【摘要】：目的:探討端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶對(duì)缺血再灌注誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡的影響。方法:利用腺病毒將端粒酶催化亞基轉(zhuǎn)染至鼠心肌細(xì)胞,利用慢病毒介導(dǎo)小干擾核糖核酸(siRNA)沉默心肌細(xì)胞TERT基因,用7-ADD/Annexin V-APC雙染,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡,ELASA檢測(cè)端粒酶的活性,REAL-TIME PCR檢測(cè)原心肌細(xì)胞TERT、CytC、p21的miRNA表達(dá),Western Blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后心肌細(xì)胞TERT、CytC、p21蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果:TERT基因和P21基因的表達(dá)在TERT過(guò)表達(dá)組最高,TERT沉默表達(dá)組最低,而CytC基因的表達(dá)在TERT過(guò)表達(dá)組最低,TERT沉默表達(dá)組最高。同時(shí)TERT過(guò)表達(dá)組心肌細(xì)胞的凋亡率明顯低于TERT沉默表達(dá)組心肌細(xì)胞,而正常大鼠心肌細(xì)胞組心肌細(xì)胞的凋亡率介于兩者之間。結(jié)論:TERT能增強(qiáng)心肌細(xì)胞端粒酶活性,外源性TERT的轉(zhuǎn)染可促進(jìn)心肌細(xì)胞TERT的表達(dá),并增強(qiáng)端粒酶活性,抑制缺血再灌注誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡,其機(jī)制可能與對(duì)p21及CytC基因表達(dá)的調(diào)控有關(guān)。
【圖文】：

圖 1 REAL-TIME PCR 檢測(cè)原心肌細(xì)胞 TERT、CytC、p21 基因的表達(dá)。I/R 組和 control 組比較*p<0.05。2.2 慢病毒的轉(zhuǎn)染通過(guò) Western Blot 方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后心肌細(xì)胞 TERT、CytC、p21 蛋白表達(dá)的變化，，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖 2-5，TERT 和 P21 蛋白的表達(dá)在 A 組最高，而 D

CR 檢測(cè)原心肌細(xì)胞 TERT、CytC、p21 基因的表達(dá)。I/R 組和 c轉(zhuǎn)染stern Blot 方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后心肌細(xì)胞 TERT、驗(yàn)結(jié)果如圖 2-5，TERT 和 P21 蛋白的表達(dá)在21 的表達(dá)明顯低于其余各組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)達(dá)在 D 組最高，而在 A 組最低，差異均有統(tǒng)計(jì)E 三組之間 TERT、CytC、P21 的表達(dá)均無(wú)顯毒通過(guò)轉(zhuǎn)染可有效改變心肌細(xì)胞 TERT 的 表達(dá)的變化也同樣會(huì)影響 P21 及 CytC 的表
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R654.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2571203