【摘要】：研究背景與目的帕金森病是一種比較常見的以神經(jīng)退行性病變?yōu)椴±砘A,以大腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元進行性丟失為特點的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。由于神經(jīng)干細胞具有修復神經(jīng)系統(tǒng)損傷的可能性,干細胞移植已成為治療神經(jīng)退行性疾病的一種很有前途的策略。但是,干細胞移植面臨著移植后干細胞不正常分化和存活率較低的兩大難題。研究發(fā)現(xiàn)干細胞的存活和分化與干細胞的微環(huán)境密切相關(guān)。懸浮培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞能夠部分自我分化,并形成包含干細胞、膠質(zhì)細胞以及神經(jīng)元細胞的細胞球,這些部分分化的細胞能夠預先形成干細胞微環(huán)境。因此,以神經(jīng)球替代單個細胞進行細胞移植可能具有更好的效果。另外,帕金森病治療的一個關(guān)鍵技術(shù)就是腦深部電刺激治療,有研究發(fā)現(xiàn)電刺激能夠促進神經(jīng)的再生。目前,腦深部電刺激對于小鼠帕金森模型神經(jīng)發(fā)生的研究尚無報告。因此,通過本次實驗,希望能夠?qū)崿F(xiàn)以下目的:系統(tǒng)的研究神經(jīng)干細胞球在體外生長和分化以及其內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)特點,并比較單個神經(jīng)干細胞和神經(jīng)球移植治療效果的不同及其可能的影響因素;設計出簡單實用的小鼠腦深部電刺激電極;探索神經(jīng)干細胞移植聯(lián)合腦深部電刺激治療帕金森病的可能;最終,尋找一種能夠提高干細胞移植后細胞存活和治療效果的方法。研究方法1.神經(jīng)干細胞源自孕14-15天的轉(zhuǎn)基因C57/JeGFP小鼠。通過Western blot技術(shù)、細胞流式分析、透射電鏡技術(shù)、免疫熒光技術(shù)、細胞劃痕實驗和細胞耐氧化損傷實驗等方法研究神經(jīng)干細胞球體外培養(yǎng)時生長特點,并通過動物實驗比較移植后單個細胞和神經(jīng)球?qū)π∈笈两鹕∧Ｐ偷闹委熥饔谩?.使用帶有絕緣涂層的銅絲和導電滑環(huán)設計出針對小鼠的可持續(xù)通電的電刺激裝置,并觀察電刺激對小鼠活動的影響,以及持續(xù)電刺激對神經(jīng)發(fā)生的影響。3.結(jié)合神經(jīng)干細胞移植以及電刺激技術(shù),進一步探索干細胞移植聯(lián)合腦深部電刺激技術(shù)對小鼠帕金森病模型治療作用。結(jié)果1.神經(jīng)干細胞體外培養(yǎng)過程中形成的神經(jīng)干細胞球其內(nèi)部細胞能夠部分分化成成熟的神經(jīng)元,并形成縫隙連接、橋粒連接和突觸聯(lián)系。2.神經(jīng)球相較于單個細胞移植能使移植的細胞更好的存活并對小鼠帕金森模型起到好的治療作用。3.使用漆包超細銅絲和導電滑環(huán)設計出了小鼠專用的腦深部電刺激電極。更重要是,通過對安裝電極的10只小鼠連續(xù)10天的電刺激觀察,沒有發(fā)現(xiàn)電極部位感染或者電極松動的情況。4.神經(jīng)干細胞球聯(lián)合腦深部電刺激技術(shù)能夠起到對帕金森病小鼠更好的治療效果。結(jié)論1.神經(jīng)球內(nèi)的細胞在體外培養(yǎng)過程中已經(jīng)有部分分化并形成細胞間連接,形成的類似干細胞微環(huán)境利于移植后干細胞的存活。2.我們設計的腦深部電刺激電極簡單易行,可用于小鼠的持續(xù)電刺激。3.干細胞移植聯(lián)合腦深部電刺激能夠?qū)ε两鹕⌒∈笃鸬礁玫闹委熜Ч?br>【圖文】：

功能得到有效改善，，短期隨訪結(jié)果令人滿意，并很快在臨床得到推廣。但長期隨逡逑訪結(jié)果卻顯示，半月板全切除術(shù)后可引起長期膝關(guān)節(jié)功能不全，遠期并發(fā)膝關(guān)節(jié)逡逑退變、骨關(guān)節(jié)炎［４］（圖１－１）。逡逑ＵRG１逡逑半月板切除邐骨關(guān)節(jié)炎邐關(guān)節(jié)置換逡逑圖１－１半月板切除術(shù)后繼發(fā)骨關(guān)節(jié)炎模式圖逡逑７逡逑

３％透明質(zhì)酸逡逑＿糖蛋白口應蛋白逡逑圖１－４半月板細胞外基質(zhì)的組成成分逡逑從微觀空間結(jié)構(gòu)觀察：半月板的空間結(jié)構(gòu)是由特殊的膠原纖維排列維持的，逡逑主要是由沿著其半圓形結(jié)構(gòu)的環(huán)形纖維和間隔排列的輻射狀纖維維持（圖１－５）。逡逑“取向”性的膠原纖維排列和半月板的生物力學性能密切相關(guān)。因此重建空間仿生逡逑結(jié)構(gòu)的半月板的再生極其關(guān)鍵。逡逑酬面射棚}卞義匣沸謂涸ㄗ聰宋義稀懊ㄏ宋卞危卞危插危沖義賢跡保蛋朐擄逑宋帕懈磐煎義希保礱媯玻“宀悖常醒脛魈宀沐義習朐擄逋夤坌翁厥�，大小、尺度精志G�；微观组成成分竻矙熏各成贩N義霞浞⒒酉嗷シ蠢『透悍蠢∩δ芎托畔⒋跡歡撈氐奈⒐劭占浣峁貢Ｖち肆ρу義顯睪珊痛藎ㄍ跡保叮�。因此，从临磻K窖У慕嵌確治觶嘶指湊５南ス亟詮﹀義夏�，眳Q敕律０朐擄宓耐廡�、微观组成成分及其微观空间结构，构建半該镥辶x咸媧锘蜃櫓こ貪朐擄�。辶x希保板義

本文編號：2597023