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重組人紅細胞生成素與β-七葉皂甙鈉治療大鼠脊髓損傷后其功能恢復及神經細胞凋亡情況的實驗研究

發(fā)布時間:2019-09-29 01:31
【摘要】:目的研究重組人紅細胞生成素與β-七葉皂甙鈉治療大鼠脊髓損傷后其功能恢復以及損傷段神經細胞凋亡的情況。方法選擇雌性成年SD大鼠共50只,依據其損傷與治療的情況分為五組:空白組、損傷組、rh EPO組與β-SE組、聯(lián)合治療組?瞻捉M采用等體積生理鹽水腹腔注射、損傷組為脊髓打擊損傷組,rh EPO組單純采取重組人紅細胞生成素,β-SE組單純采取β-七葉皂甙鈉治療,聯(lián)合治療組采取重組人紅細胞生成素與β-七葉皂甙鈉治療,評價各組不同時間的BBB評分,比較各組神經功能,NF-κB免疫組化檢測結果,組織Ca~(2+)、Mg2+含量,比較組織學HE染色結果,比較免疫組化結果以及神經細胞凋亡因子的檢測結果。結果(1)聯(lián)合治療組BBB運動功能評分均顯著高于rh-EPO組、β-SE組和損傷組,差異均存在顯著性差異(P0.01)。rh-EPO組、β-SE組恢復緩慢,各時間點評分值雖明顯高于損傷組,但是均落后于聯(lián)合治療組,差異有顯著性(P0.05)。(2)空白組動物的神經功能正常、運動正常。聯(lián)合治療組的神經功能優(yōu)于rh-EPO組、β-SE組,差異比較有統(tǒng)計學意義(P0.05)。rh-EPO組、β-SE組、聯(lián)合治療組的神經功能要比損傷組好。(3)聯(lián)合治療組傷后也顯示有大量的NF-κB表達,與空白對照比較存在明顯差異(P0.05),并且低于損傷組、Rh-EPO組、β-SE組,差異有顯著性(P0.05),rh EPO組、β-SE組表達量明顯低于損傷組,差異有顯著性,其中以8h、14h兩時間點尤為顯著(P0.01)。(4)大鼠脊髓損傷后空白對照組Ca~(2+)含量顯著高于損傷組、rh-EPO組、β-SE組及其聯(lián)合治療組,差異有顯著性(P0.05),聯(lián)合治療組的Ca~(2+)含量顯著高于rh-EPO組、β-SE組,差異有顯著性(P0.05)?瞻讓φ战MMg2+含量顯著低于損傷組、rh-EPO組、β-SE組及其聯(lián)合治療組,差異有顯著性(P0.05);聯(lián)合治療組的Mg2+含量顯著低于rh EPO組、β-SE組,差異有顯著性(P0.05)。(5)rh EPO組與β-SE組表現(xiàn)相似,但程度有所減輕,聯(lián)合治療組改善更明顯。鏡下可見脊髓組織灰白質界限較清楚,損傷區(qū)域面積較rh EPO組和β-SE組小,亦有出血壞死;出血水腫、炎癥反應較輕,膠質增生少,形成的空洞小,數(shù)量明顯少于rh EPO組和β-SE組,殘留的神經元數(shù)目較多,形態(tài)基本正常,核仁清晰,可見尼氏體,白質內神經纖維排列致密有序。(6)在rh-EPO組、β-SE組、聯(lián)合治療組中,bcl-2的表達可見有顯著升高,聯(lián)合治療組要高于rh-EPO組與β-SE組,組間比較差異有顯著性(P0.05)。另外,fas陽性凋亡細胞于損傷組中的表達較高,在脊髓灰、白質中有廣泛的分布,相應的在rh-EPO組、β-SE組、聯(lián)合治療組的表達則較低,差異有顯著性(P0.05)。聯(lián)合治療組bcl-2顯著高于rh-EPO組、β-SE組,聯(lián)合治療組bax、fas顯著低于rh EPO組、β-SE組,差異有顯著性(P0.05)。(7)損傷組、β-SE組、rh EPO組脊髓組織切片中均可見到深藍色至藍紫色凋亡細胞分布。損傷組中見大量凋亡細胞,β-SE組、rh EPO組組次多。聯(lián)合組未見凋亡細胞分布。(8)損傷組、β-SE組、rh EPO組中凋亡細胞率明顯高于聯(lián)合組,損傷組與β-SE組、rh EPO組、聯(lián)合組各組間比較,P值均0.05,差別有統(tǒng)計學意義;β-SE組與rh EPO組間比較,P㧐0.05,差別無統(tǒng)計學意義。結論重組人紅細胞生成素與β-七葉皂甙鈉聯(lián)合治療:(1)有助于改善BBB運動功能評分,促進大鼠運動功能恢復。(2)可以阻止局部Ca~(2+)集聚致超載引起SCI對神經細胞繼發(fā)性損傷,阻止Mg2濃度下降,有效改善局部Ca~(2+)超載以及能量代謝狀態(tài),延緩神經細胞繼發(fā)性損傷的發(fā)展。(3)能改善大鼠脊髓損傷組織的病理改變,減輕脊髓神經細胞凋亡,可以減輕繼發(fā)性脊髓損傷。
【學位授予單位】:錦州醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R651.2

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本文編號:2543593


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