的影響當(dāng)使用MgTX 10nM處理后,無論是劃痕實(shí)驗還是Transwell實(shí)驗都提示Raw264.7細(xì)胞的遷移能力受到了抑制,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。4.體外探究MgTX對Kv1.3表達(dá)水平的影響采用MgTX 10nM處理后,Raw264.7細(xì)胞的Kv1.3蛋白水平和mRNA水平均未發(fā)生明顯變化,免疫熒光結(jié)果同樣證實(shí)了上述結(jié)果。提示MgTX對于Kv1.3的影響并非通過影響其表達(dá)水平來實(shí)現(xiàn)。5.通過沉默或過表達(dá)Kv1.3輔證其生物學(xué)功能為了證實(shí)Kv1.3對巨噬細(xì)胞遷移功能的影響,我們沉默和過表達(dá)了Kv1.3蛋白。結(jié)果顯示沉默Kv1.3后,巨噬細(xì)胞遷移能力明顯下降。過表達(dá)Kv1.3后,巨噬細(xì)胞遷移能力增加。通過我們的實(shí)驗得出:Mtgx可以抑制巨噬細(xì)胞遷移能力,減少其在炎癥初期的招募減輕肝臟損傷。巨噬細(xì)胞的遷移能力可以被Kv1.3表達(dá)變化所調(diào)控。
【學(xué)位單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R614
【文章目錄】：
中英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
第一部分 阻斷Kv1.3 減輕急性肝損傷的機(jī)制研究前言
    1.前言
    2 材料和方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 異丙酚對巨噬細(xì)胞遷移能力的影響前言
    前言
    2 材料和方法
    3 結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述 麻醉藥物與機(jī)體抗炎免疫
    參考文獻(xiàn)

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 湯為香;沈玉君;李元海;沈玉先;;異丙酚預(yù)處理對大鼠肝臟缺血再灌注損傷時自噬的影響[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2017年12期

2 劉英海;付海鈺;牛潔;古小平;羅嵐琳;鞏固;;丙泊酚通過調(diào)控HDAC1抑制胃癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2017年10期

3 王欣悅;王海云;王國林;楊卓;張濤;;丙泊酚對大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲和遷移能力的影響及ADAR2-AMPA受體GluR2通路在其中的作用[J];中華麻醉學(xué)雜志;2016年06期

4 黃娜娜;孫蓉;;適宜于中藥抗急性肝損傷活性發(fā)現(xiàn)與藥效評價的動物模型應(yīng)用概況[J];中國藥物警戒;2015年11期

5 ZHU Hong;YAN Li;GU JingLi;HAO Wei;CAO JiMin;;Kv1.3 channel blockade enhances the phagocytic function of RAW264.7 macrophages[J];Science China(Life Sciences);2015年09期

6 馬鈴;李萬冬;陳衛(wèi)民;;異丙酚對脂多糖誘導(dǎo)的急性肺損傷大鼠肺組織Toll樣受體表達(dá)的影響[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2009年04期

本文編號：2845753