【摘要】：目的:通過有氧運(yùn)動訓(xùn)練膝骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)模型大鼠,觀察膝OA關(guān)節(jié)軟骨及軟骨細(xì)胞變化情況,測定關(guān)節(jié)軟骨中沉默信息調(diào)節(jié)因子2同原蛋白6(silent information regulator 2 homolog protein 6,SIRT6)和基質(zhì)金屬蛋白酶13(matrix meta-lloproteinase 13,MMP-13)的表達(dá)情況,探討有氧運(yùn)動對膝OA的療效和可能的機(jī)制,同時明確聯(lián)合的有氧運(yùn)動訓(xùn)練其療效是否更佳。方法:(1)對象:從西南醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心購買清潔級雄性SD大鼠50只,采用隨機(jī)數(shù)字表法均分為五組:正常對照組、模型組、跑臺組、游泳組、跑臺+游泳組。正常對照組單純籠內(nèi)飼養(yǎng),自由飲水飲食,不做任何處理;其余四組均以木瓜蛋白酶誘導(dǎo)左膝OA模型,4周后跑臺組、游泳組、跑臺+游泳的聯(lián)合訓(xùn)練組均予以有氧運(yùn)動訓(xùn)練干預(yù)。(2)干預(yù)措施:模型組籠內(nèi)飼養(yǎng),自由飲水飲食,不做任何干預(yù);跑臺組:跑步訓(xùn)練,20m/min,每次30分鐘,每天1次;游泳組:游泳訓(xùn)練,每次40min,每天1次;跑臺+游泳組:跑步訓(xùn)練結(jié)束休息1小時后進(jìn)行游泳訓(xùn)練。有氧運(yùn)動訓(xùn)練干預(yù)4周后處死全部大鼠,取左股骨內(nèi)側(cè)髁關(guān)節(jié)軟骨制作標(biāo)本,觀察軟骨及各指標(biāo)的變化情況。(3)觀察指標(biāo):(1)大鼠左膝關(guān)節(jié)的形態(tài)變化;(2)軟骨細(xì)胞的變化情況;(3)軟骨中SIRT6和MMP-13的表達(dá)情況。結(jié)果:(1)關(guān)節(jié)軟骨大體觀察:正常對照組:關(guān)節(jié)腔無積液,軟骨光滑、明亮,無裂紋;模型組:關(guān)節(jié)腔積液明顯,軟骨偏黃,表面粗糙,裂紋、裂隙、糜爛形成,局部軟骨全層缺損,暴露軟骨下骨;跑臺組:關(guān)節(jié)腔積液較少,軟骨稍黃,部分表面不平整,散在分布點狀充血,偶有裂紋;游泳組:關(guān)節(jié)腔偶有積液,軟骨稍黃,少部分不平整,點狀充血少見,未見明顯裂紋及糜爛;跑臺+游泳組:關(guān)節(jié)腔積液少見,軟骨稍淡黃,表面基本平整,未見明顯充血、裂紋及糜爛。將結(jié)果按彭太平法組織病理學(xué)分級后秩和檢驗,與模型組相比,各有氧運(yùn)動訓(xùn)練組均具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),且跑臺+游泳的聯(lián)合訓(xùn)練組改善最為明顯。(2)he染色后光鏡觀察:正常對照組:軟骨表面平整、光滑,軟骨豐富,軟骨細(xì)胞大小一致,排列規(guī)則,潮線完整;模型組:軟骨表面不平,軟骨細(xì)胞大量減少,排列紊亂,著色淺,“空泡”細(xì)胞簇聚,潮線混亂;跑臺組:部分軟骨表面不平整,偶有裂紋,軟骨層變薄,軟骨細(xì)胞減少,染色變淺,排列欠規(guī)則,可見紊亂的潮線;游泳組:軟骨表面較平整,裂紋少見,軟骨層輕度變薄,軟骨細(xì)胞減少,排列相對整齊,潮線基本完整;跑臺+游泳組:軟骨表面基本平整、光滑,軟骨層未見明顯變薄,軟骨細(xì)胞無明顯減少,大小較一致,排列較整齊,潮線基本完整。將光鏡結(jié)果按改良mankin’s評分,與模型組相比,各有氧運(yùn)動訓(xùn)練組均具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),且跑臺+游泳的聯(lián)合訓(xùn)練組改善最為明顯。(3)sirt6和mmp-13的表達(dá):正常對照組:sirt6免疫組化后,大量軟骨細(xì)胞核呈濃棕色著色,數(shù)量多,而mmp-13免疫組化后,只有極少量細(xì)胞著色;模型組:與正常對照組相反,sirt6組化后,少量軟骨細(xì)胞核淺棕色著色,而mmp-13組化后,大部分細(xì)胞棕色濃染,著色均勻;跑臺組:軟骨細(xì)胞較模型組明顯增多,sirt6組化后,被著色的細(xì)胞核也明顯增多,但較正常組仍偏少,呈棕色,mmp-13組化后,少部分細(xì)胞棕色染色,數(shù)量較正常對照組多;游泳組:軟骨細(xì)胞明顯增多,SIRT6與MMP-13表達(dá)情況與跑臺組相近。跑臺+游泳組:軟骨細(xì)胞數(shù)量進(jìn)一步增多,較正常對照組稍少,SIRT6與MMP-13表達(dá)情況與正常對照組相近,但SIRT6表達(dá)稍少,而MMP-13表達(dá)稍多。將各組所測得的SIRT6和MMP-13表達(dá)情況進(jìn)行比較,與模型組相比,各有氧運(yùn)動訓(xùn)練組結(jié)果均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),跑臺+游泳的聯(lián)合訓(xùn)練組與正常對照組最為接近,而跑臺組與游泳組差異不明顯。(4)SIRT6和MMP-13表達(dá)相關(guān)性分析:各組分別進(jìn)行SIRT6和MMP-13表達(dá)的直線相關(guān)性分析,結(jié)果各組均呈負(fù)相關(guān)(P0.05)。結(jié)論:(1)聯(lián)合有氧運(yùn)動訓(xùn)練對膝OA療效明顯優(yōu)于單一有氧運(yùn)動訓(xùn)練。(2)跑步運(yùn)動及游泳運(yùn)動對膝OA均具有明顯療效,但其療效可能無明顯差異。(3)有氧運(yùn)動治療膝OA的機(jī)制可能為明顯促進(jìn)SIRT6表達(dá),抑制MMP-13表達(dá)。
【圖文】：

自制大鼠跑臺

大鼠膝關(guān)節(jié)腔注射
【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R684.3

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本文編號：2561130