目的對(duì)比野生型和p75 neurotrophin receptor(p75NTR)敲除小鼠股骨骨質(zhì)的改變,探討p75NTR敲除對(duì)小鼠股骨礦化發(fā)育的影響。方法取同窩p75NTR~(+/+)(野生型)和p75NTR~(-/-)(敲除型)雄性小鼠,出生后8周齡時(shí)行股骨Micro-CT掃描,檢測(cè)股骨松質(zhì)骨的骨量(BV)、骨體積分?jǐn)?shù)(BV/TV)、骨小梁數(shù)(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨表面積/骨量(BS/BV)、骨小梁分離度(Tb.Sp)和皮質(zhì)骨的骨量(Ct.BV)、骨皮質(zhì)厚度(Ct.Tb Th)、骨皮質(zhì)的骨表面積/骨量(Ct.BS/BV);出生后40 d分別取同窩兩種基因型雄性小鼠行鈣黃綠素?zé)晒怆p標(biāo)實(shí)驗(yàn),以檢測(cè)股骨的礦化沉積速率;提取4周齡大小鼠股骨總RNA及蛋白質(zhì),RT-PCR和Western blot檢測(cè)ALP、Runx2的表達(dá)。結(jié)果 Micro-CT結(jié)果顯示:p75NTR~(-/-)小鼠股骨的BV、BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Ct.BV、Ct.Tb Th明顯低于同窩p75NTR~(~(+/+))小鼠(P0.05),同時(shí),p75NTR~(-/-)小鼠的BS/BV、Tb.Sp、Ct.BS/BV明顯高于p75NTR~(+/+)小鼠(P0.01);鈣黃綠素?zé)晒怆p標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示:p75NTR~(-/-)小鼠股骨的礦化速率明顯低于同窩p75NTR~(+/+)小鼠(P0.01);RT-PCR及Western blot結(jié)果顯示:p75NTR~(~(-/-))小鼠的ALP、Runx2表達(dá)均明顯低于p75NTR~(~(+/+))小鼠(P0.01)。結(jié)論 p75NTR敲除對(duì)小鼠股骨的礦化發(fā)育有一定的抑制作用。
【圖文】：

TA-3'123下游5'-GGTGAAACTCTTGCCTCGTC-3'ALP上游5'-AACCCAGACACAAGCATTCC-3'146下游5'-CGAAGGGTCAGTCAGGTTGT-3'1．6股骨總蛋白的提取及Westernblot檢測(cè)ALP、Ｒunx2的表達(dá)分別提取4周齡大p75NTＲ－/－、p75NTＲ+/+雄性小鼠股骨總蛋白并定量，以20μg/孔上樣，采用Westernblot檢測(cè)ALP、Ｒunx2蛋白表達(dá)，GAPDH作為內(nèi)參。1．7統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS13．0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以xs，



本文編號(hào)：2567427