發(fā)布時間：2020-08-13 21:53

【摘要】：研究背景骨關(guān)節(jié)炎是常見的退行性關(guān)節(jié)病變,以進(jìn)行性軟骨破壞、關(guān)節(jié)內(nèi)和關(guān)節(jié)周圍組織炎癥為主要特征。常見癥狀包括慢性疼痛,僵硬,畸形,最終會導(dǎo)致關(guān)節(jié)功能喪失。近些年的研究認(rèn)為炎癥因素和免疫系統(tǒng)在骨關(guān)節(jié)炎的病理改變過程中發(fā)揮了重要的作用。免疫細(xì)胞的侵入和炎癥相關(guān)細(xì)胞因子的過量表達(dá)是骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)內(nèi)組織的特征之一。調(diào)控免疫系統(tǒng),減輕炎癥反應(yīng)成為骨關(guān)節(jié)炎治療新的方向之一。粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)被發(fā)現(xiàn)具有激活炎癥細(xì)胞,刺激炎癥相關(guān)細(xì)胞因子分泌的作用。降低關(guān)節(jié)炎組織中GM-CSF濃度,被認(rèn)為可以減弱炎癥反應(yīng),進(jìn)而保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨,減輕骨關(guān)節(jié)炎癥狀。研究目的使用明膠微球作為藥物載體,研究關(guān)節(jié)腔內(nèi)緩釋GM-CSF抗體對骨關(guān)節(jié)炎的治療作用。研究方法1.對實(shí)驗(yàn)使用的明膠微球進(jìn)行體外載藥率和釋放曲線測定。2.使用關(guān)節(jié)腔注射碘乙酸鈉(2mg,單次注射)的方式建立大鼠骨關(guān)節(jié)炎模型。大鼠分為5組:健康組,建模對照組,微球組,抗體組和微球+抗體組。健康組僅注射PBS,建模對照組僅進(jìn)行建模,其余3組在建�；A(chǔ)上,微球組注射2mg明膠微球,抗體組注射20ugGM-CSF抗體,微球+抗體組注射2mg微球和20ug抗體(注射前完成載藥)。治療注射時間為建模后第2天,注射液體總量均為50ul。在治療開始第一周末和第二周末,處死大鼠,取建模側(cè)膝關(guān)節(jié),脫鈣切片后行HE染色,番紅-固綠染色和Ⅱ型膠原免疫組化染色實(shí)驗(yàn)。對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行mankin's評分和免疫組化光密度測定。研究結(jié)果1.明膠微球?qū)M-CSF抗體的載藥率為76%,藥物釋放曲線穩(wěn)定,在一定時間內(nèi)實(shí)現(xiàn)了較好的緩釋效果。2.建模對照組和微球組切片軟骨破壞情況明顯,mankin's評分最高,且二者之間沒有明顯區(qū)別(P0.05);抗體組和微球+抗體組第一周和第二周的軟骨破壞情況優(yōu)于建模對照組(P0.05),但抗體組第二周軟骨破壞較第一周明顯加重(P=0.022)。Ⅱ型膠原方面,4組骨關(guān)節(jié)炎建模組平均IOD均明顯低于健康組(P0.01),第一周抗體組和微球+抗體組平均IOD略高于建模對照組和微球組(P0.01),第二周抗體組平均IOD明顯下降,和建模對照組無顯著差異(P=0.14),而微球+抗體組仍好于對照組(P0.01)。結(jié)論GM-CSF抗體可以有效延緩骨關(guān)節(jié)炎的病理改變,對骨關(guān)節(jié)炎具有較好的治療作用。以明膠微球?yàn)檩d體,在關(guān)節(jié)腔內(nèi)緩釋GM-CSF抗體可以在較長時間內(nèi)實(shí)現(xiàn)治療效果。
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R684.3
【圖文】：

無論是單純ＰＢＳ溶液中還是在含有膠原酶的ＰＢＳ溶液中，體濃度均隨孵育時間延長而逐漸增加，增長過程較為穩(wěn)定，表明明體可以實(shí)現(xiàn)對ＧＭ－ＣＳＦ的緩釋作用。逡逑關(guān)節(jié)腔注射碘乙酸鈉進(jìn)行骨關(guān)節(jié)炎建模的效果逡逑節(jié)腔注射碘乙酸鈉１０天后處死大鼠（１周組），切開雙側(cè)關(guān)節(jié)腔后，側(cè)，可見建模側(cè)關(guān)節(jié)明顯腫大，軟骨明顯變黃，表面粗糙（圖２），射碘乙酸鈉建模有效。逡逑

Ｄ：抗體組，Ｅ：微球＋抗體組�？梢娊φ战M和微球組均有明顯軟骨破壞，軟骨下逡逑骨組織入侵軟骨層；抗體組和微球＋抗體組未見明顯軟骨破損，但也存在較明顯的軟骨變性逡逑圖４為第二周組結(jié)果，相對第一周，第二周各組軟骨破壞均更為嚴(yán)重，且對比逡逑第一周，最為明顯的是抗體組開始出現(xiàn)明顯的軟骨結(jié)構(gòu)破壞，而微球＋抗體組軟骨逡逑

邋？邋－邋？邋｜逡逑Ｅ逡逑圖３第一周組大鼠膝關(guān)節(jié)切片ＨＥ染色結(jié)果（ｘｌ00倍）。Ａ：健康組，Ｂ：建模對照組，Ｃ：逡逑微球組，Ｄ：抗體組，Ｅ：微球＋抗體組�？梢娊φ战M和微球組均有明顯軟骨破壞，軟骨下逡逑骨組織入侵軟骨層；抗體組和微球＋抗體組未見明顯軟骨破損，但也存在較明顯的軟骨變性逡逑圖４為第二周組結(jié)果，相對第一周，第二周各組軟骨破壞均更為嚴(yán)重，且對比逡逑第一周，最為明顯的是抗體組開始出現(xiàn)明顯的軟骨結(jié)構(gòu)破壞，而微球＋抗體組軟骨逡逑破壞程度最輕，說明單次注射ＧＭ－ＣＳＦ抗體作用周期較短，而本實(shí)驗(yàn)使用的明膠微逡逑球緩釋ＧＭ－ＣＳＦ抗體可以在更長的時期內(nèi)實(shí)現(xiàn)減緩骨關(guān)節(jié)炎進(jìn)展的作用。逡逑２１逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 金麗霞;;藥物緩釋載體材料在醫(yī)藥領(lǐng)域中的研究及應(yīng)用[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年25期

2 康思寧;劉強(qiáng);;骨關(guān)節(jié)炎病理過程與關(guān)節(jié)軟骨特性的改變[J];中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版);2007年04期

本文編號：2792574