【摘要】：背景與目的:異丙酚在多種器官中具有保護(hù)作用,包括肝臟。Sirt1是一種NAD+依賴的去乙�；�,具有抗炎和抗氧化作用,本研究的目的在于探討異丙酚的肝保護(hù)作用是否與Sirt1蛋白有關(guān)。方法:小鼠應(yīng)用異丙酚預(yù)處理后構(gòu)建肝臟缺血再灌注損傷模型,通過評(píng)估肝功能、氧化應(yīng)激水平、抗氧化能力、細(xì)胞因子表達(dá)量和細(xì)胞凋亡標(biāo)志蛋白探討異丙酚對(duì)肝臟缺血再灌注損傷的影響。并通過免疫組化和蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)評(píng)估Sirt1表達(dá)量,通過蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)評(píng)估NF-κb/p65、IκBα、Bcl-2和Bax的表達(dá)含量。結(jié)果:小鼠經(jīng)過肝臟70%缺血再灌注手術(shù)后,給予異丙酚預(yù)處理能夠減輕肝損傷、提升抗炎和抗氧化應(yīng)激能力,以及減少肝細(xì)胞凋亡水平。另外,本研究還表明異丙酚通過介導(dǎo)Sirt1蛋白過表達(dá)和抑制NF-κB蛋白表達(dá)減輕肝臟缺血再灌注損傷。結(jié)論:本研究是首次證實(shí)異丙酚預(yù)處理能夠通過調(diào)控Sirt1蛋白表達(dá),增加抗炎和抗氧化應(yīng)激能力,減輕肝臟缺血再灌注損傷。本研究表明異丙酚可能是減輕肝膽外科手術(shù)中肝缺血再灌注損傷的有效治療策略。
【圖文】：

第 3 章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果第 3 章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 肝臟缺血再灌注損傷模型構(gòu)建2%的戊巴比妥鈉按照 50mg/kg 的劑量腹腔注射麻醉小鼠，麻醉成功后，仰臥位固定小鼠的頭部和四肢，參考文獻(xiàn)以制備 70%肝臟缺血模型。取上腹正中切開進(jìn)腹，暴露肝臟，分離韌帶和系膜，顯露第一肝門。用無創(chuàng)血管夾鉗夾供應(yīng)肝中葉和左葉的血管分支，造成 70%的肝臟缺血，保持肝右葉和尾狀葉血液通暢，避免造成門脈系統(tǒng)的淤血，持續(xù) 45min 后松開血管夾恢復(fù)血流，用 0 號(hào)絲線縫合切口。

圖 3.2 異丙酚減輕肝臟缺血再灌注損傷：(A) 70%肝臟缺血再灌注 4 小時(shí)和 24 小時(shí)候，sham和實(shí)驗(yàn)組血清 AST 和 ALT 的表達(dá)水平；（B）70%肝臟缺血再灌注 4 小時(shí)后，sham 和實(shí)驗(yàn)組肝臟組織學(xué)H&E染色（×40, ×100）（；C）Suzuki評(píng)分。(X±S), *P<0.05與WT組比較, &P<0.05與 intralipid 組比較, ΔP<0.05 與 sham 組比較; #P<0.05 與 IR4h 組比較, n=6 只每組。3.3 異丙酚減輕肝臟缺血再灌注的氧化應(yīng)激、炎癥和細(xì)胞凋亡水平炎癥和氧化應(yīng)激是早期缺血再灌注損傷的主要機(jī)制，為了評(píng)估異丙酚預(yù)處理對(duì)肝臟炎癥和氧化應(yīng)激水平的影響，我們收集了缺血再灌注 4h 時(shí)點(diǎn)的血液和組織樣本，檢測(cè)抗氧化酶 SOD 的活性和膜脂質(zhì)過氧化指標(biāo) MDA 的水平。如圖 3.3所示，與 IR4h 組比較，IR4h+Pro0.1 組 MDA 含量明顯下降，而 SOD 活性明顯上升，，表明異丙酚預(yù)處理能夠減輕肝臟缺血再灌注的氧化應(yīng)激。另外，我們還應(yīng)用 ELISA 法評(píng)估了細(xì)胞因子 TNF-α 和 IL-6 水平，結(jié)果顯示與 IR4h 組比較，IR4h+Pro0.1 組 TNF-α 和 IL-6 的血清含量明顯降低，表明異丙
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R614

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 Gourab Datta;Barry J Fuller;Brian R Davidson;;Molecular mechanisms of liver ischemia reperfusion injury:Insights from transgenic knockout models[J];World Journal of Gastroenterology;2013年11期

2 Arunotai Siriussawakul;Ahmed Zaky;John D Lang;;Role of nitric oxide in hepatic ischemia-reperfusion injury[J];World Journal of Gastroenterology;2010年48期

本文編號(hào)：2539056