【摘要】：目的觀察蜂毒肽(Melittin)對IL-1β誘導(dǎo)的大鼠終板軟骨細(xì)胞(endplate chondrocytes,EPCs)Ⅱ型膠原表達的影響。方法取4周齡SD大鼠進行腰椎EPCs培養(yǎng),并行形態(tài)學(xué)觀察、甲苯胺藍染色及Ⅱ型膠原免疫熒光染色鑒定。取第3代EPCs,采用MTT法確定IL-1β及Melittin對細(xì)胞干預(yù)的最適濃度。然后將第3代EPCs隨機分為4組:A組為正常組,不加任何藥物;B組加入最適濃度的IL-1β;C組加入最適濃度的Melittin;D組加入最適濃度的IL-1β及Melittin;干預(yù)48 h后采用Western blot法檢測Ⅱ型膠原表達。結(jié)果倒置顯微鏡觀察示,第1代細(xì)胞多呈多角形,第5代后細(xì)胞增殖能力逐漸減弱,細(xì)胞形態(tài)向梭形轉(zhuǎn)變。細(xì)胞質(zhì)中的酸性黏液物質(zhì)(如蛋白多糖)被甲苯胺藍染成深藍色。免疫熒光染色標(biāo)記Ⅱ型膠原后,可見細(xì)胞骨架部分呈陽性表達(呈綠色熒光)。MTT法檢測示,在干預(yù)24、48 h后,IL-1β及Melittin對EPCs均有抑制作用,并呈劑量依賴性,最終確定IL-1β及Melittin干預(yù)的最適濃度分別為10 ng/mL和1.0μg/mL。Western blot法檢測示,與A組比較,B組IL-1β干預(yù)后Ⅱ型膠原表達明顯減少,C組Melittin干預(yù)后Ⅱ型膠原表達明顯增加,但D組與A組比較無明顯差異。A、B、C、D組Ⅱ型膠原相對表達量分別為0.991±0.024、0.474±0.127、1.913±0.350、1.159±0.297,除A、D組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)外,其余組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論研究表明Melittin具有保護終板軟骨作用,為其用于防治脊柱退變性疾病提供了相關(guān)實驗依據(jù)。

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 徐宏光;陳小虎;王弘;王凌挺;陳學(xué)武;;兔椎體軟骨終板血管芽增齡性變化[J];中華骨科雜志;2011年04期

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 王凌挺;徐宏光;王弘;劉平;陳學(xué)武;楊曉明;張s，

本文編號：2588297