【摘要】：目的：分別在退變與正常的腰椎間盤髓核組織中,檢測基質(zhì)金屬蛋白酶-1(MMP-1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)、基質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)和P16的表達(dá),比較MMP-1、MMP-3、MMP-13、P16在兩組中的表達(dá)水平差異,分析MMP-1、MMP-3、 MMP-13與P16表達(dá)的相關(guān)性,以及MMP-1, MMP-3、MMP-13、P16表達(dá)與椎間盤退變等級的相關(guān)性。探索MMP-1、MMP-3、MMP-13與P16在椎間盤退變過程中的意義。方法：選取2013-07～2014-07在東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院脊柱外科住院進(jìn)行手術(shù)的腰椎間盤突出癥患者的髓核標(biāo)本為實驗組,共40例(男19例,女21例)；同期手術(shù)的腰椎骨折患者或特發(fā)性脊柱側(cè)凸患者的腰椎間盤髓核標(biāo)本為對照組,共20例(男13例,女7例)。根據(jù)椎間盤退變Pfirrmann分級對椎間盤進(jìn)行分級,將椎間盤標(biāo)本分為兩份,其中一份行石蠟切片做HE染色及免疫組化染色,另外-份行VVestern-Blot目的蛋白檢測,檢測老化髓核細(xì)胞中MMP-1、MMP-3、 MMP-13與P16的表達(dá),分別記錄細(xì)胞染色陽性率并進(jìn)行分級,對上述四者在實驗組與對照組的表達(dá)進(jìn)行比較,采用等級相關(guān)分析方法分析MMP-1、 MMP-3、MMP-13與P16表達(dá)的相關(guān)性,以及MMP-1、MMP-3、MMP-13、P16表達(dá)與椎間盤退變等級的相關(guān)性。結(jié)果：1、40例退變的椎間盤當(dāng)中MMP-1、MMP-3、MMP-13、P16染色陽性率分別為82.5%(33/40)、77.5%(31/40)、62.5%(25/40)和87.5%(35/40),對照組中MMP-1、MMP-3、MMP-13和P16染色陽性率分別30%(6/20)、15%(3/20)、25%(5/20)和30%(6/20)。 MMP-1、MMP-3、MMP-13、P16染色結(jié)果在兩組之間的表達(dá)差異有顯著意義(p0.001)。2、在實驗組及對照組中,MMP-1、MMP-3、MMP-13及P16蛋白表達(dá)水平呈差異表達(dá),即在實驗組中的表達(dá)高于對照組,其差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3、在實驗組中,將MMP1、MMP-3、MMP-13及P16的染色陽性率等級進(jìn)行相關(guān)性分析,得出MMP-1、MMP-3、P16三者的表達(dá)呈正相關(guān),其中MMP-1與MMP-3的相關(guān)系數(shù)為rs=0.366,p=0.02,中度相關(guān)；MMP-1與P16的相關(guān)系數(shù)為rs=0.418,p=0.007中度相關(guān)；MMP-1與P16的相關(guān)系數(shù)為rs=0.467,p=0.002,中度相關(guān)。MMP-13與MMP-1、MMP-3 、P16的表達(dá)均無相關(guān)性。4、在實驗組中,將MMP-1、MMP-3、MMP-13及P16的Western-Blot目的蛋白檢測結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析,得出MMP-1、MMP-3. P16三者的表達(dá)呈正相關(guān),其中MMP-1與MMP-3的相關(guān)系數(shù)為r5=0.319,p=0.045,中度相關(guān)；MMP-1與P16的相關(guān)系數(shù)為r5=0.447,p=0.004,中度相關(guān)：MMP-3與P16的相關(guān)系數(shù)為rs=0.403,p=0.004,中度相關(guān)。MMP-13與MMP-1、MMP-3、P16的表達(dá)均無相關(guān)性。5、免疫組化染色提示,在實驗組中MMP-1、MMP-3、P16的表達(dá)與退變椎間盤退變等級正相關(guān),其相關(guān)系數(shù)分別為rs=0.646,p0.001,顯著相關(guān)；rs=0.633,p0.001,顯著相關(guān)；r5=0.738,p=0.001,顯著相關(guān)。MMP-13的表達(dá)與退變椎間盤退變等級無明顯相關(guān)性,其相關(guān)系數(shù)分為rs=0.155,p=0.1690.05,無相關(guān)性。6、Western-Blot目的蛋白檢測結(jié)果提示,在實驗組中MMP-1、P16蛋白表達(dá)水平與椎間盤退變等級正相關(guān),其相關(guān)系數(shù)分別為rs=0.415,p=0.004;r5=0.449,p=0.002; MMP-3、MMP-13蛋白表達(dá)水平與椎問盤退變等級無明顯相關(guān)性,其相關(guān)系數(shù)分別為rs=0.063,p=0.349;r5=-0.047,p=0.386。結(jié)論：1、MMP-1、MMP-3、MMP-13與P16在正常及退變的椎間盤髓核組織中均有一定程度的表達(dá),但在退變的椎間盤組織中表達(dá)增高,可能參與了椎間盤退變的發(fā)生發(fā)展過程。2、MMP-1、P16表達(dá)水平與椎間盤退變等級存在正相關(guān)性,MMP-1和P16的共表達(dá)在椎間盤退變過程中可能發(fā)揮了重要作用。3、椎間盤退變過程中MMP-3與MMP-1及P16的表達(dá)存在明確的正相關(guān)性,推測MMP-3可能參與了P16、MMP-1的活化調(diào)控。
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R681.53

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4 劉q

本文編號：2790903