【摘要】：研究背景和目的臨床上,對于那些有巨大和多發(fā)肝臟占位病變的患者,擴(kuò)大肝切除是唯一有希望治愈的手段,但此時(shí)患者常合并肝硬化等疾病,手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)很高,術(shù)后容易引起爆發(fā)性肝功能衰竭,死亡率可達(dá)70%-90%。如何保護(hù)此類手術(shù)后肝臟的功能,使其度過術(shù)后48小時(shí)的風(fēng)險(xiǎn)期是肝臟外科的一個(gè)難題。目前的各種措施,包括人工肝和其他護(hù)肝方法效果均有限。因此,尋找合適而有效的措施幫助剩余的肝臟度過這段風(fēng)險(xiǎn)期尤為重要。最近,學(xué)術(shù)界越來越注意到,肝切手術(shù)后過度的炎癥反應(yīng)所引起的剩余肝損害顯著影響病人的預(yù)后,如何抑制這種炎癥反應(yīng)成為關(guān)鍵。前期動物實(shí)驗(yàn)表明,肝切除術(shù)后再生反應(yīng)即刻啟動,但這種再生在48小時(shí)內(nèi)不足以完全代償肝細(xì)胞功能,大鼠因此而死亡,到72小時(shí)肝臟再生達(dá)到一個(gè)高峰,此后大鼠多能存活。隨后我們應(yīng)用這種肝切模型發(fā)現(xiàn),在動物實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)用細(xì)胞因子信號傳遞阻制劑AG490和阿伐他汀可以明顯抑制90%肝切除大鼠術(shù)后的過度炎癥反應(yīng),減輕了眾多促炎因子的過度表達(dá)對全身組織包括剩余肝功能造成的損害；在烏司他丁用于臨床的實(shí)驗(yàn)中證實(shí)它通過降低生物脂質(zhì)膜的流動性,進(jìn)而干擾了作用物與受體的結(jié)合來對抗過度炎癥反應(yīng),同時(shí)烏司他丁也可通過抑止巨噬細(xì)胞釋放促炎細(xì)胞因子,從而減輕過度炎癥反應(yīng)對局部臟器和全身的損害。無論阿伐他汀還是烏司他丁,它們分別是治療高脂血癥和急性胰腺炎的藥物,但它們從動物實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)驗(yàn)的角度闡明了其對剩余肝臟功能的保護(hù)作用,但對其分子學(xué)的機(jī)理研究尚不深入,由此,我們擴(kuò)展思維,臨床上常見的保肝藥物中是否有更為直接和更有效的肝功能保護(hù)作用的藥物呢?于是我們注意到已更新?lián)Q代的異甘草酸鎂,希望能從研究中得到更為積極的結(jié)果。異甘草酸鎂是一種肝細(xì)胞保護(hù)劑,具有抗炎、保護(hù)肝細(xì)胞膜及改善肝功能的作用。藥效試驗(yàn)表明,異甘草酸鎂對D氨基半乳糖引起急性小鼠肝損傷模型具有良好的保護(hù)作用,能阻止動物血清轉(zhuǎn)氨酶升高,減輕肝細(xì)胞變性、壞死及炎癥細(xì)胞浸潤,可以降低NO含量而升高超氧化物歧化酶(SOD),從而明顯降低自由基對肝臟的損傷；對四氯化碳引起急性小鼠損傷具有治療效果,降低核轉(zhuǎn)錄因子(NF-kB)和細(xì)胞間粘附因子(ICM-1)含量來完成；同時(shí)其對大鼠慢性肝損傷均具有治療效果,改善CCl4引起慢性肝損傷大鼠的肝功能,降低NO水平,減輕肝組織炎癥活動度及纖維化程度；對Gal/FCA誘發(fā)小鼠免疫性肝損害也有保護(hù)作用,降低血清轉(zhuǎn)氨酶及血漿NO水平,減輕肝組織損害,提高小鼠存活率。以往的異甘草酸鎂的基礎(chǔ)臨床研究主要集中于慢性乙型肝炎、酒精性肝硬化、藥物引起的肝臟損傷等方面,與外科相關(guān)的基礎(chǔ)研究甚少。外科的研究主要涉及對缺血再灌注損傷和部分切除后肝臟再生的作用,而應(yīng)用于肝切除后對抗炎癥反應(yīng)的研究鮮見報(bào)道。為了明確異甘草酸鎂在圍手術(shù)期保護(hù)肝臟功能的作用及其機(jī)制,我們設(shè)計(jì)了本研究,采用了標(biāo)準(zhǔn)的大鼠90%肝切除模型,它是一種Emond方法的改良術(shù)式。前期實(shí)驗(yàn)表明,90%肝臟切除后的大鼠在24h內(nèi)死亡率為100%,采用這個(gè)極限肝葉切除模型的目的是要造成極度的肝功能損害,以此來誘發(fā)過度的炎癥反應(yīng)并檢驗(yàn)異甘草酸鎂的治療作用。本研究通過觀察外周血中各種生化指標(biāo)、炎癥因子的變化和肝臟再生能力來評價(jià)異甘草酸鎂的保肝作用,并且通過分子生物學(xué)方法來研究剩余肝臟組織內(nèi)相關(guān)炎癥信號傳導(dǎo)通路的變化,從分子生物學(xué)層面上闡明異甘草酸鎂保護(hù)肝臟功能、對抗過度炎癥反應(yīng)的機(jī)制。研究目的如何保護(hù)大范圍肝切除術(shù)后剩余肝臟的功能是外科界的一個(gè)難題,本研究旨在探討異甘草酸鎂在極限肝切除術(shù)后保護(hù)肝臟的作用及可能的機(jī)理。研究方法隨機(jī)將極限肝切除大鼠分為三組,對照組,低劑量組和高劑量組,各組分別于90%肝臟切除后的關(guān)腹前腹腔注射3ml生理鹽水,30mg/kg和60mg/kg異甘草酸鎂。術(shù)后觀察一般狀況、生存時(shí)間、肝功能指標(biāo)、肝臟再生情況、血清炎癥因子和剩余肝組織中P-JAK2蛋白、STAT3蛋白和mRNA的表達(dá)。研究結(jié)果高劑量組生存時(shí)間(21.2±4.6 h)大于對照組(9.1±2.1 h)和低劑量組(10.6±2.3 h)(P=0.023),且肝功能指標(biāo)有所改善(術(shù)后6h或12h時(shí),ALT、AST、 TBIL, DBIL降低,PT增高,均P0.05)。對照組和給藥組中剩余肝組織的形態(tài)、BrdU和PCNA的表達(dá)均無差異,藥物對肝再生無影響。與對照組相比,高劑量組中血清炎癥因子IL-1和IL-10明顯增加,IL-6降低顯著(均P0.05)。在術(shù)后6h、12h和18h時(shí),給藥組中STAT3蛋白和mRNA表達(dá)均比對照組明顯降低(均P0.05)。研究結(jié)論異甘草酸鎂有一定的保肝作用,特別是高劑量的異甘草酸鎂能延長大鼠極限肝切除術(shù)后的生存時(shí)間。生存時(shí)間的延長是通過抑制肝臟炎癥反應(yīng)而實(shí)現(xiàn),并不是通過促進(jìn)肝臟再生機(jī)制。這一作用與抑制信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中JAK2-STAT3通路有關(guān)。
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【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R657.3

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

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2 劉文淵;張玉君;徐土炳;林恒;別平;;離體肝切除聯(lián)合自體肝移植大鼠模型的建立[J];山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2011年09期

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本文編號：2475638