【摘要】：目的:腹股溝疝以手術(shù)治療為主,無(wú)張力修補(bǔ)術(shù)中應(yīng)用不可降解聚合物補(bǔ)片以增強(qiáng)腹股溝腹壁薄弱區(qū),顯著降低了傳統(tǒng)腹股溝疝手術(shù)的復(fù)發(fā)率。但不可降解補(bǔ)片可致患者出現(xiàn)疼痛、補(bǔ)片感染和精索損傷等并發(fā)癥。仿生生物補(bǔ)片是未來(lái)發(fā)展的趨勢(shì)。理想的仿生腹股溝疝補(bǔ)片應(yīng)該具有與腹膜類(lèi)似的結(jié)構(gòu)和成分,還應(yīng)該具有相似的細(xì)胞外基質(zhì)。在組織中,細(xì)胞外基質(zhì)為細(xì)胞提供至關(guān)重要的機(jī)械支撐作用,并引導(dǎo)細(xì)胞的黏附和生長(zhǎng),同時(shí)調(diào)節(jié)其發(fā)展,穩(wěn)態(tài)和再生。異種ECM含量豐富但有潛在種屬間的抗原性,而同種細(xì)胞外基質(zhì)無(wú)免疫原性,但臨床上不易獲得同種細(xì)胞外基質(zhì)材料。乙肝病毒可以引起乙型肝炎及肝纖維化。乙肝病毒侵入肝臟激活肝星狀細(xì)胞并轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞,肝星狀細(xì)胞的激活始終被認(rèn)為是肝纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié)。乙肝患者因人肝星狀細(xì)胞(HSC)被病毒(HBV)持續(xù)激活而過(guò)量分泌膠原等ECM而發(fā)生肝硬化,研究證實(shí)HBV間接激活的HSC分泌膠原的能力比成纖維細(xì)胞更強(qiáng)。本研究將構(gòu)建仿生人源性細(xì)胞外基質(zhì)補(bǔ)片,用于無(wú)張力疝修補(bǔ)術(shù)以減少不可降解補(bǔ)片所致并發(fā)癥。方法:我們靜電紡絲獲取聚己內(nèi)酯(PCL)-明膠(Gelatin)納米支架,檢測(cè)其生物相容性、力學(xué)和孔隙率;再種植HBV激活的HSC,動(dòng)態(tài)培養(yǎng)下HSC分泌膠原與PCL-Gelatin納米纖維交聯(lián),檢測(cè)ECM成分和性能以獲得培養(yǎng)參數(shù);脫細(xì)胞后構(gòu)建人源性細(xì)胞外基質(zhì)仿生補(bǔ)片,用于無(wú)張力疝修補(bǔ)術(shù)以減少不可降解補(bǔ)片所致并發(fā)癥。制備腹溝股疝模型;將仿生補(bǔ)片體內(nèi)移植、定期大體觀察、取材檢測(cè)。結(jié)果:仿生補(bǔ)片對(duì)精索的影響較小,并未形成粘連,在降解的過(guò)程中,可以承受腹腔內(nèi)機(jī)械壓力。目前制備的仿生補(bǔ)片相對(duì)于臨床應(yīng)用的不可降解補(bǔ)片,不僅可以完成修復(fù)疝和維持腹壁完整的功能,而且引起的炎癥反應(yīng)較小,同時(shí)逐漸降解直到最終完全被自身組織替換。因此,結(jié)論:本研究為復(fù)合補(bǔ)片形成自體組織提供了切實(shí)可行的理論和方案。目前已證實(shí)制備的補(bǔ)片可以在體內(nèi)形成組織,為將來(lái)的臨床應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：廈門(mén)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R656.21
【圖文】：

具有較強(qiáng)的細(xì)胞擴(kuò)增能力，以對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)，符合本研究的要求。但是激活ＨＳＣｓ逡逑的方式及主要因素，如ＨＢＶ感染或ＴＧＦ蛋白激活，哪一種是最有效的方式尚不逡逑能確定。如圖２．邋１，我們用ＨｅｐＧ２．２．１５肝癌細(xì)胞共培養(yǎng)和ＴＧＦ－Ｐ浸潤(rùn)分別刺激逡逑肝星狀細(xì)胞，為下一步將不同條件下的肝星狀細(xì)胞種植于疝氣補(bǔ)片產(chǎn)生細(xì)胞外基逡逑質(zhì)做準(zhǔn)備，探究最有效的人源性細(xì)胞外基質(zhì)（ＥＣＭ）仿生補(bǔ)片生產(chǎn)途徑。逡逑７１邋￣￣對(duì)照，未感染邐人源性肝星狀細(xì)胞ＨＳＣ逡逑２邐ＨＢＶ間接感染ＨＳＣ邋ＨｅｐＧ２．邋２．邋１５細(xì)胞與ＨＳＣ細(xì)胞共培養(yǎng)逡逑３邐ＴＧＦ－（３邋刺激邋ＨＳＣ邋邐ＴＧＦ－（３邋１０ｎｇ／ｍｌ邐逡逑（２）邋ＨＢＶ＋ＨＳＣ：邐（３）邋ＴＧＦ－Ｐ＋ＨＳＣ：逡逑（０邋ＨＳＣ：邐ＨＢＶ邋ｉｎｆｅｃｔｅｄ邋ＨｅｐＧ２．２．邋１５邐Ａｄｄ邋ＴＧＦ￣ｐ邋ｔｏ逡逑Ｃｏｎｔｒｏｌ邐ｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ＨＳＣ邐ＨＳＣ邋ｃｕｌｔｕｒｅ逡逑ａ＆ａ邐［Ｊｔ逡逑？ｉｎＵ？．邋Ｖｉｔ邐Ｌ邐Ｊ邐１邋邋？邋ｔ１邋；邋＼邋７邐ｃｕｌｔｕｒｅ逡逑＼邐／邐Ｈ？ｐ６２邋２．邋１５？｜ｆ邋Ｔ－邐．——一，一邐ｒ逡逑－；：：ｒＥ邋Ｈ逡逑ｆｔ邐Ｉ邐ＨＳＣ邋ｃｕｌｔｕｒｅ邐ＰＫＨ２６邋ｓｔａｉｎｉｎ＊逡逑ＨＳＣ邋ｃｕｌｔｕｒｅ邐ＨＢＶＭＳＳｌ染ＨＳＣ邐＇邋ｒ邋：邋ＰＫＨ２ａ．逡逑圖２．１肝星狀細(xì)胞的培養(yǎng)與處理逡逑Ｆｉｇ．２．１邋Ｔｈｅ邋ｃｕｌｔｕｒｅ邋ａｎｄ邋ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｏｆ邋ｈｅｐａｔｉｃ邋ｓｔｅｌｌａｔｅ邋ｃｅｌｌｓ．逡逑２．１肝星狀細(xì)胞的培養(yǎng)逡逑肝星狀細(xì)胞是合成ＥＣＭ的主要細(xì)胞

在補(bǔ)片上生長(zhǎng)，其中與ＨｅｐＧ２．邋２．邋１５共培養(yǎng)己獲得ＨＢＶ刺激的ＨＳＣ增長(zhǎng)率最高，逡逑其次為ＴＧＦ－Ｐ刺激的ＨＳＣｏＭＴＴ檢測(cè)結(jié)果說(shuō)明兩種方法均能刺激ＨＳＣ的生長(zhǎng)，逡逑而ＨＢＶ間接刺激的效果比ＴＧＦ－ｐ更明顯（如圖２．邋４）。逡逑ＭＴＴ邋ａｓｓａｙｓ逡逑＊０？逡逑ＨＳＣ逡逑邐－邐－邐邐逡逑／’邐ＨＳＣ邋＋邋ＨＢＶ逡逑？00邋■邋／逡逑Ｉ邋／／邐ＨＳＣＯＨ．逡逑｜邋＾邋，逡逑Ｓ邋？？逡逑你．—：一邐逡逑Ｔ？ｍ？＜ｄａｙ）逡逑Ｎ邐、邐＇逡逑２３逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2713948