【摘要】：目的:1、完善新發(fā)現(xiàn)的EXT-2基因上c.824-826delGCA突變所導(dǎo)致的遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤家系的臨床資料;2、驗(yàn)證此位點(diǎn)的缺失突變是導(dǎo)致該家族發(fā)病的主要原因,豐富遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤疾病的基因突變譜,為分子學(xué)診斷遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤提供更完善的資料;3、進(jìn)一步研究此基因突變對轉(zhuǎn)錄層面的影響,探索相關(guān)的致病機(jī)制,為后續(xù)研究遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤的信號(hào)通路及修飾基因提供參考資料。方法:1、分別前往該家族聚居地江蘇太倉及安徽蚌埠實(shí)地調(diào)查家族成員的患病情況,收集并總結(jié)臨床資料,繪制家系圖譜;2、在征得家族成員同意后,收集該家族14名成員的外周血并抽提DNA,設(shè)計(jì)突變位點(diǎn)的引物,進(jìn)行測序驗(yàn)證;3、收集該家族2名患病成員手術(shù)切除的3份骨軟骨瘤組織作為實(shí)驗(yàn)組以及另外三名正常人的膝關(guān)節(jié)軟骨組織作為對照組,在經(jīng)得相關(guān)當(dāng)事人同意后,抽提軟骨組織RNA,并進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序及生物學(xué)分析。結(jié)果:1、該家族共有24名成員,其中7名為患病成員,家族患者符合遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤的發(fā)病特點(diǎn);2、外周血DNA測序發(fā)現(xiàn)7名家族患病成員均存在EXT-2基因c.824-826delGCA雜合性突變,而未患病家族成員未發(fā)現(xiàn)此位點(diǎn)突變;3、轉(zhuǎn)錄組測序發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組與對照組軟骨細(xì)胞中的EXT-2基因的表達(dá)量并無明顯差異;4、實(shí)驗(yàn)組和對照組差異基因GO和KEGG富集分析發(fā)現(xiàn)EXT-2基因c.824-826delGCA雜合性突變影響與遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤發(fā)病相關(guān)的生物過程及信號(hào)通路。結(jié)論:1、該家系為遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤疾病家系;2、該家系發(fā)生遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤的主要原因是EXT-2基因c.824_826delGCA突變,為新發(fā)現(xiàn)的突變位點(diǎn);3、EXT-2基因c.824_826delGCA的突變不影響EXT-2基因的表達(dá)量,但會(huì)通過影響相關(guān)的生物過程和信號(hào)通路導(dǎo)致遺傳性多發(fā)性骨軟骨瘤的發(fā)生。
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R738
【圖文】：

我們在前期臨床工作中發(fā)現(xiàn)一例右肩胛骨處巨大的骨軟骨瘤患者（先證者）（圖1），伴隨全身多處外生性骨疣。并于 2012 年給予手術(shù)切除右肩胛骨處腫瘤，術(shù)后病理診斷為骨軟骨肉瘤。之后我們又發(fā)現(xiàn)先證者的父親及二姐也存在多處骨軟骨瘤（圖2），據(jù)此推測該家族可能為 HME 家系。為進(jìn)一步研究證實(shí)，我們對先證者、先證者父親、先證者母親（非患病成員）、先證者二姐的外周血 DNA 以及先證者的肩胛骨軟骨組織的 DNA 共 5 個(gè) DNA 樣本進(jìn)行了全基因組檢測，結(jié)果顯示三名患病成員的 4個(gè) DNA 樣本 EXT 基因上存在特有且唯一的一個(gè)具有破壞性的突變，位于染色體第44114241 號(hào)位置 EXT-2 基因 c.824-826delGCA。通過查閱萊登突變數(shù)據(jù)庫（LeidenOpen Variation Database,LOVD,https://databases.lovd.nl/shared/genes）發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)為新發(fā)現(xiàn)的突變位點(diǎn)。為研究該家系 HME 的發(fā)病特點(diǎn)，同時(shí)進(jìn)一步驗(yàn)證新發(fā)現(xiàn)的 EXT-2 突變位點(diǎn)為該家系的致病基因

術(shù)后病理診斷為骨軟骨肉瘤。之后我們又發(fā)現(xiàn)先證者的父親及二姐也存在多處骨軟骨瘤（圖2），據(jù)此推測該家族可能為 HME 家系。為進(jìn)一步研究證實(shí)，我們對先證者、先證者父親、先證者母親（非患病成員）、先證者二姐的外周血 DNA 以及先證者的肩胛骨軟骨組織的 DNA 共 5 個(gè) DNA 樣本進(jìn)行了全基因組檢測，結(jié)果顯示三名患病成員的 4個(gè) DNA 樣本 EXT 基因上存在特有且唯一的一個(gè)具有破壞性的突變，位于染色體第44114241 號(hào)位置 EXT-2 基因 c.824-826delGCA。通過查閱萊登突變數(shù)據(jù)庫（LeidenOpen Variation Database,LOVD,https://databases.lovd.nl/shared/genes）發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)為新發(fā)現(xiàn)的突變位點(diǎn)。為研究該家系 HME 的發(fā)病特點(diǎn)，同時(shí)進(jìn)一步驗(yàn)證新發(fā)現(xiàn)的 EXT-2 突變位點(diǎn)為該家系的致病基因，并探討其中的致病機(jī)制，我們進(jìn)行了如下工作：1、收集完善該家系其他成員的臨床資料，制定相應(yīng)的家系圖譜，并對其臨床特點(diǎn)進(jìn)行進(jìn)一步的分析歸納；2、抽取了該家系其他成員的外周血樣本

第一組瓊脂糖凝膠檢測結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 方楚玲;田京;;多發(fā)性骨軟骨瘤發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2014年04期

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本文編號(hào)：2804347