【摘要】：目的:研究骨關(guān)節(jié)炎軟骨下骨和軟骨中Sclerostin、HMGB1的表達(dá)水平變化,探討兩種因子可能參與骨關(guān)節(jié)炎發(fā)生和發(fā)展的機(jī)制。方法:收集20例接受人工全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)的內(nèi)翻畸形膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎脛骨平臺標(biāo)本,其中男性8例,女性12例;年齡61~78歲,平均67.8歲;病程2~5年,平均3.2年。術(shù)前均攝膝關(guān)節(jié)X線片,測量內(nèi)翻角為12.0~25.5°,平均17.6°;骨關(guān)節(jié)炎Kellgren-Lawrance分級:級5例、級15例,均以內(nèi)側(cè)間室病變?yōu)橹�。同一時期20例Garden型股骨頸骨折(年齡均65歲)股骨頭標(biāo)本,平均年齡60.4歲,均行人工髖關(guān)節(jié)置換術(shù)。取脛骨內(nèi)外側(cè)平臺軟骨下骨,行免疫組織化學(xué)染色及實(shí)時熒光定量PCR檢測軟骨下骨中硬化蛋白以及sost基因表達(dá)水平;取脛骨內(nèi)側(cè)平臺軟骨和股骨頭軟骨,行免疫組織化學(xué)染色檢測軟骨組織中HMGB1的表達(dá)水平。分析軟骨下骨中sclerostin的表達(dá)水平與骨關(guān)節(jié)炎K-L分級、WOMAC評分和骨結(jié)構(gòu)參數(shù)改變之間的相關(guān)性;分析軟骨組織中HMGB1的表達(dá)水平與軟骨OARSI評分之間的相關(guān)性。取內(nèi)、外側(cè)脛骨平臺軟骨下骨行Micro-CT檢查,比較骨結(jié)構(gòu)變化差異;計算骨體積分?jǐn)?shù)(bone volume/total volume,BV/TV)、骨小梁數(shù)量(trabecular number,Tb.N)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)、結(jié)構(gòu)模型指數(shù)(structure model index,SMI)、骨小梁分離度(trabecular separation,Tb.Sp);分析軟骨下骨中sclerostin的表達(dá)水平與骨結(jié)構(gòu)參數(shù)之間的相關(guān)性。檢測HMGB1重組蛋白對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)的軟骨分化影響。BMSCs接種于24孔板(1×10~5細(xì)胞/孔),培養(yǎng)37直到融合達(dá)到80%。然后,用軟骨細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)基代替BMSCs的培養(yǎng)基。處理組加入不同濃度的HMGB1重組蛋白,軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基每兩天更換一次。誘導(dǎo)分化持續(xù)7天后,行番紅O染色和實(shí)時定量PCR檢測。結(jié)果:實(shí)時熒光定量PCR檢測和免疫組化結(jié)果顯示,脛骨平臺內(nèi)側(cè)軟骨下骨中硬化蛋白表達(dá)水平較外側(cè)顯著降低,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=5.094,P=0.005);軟骨下骨中硬化蛋白的表達(dá)水平與骨關(guān)節(jié)炎K-L分級、WOMAC評分和骨量呈負(fù)相關(guān)。與股骨頭正常軟骨相比,發(fā)生骨關(guān)節(jié)炎的脛骨內(nèi)側(cè)平臺軟骨組織中HMGB1的表達(dá)水平顯著增高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);關(guān)節(jié)軟骨中HMGB1的表達(dá)水平與軟骨OARSI分級呈正相關(guān)。脛骨平臺軟骨下骨的Micro-CT檢測顯示,與外側(cè)相比,內(nèi)側(cè)軟骨下骨骨量增加,孔隙減少;內(nèi)側(cè)BV/TV、Tb.N、Tb.Th較外側(cè)顯著增高,SMI、Tb.Sp較外側(cè)顯著降低,比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。使用不同濃度梯度的(0、0.5、1μg/L)HMGB1重組蛋白干預(yù)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化,并在刺激后7天測定軟骨分化相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果表明,與未處理組相比,HMGB1重組蛋白處理組Sox9和II型膠原的mRNA水平均顯著下降(P0.05)。此外,ADAMTS4,ADAMTS5,ALP和X型膠原的表達(dá)水平均顯著增加;番紅O染色顯示HMGB1處理組蛋白聚糖合成顯著降低。結(jié)論:骨關(guān)節(jié)炎軟骨下骨中Sclerostin表達(dá)降低、骨量增加,軟骨中HMGB1表達(dá)增加;Sclerostin抑制成骨而HMGB1能抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨分化,這些分子的表達(dá)水平變化和軟骨下骨骨結(jié)構(gòu)的改變在骨關(guān)節(jié)炎發(fā)生和發(fā)展中具有重要意義,未來可能作為骨關(guān)節(jié)炎干預(yù)和治療的新靶點(diǎn)。
【圖文】：

b：膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎 X 片及脛骨平臺截骨塊大體觀。實(shí)驗(yàn)用軟骨下骨標(biāo)本采用自身內(nèi)外側(cè)對照：人工全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)中切取脛骨平臺時，大體觀察見內(nèi)側(cè)軟骨下骨硬化程度較外側(cè)增加（圖 1 b），4 例內(nèi)側(cè)間室關(guān)節(jié)間隙消失伴嚴(yán)重膝關(guān)節(jié)內(nèi)翻畸形。生理鹽水沖洗標(biāo)本，，去除半月板及周圍軟組織。用內(nèi)徑為 1 cm 的圓形孔鉆分別在每 1 例患者內(nèi)、外側(cè)脛骨平臺鉆取圓柱狀軟骨下骨組織進(jìn)行檢測。實(shí)驗(yàn)用軟骨標(biāo)本分兩組：骨關(guān)節(jié)炎軟骨標(biāo)本取自上述全膝關(guān)節(jié)置換的脛骨內(nèi)側(cè)平臺軟骨，共 20 例；而正常組軟骨則來自同一時期內(nèi)因股骨頸骨折（年齡<65 歲）行全髖關(guān)節(jié)置換的股骨頭關(guān)節(jié)軟骨，共 20 例。所有股骨頸骨折均為Garden

b：脛骨內(nèi)外側(cè)平臺軟骨下骨中硬化蛋白的表達(dá)水平差異。1.3.3 脛骨平臺軟骨下骨中 sclerostin 表達(dá)水平與骨關(guān)節(jié)炎 K-L 分級、WOMAC 評分之間的相關(guān)性本組病例 K-L 分級
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R684.3

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張陽洋;高艷虹;;Sclerostin單克隆抗體治療骨質(zhì)疏松的研究進(jìn)展[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2017年10期

2 姚琦;黃鵬;姜華;;Sclerostin與骨質(zhì)疏松研究進(jìn)展[J];山東醫(yī)藥;2011年40期

3 張爽;高艷虹;;sclerostin在骨代謝中的作用和機(jī)制[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2015年04期

4 宋利格,張秀珍;Sclerostin:一個新的骨形態(tài)發(fā)生蛋白抑制物[J];國外醫(yī)學(xué).內(nèi)分泌學(xué)分冊;2005年05期

5 葉燕彬;安榮澤;齊新文;鄺立鵬;陳軍平;王兆杰;;骨質(zhì)疏松合并2型糖尿病老年男性患者血清Sclerostin水平及臨床意義[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報;2016年21期

6 張堯;何耀華;;Sclerostin對骨形態(tài)發(fā)生蛋白2誘導(dǎo)的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響[J];山東醫(yī)藥;2015年28期

7 聶明明;周曉佳;;骨質(zhì)疏松合并2型糖尿病老年男性患者血清Sclerostin水平及臨床意義[J];中國繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育;2017年10期

8 吳雪瑩;張琢;徐天華;杜銀科;王力寧;姚麗;;維持性血液透析患者血清Sclerostin與血管鈣化相關(guān)性分析[J];中國血液凈化;2017年12期

9 朱曉峰;曹燕明;;Sclerostin單克隆抗體:即將出現(xiàn)的治療骨質(zhì)疏松癥的新藥物[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2012年06期

10 曹燕明;朱曉峰;胡健輝;;血清中Sclerostin、RANKL及OPG在老年股骨轉(zhuǎn)子間骨折早期的含量改變及其臨床意義[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2013年03期

相關(guān)會議論文 前5條

1 郭永文;舒睿;韓向龍;白丁;;細(xì)胞分泌Sclerostin調(diào)控正畸牙移動壓力區(qū)的骨吸收[A];第十一屆全國生物力學(xué)學(xué)術(shù)會議暨第十三屆全國生物流變學(xué)學(xué)術(shù)會議會議論文摘要匯編[C];2015年

2 賈浩波;馬劍雄;馬信龍;;雌激素單獨(dú)或與甲狀旁腺激素聯(lián)合應(yīng)用對去勢大鼠脊柱MEF2和Sclerostin表達(dá)及骨量的作用[A];第二十一屆全國中西醫(yī)結(jié)合骨傷科學(xué)術(shù)研討會暨骨傷科分會換屆大會論文匯編[C];2014年

3 刁曉鷗;辛海濤;;沖擊損傷后種植體周圍骨組織微結(jié)構(gòu)的變化與Sclerostin的表達(dá)[A];第十一次全國口腔修復(fù)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2017年

4 李婧瑜;韓向龍;白丁;;Sclerostin在膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨下骨硬化中的作用[A];第十一屆全國生物力學(xué)學(xué)術(shù)會議暨第十三屆全國生物流變學(xué)學(xué)術(shù)會議會議論文摘要匯編[C];2015年

5 郭穎;;卵巢摘除后大鼠下頜磨牙牙槽間隔處骨細(xì)胞分泌蛋白sclerostin的組織學(xué)分布討論[A];第十次全國牙周病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2014年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 桑偉林;Sclerostin與HMGB1參與骨關(guān)節(jié)炎骨軟骨退變的臨床和基礎(chǔ)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2018年

2 吳毛;胸腰段椎體骨折形態(tài)與椎管狹窄相關(guān)性研究及Sclerostin對成骨分化的影響[D];蘇州大學(xué);2016年

3 林初文;Sclerostin分子在骨骼力學(xué)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的作用及其機(jī)制研究[D];上海交通大學(xué);2009年

4 王曉桃;MIP-1α和sclerostin在骨髓瘤骨病患者中的表達(dá)及相互關(guān)系的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 馮雪;維持性血液透析患者sclerostin與血管鈣化之間的關(guān)系[D];河北醫(yī)科大學(xué);2016年

2 陳悅;機(jī)械壓應(yīng)力環(huán)境中sclerostin對成牙骨質(zhì)細(xì)胞功能調(diào)節(jié)機(jī)制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

3 溫媛媛;糖皮質(zhì)激素對人血清sclerostin水平及骨轉(zhuǎn)換生物標(biāo)記的影響及其臨床意義[D];鄭州大學(xué);2012年

4 賀玉杰;Sclerostin水平在強(qiáng)直性脊柱炎和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血清中的變化及臨床意義[D];鄭州大學(xué);2011年

5 謝成龍;吲哚美辛對大鼠創(chuàng)傷后異位骨化形成中Sclerostin及COX-2表達(dá)的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2017年

6 李書琴;骨形成蛋白2調(diào)控成牙骨質(zhì)細(xì)胞中sclerostin表達(dá)變化的初步研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

7 刁曉鷗;沖擊損傷后種植體周圍骨組織微結(jié)構(gòu)的變化與改建過程中Sclerostin的表達(dá)[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2016年

8 吳學(xué)倫;2型糖尿病患者血清Sclerostin和Dkk1水平與骨密度相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

9 霍苗苗;DMP-1、E11、Sclerostin在高磷誘導(dǎo)的血管鈣化中的表達(dá)及硫代硫酸鈉的干預(yù)作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

10 葉燕彬;鐵蓄積兔OPF愈合過程中血清Sclerostin表達(dá)變化及意義[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2017年

本文編號：2670868