【摘要】：目的:探討端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶對缺血再灌注誘導的心肌細胞凋亡的影響。方法:利用腺病毒將端粒酶催化亞基轉(zhuǎn)染至鼠心肌細胞,利用慢病毒介導小干擾核糖核酸(siRNA)沉默心肌細胞TERT基因,用7-ADD/Annexin V-APC雙染,流式細胞儀檢測細胞凋亡,ELASA檢測端粒酶的活性,REAL-TIME PCR檢測原心肌細胞TERT、CytC、p21的miRNA表達,Western Blot檢測轉(zhuǎn)染后心肌細胞TERT、CytC、p21蛋白表達的變化。結(jié)果:TERT基因和P21基因的表達在TERT過表達組最高,TERT沉默表達組最低,而CytC基因的表達在TERT過表達組最低,TERT沉默表達組最高。同時TERT過表達組心肌細胞的凋亡率明顯低于TERT沉默表達組心肌細胞,而正常大鼠心肌細胞組心肌細胞的凋亡率介于兩者之間。結(jié)論:TERT能增強心肌細胞端粒酶活性,外源性TERT的轉(zhuǎn)染可促進心肌細胞TERT的表達,并增強端粒酶活性,抑制缺血再灌注誘導的心肌細胞凋亡,其機制可能與對p21及CytC基因表達的調(diào)控有關(guān)。
【圖文】：

圖 1 REAL-TIME PCR 檢測原心肌細胞 TERT、CytC、p21 基因的表達。I/R 組和 control 組比較*p<0.05。2.2 慢病毒的轉(zhuǎn)染通過 Western Blot 方法檢測轉(zhuǎn)染后心肌細胞 TERT、CytC、p21 蛋白表達的變化，，實驗結(jié)果如圖 2-5，TERT 和 P21 蛋白的表達在 A 組最高，而 D

CR 檢測原心肌細胞 TERT、CytC、p21 基因的表達。I/R 組和 c轉(zhuǎn)染stern Blot 方法檢測轉(zhuǎn)染后心肌細胞 TERT、驗結(jié)果如圖 2-5，TERT 和 P21 蛋白的表達在21 的表達明顯低于其余各組，差異有統(tǒng)計學達在 D 組最高，而在 A 組最低，差異均有統(tǒng)計E 三組之間 TERT、CytC、P21 的表達均無顯毒通過轉(zhuǎn)染可有效改變心肌細胞 TERT 的 表達的變化也同樣會影響 P21 及 CytC 的表
【學位授予單位】：桂林醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R654.2

【參考文獻】

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本文編號：2571203