吻合血管冷凍保存同種異體骨關(guān)節(jié)移植免疫學(xué)研究
發(fā)布時(shí)間:2019-05-30 12:47
【摘要】:目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)SD大鼠吻合血管的經(jīng)冷凍保存同種異體膝關(guān)節(jié)、未經(jīng)冷凍的吻合血管的同種異體膝關(guān)節(jié)移植以及吻合血管同種異體膝關(guān)節(jié)移植短期應(yīng)用Cy A的手術(shù)前后血漿中T淋巴細(xì)胞CD25+細(xì)胞比例及CD4+/CD8+值變化的檢測(cè),以及移植前后血漿中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10含量的測(cè)定,觀察移植后排斥反應(yīng)情況,探討冷凍保存對(duì)吻合血管的同種異體骨關(guān)節(jié)移植的免疫反應(yīng)的影響。方法:分組情況:SD大鼠55只,其中15只作為膝關(guān)節(jié)供體,空白對(duì)照組10只,吻合血管的同種異體膝關(guān)節(jié)移植組10例,吻合血管的冷凍保存的同種異體膝關(guān)節(jié)移植組10例,吻合血管的同種異體膝關(guān)節(jié)移植術(shù)后應(yīng)用Cy A14天10例。參考Yaremchuk等[1]實(shí)驗(yàn)?zāi)P?將供體股動(dòng)、靜脈留取較長(zhǎng)段,然后在腹股溝韌帶處切斷股動(dòng)、靜脈,同時(shí)保留部分肌袖,鋸斷股骨及脛腓骨,移植時(shí)將此帶血管的膝關(guān)節(jié)移植于受體腹部皮下,血管與受體SD大鼠的股動(dòng)、靜脈端端吻合。冷凍組將切取的供體膝關(guān)節(jié)放入盛有15%DMSO冷凍保護(hù)劑的凍存管中,于4℃冰箱中放置1.5小時(shí),然后置于超低溫冰箱中,以1℃/min速度降溫至-60℃,維持1小時(shí),投入-196℃液氮中保存28天。移植術(shù)前自液氮中取出供體膝關(guān)節(jié),放入37℃水浴中復(fù)溫,肝素生理鹽水沖洗管腔,去除低溫保護(hù)劑。術(shù)后各組肌注青霉素4萬(wàn)U/kg.d,共用3 d;阿司匹林0.3 g,潘生丁25mg溶于250ml水中飲用,連續(xù)7 d。應(yīng)用環(huán)孢霉素A組將Cy A溶于99%二甲基間酰胺(DMF),使其濃度達(dá)10mg/ml肌注5mg/kg.d,術(shù)后當(dāng)天應(yīng)用,連續(xù)14天。術(shù)前及術(shù)后1周、2周、3周、4周、6周、8周、10周、12周抽取各組SD大鼠的外周血,采用流氏細(xì)胞儀法檢測(cè)血漿中T淋巴細(xì)胞CD25+細(xì)胞比例及CD4+/CD8+值變化。用ELISA法測(cè)定IL-2、IFN-γ,IL-4、IL-10。采用LSD-t檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)的組間比較。結(jié)果:非冷凍組術(shù)后CD25+,CD4+/CD8+,IL-2,IFN-γ,IL-4,IL-10增加明顯,與其他各組差異顯著,冷凍組和短期應(yīng)用Cy A組術(shù)后CD25+,CD4+/CD8+,IL-2,IFN-γ,IL-4,IL-10均有所增高,兩者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,與空白對(duì)照組數(shù)據(jù)相較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:深低溫冷凍對(duì)吻合血管同種異體骨關(guān)節(jié)移植與新鮮移植短期應(yīng)用Cy A對(duì)免疫原性降低程度基本相同,能夠降低同種異體骨關(guān)節(jié)移植的免疫原性,利于誘導(dǎo)免疫耐受,具有抑制細(xì)胞因子產(chǎn)生以及延遲免疫排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)間的作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R687.4
本文編號(hào):2488855
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R687.4
【參考文獻(xiàn)】
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1 吳俊偉,彭國(guó)光;同種異體骨移植重建下頜骨的臨床評(píng)價(jià)[J];廣東醫(yī)學(xué);2005年03期
2 周建生,胡汝麒,潘功平,劉振華,肖玉周,張先龍,陳曉東;冷凍保存帶血管異體骨移植治療兒童骨缺損[J];中華顯微外科雜志;1998年03期
3 解先寬;吻合血管的同種異體骨關(guān)節(jié)移植的免疫反應(yīng)[J];中國(guó)矯形外科雜志;2002年05期
,本文編號(hào):2488855
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