發(fā)布時(shí)間：2019-04-12 16:01

【摘要】：目的：本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)膜微粒(MPs, Microparticles)在體外與非體外循環(huán)下冠狀動(dòng)脈旁路移植(CPB-CABG, OPCABG)術(shù)前及術(shù)后的變化,包括對(duì)MPs的計(jì)數(shù)、其來源及蛋白質(zhì)組學(xué)分析,比較術(shù)后MPs的變化以及兩種不同的術(shù)式對(duì)MPs的影響。資料與方法：選擇2014年3月至2014年11月期間在我院心臟中心行CABG的患者20例(女性5例,男性15例),平均年齡為67±13歲,平均體重為65±12 kg。CABG的納入標(biāo)準(zhǔn)是左主干嚴(yán)重病變(狹窄50%)或者三支病變(三支血管狹窄75%)。根據(jù)手術(shù)方式不同隨機(jī)分為A組(OPCABG)、B組(CPB-CABG)每組均10例患者,根據(jù)抽血時(shí)間不同再分為A0(OPCABG前)、A1 (OPCABG后)、B0 (CPB-CABG前)、B1 (CPB-CABG后)。分別于術(shù)前空腹12h后、手術(shù)結(jié)束后抽取靜脈血液標(biāo)本,并及時(shí)處理標(biāo)本,利用流式細(xì)胞儀進(jìn)行MPs的總數(shù)及分類計(jì)數(shù),總數(shù)用Annexin-Ⅴ標(biāo)記,并分別用CD144、CD41a、CD45標(biāo)記內(nèi)皮細(xì)胞來源MPs(EMPs)、血小板MPs(PMPs)和白細(xì)胞來源MPs (LMPs),通過質(zhì)譜儀檢測(cè)MPs的蛋白組學(xué),并檢測(cè)患者圍于術(shù)期B-型鈉酸肽(BNP)、C-反應(yīng)蛋白(CRP)、肌紅蛋白的變化(MB)。采用SPSS18.0處理數(shù)據(jù),流式數(shù)據(jù)以(x±s)表示采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn),蛋白質(zhì)組學(xué)的數(shù)據(jù)采集及分析采用Thermofisher Proteome Discoverer 1.3和Mascot版本：2.3.0。結(jié)果：1.患者的基本臨床資料無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,兩組術(shù)前BNP、CRP、MB的對(duì)比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,術(shù)后BNP、CRP、MB均明顯升高,CPB-CABG對(duì)它們的升高更顯著。2.A1和Ao相比較,Annexin-Ⅴ(+)勺MPs數(shù)量明顯增多,CD144(+)和CD41a(+)明顯增多,CD45(+)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。B1和B0相比較,Annexin-Ⅴ(+)的MPs數(shù)量明顯增多,CD144(+)和CD41a(+)明顯增多,CD45(+)變化不大。說明CPB-CABG和OPCABG對(duì)MPs都有升高作用,其中以EMPs和PMPs升高為主,LMPs無明顯變化；B0和Ao相比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；B1和A1相比較,Annexin-Ⅴ(+)、CD144(+)增多更顯著,CD41a(+)、CD45(+)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。說明兩種手術(shù)方式相比較,CPB-CABG對(duì)MPs的升高更顯著,以EMPs和PMPs升高為主。3.用iTRAQ技術(shù)在uniprot-human庫(kù)中鑒定到的總蛋白為201個(gè)；在uniprot-human庫(kù)中A1和Ao相比較,共75個(gè)差異蛋白,上調(diào)的蛋白35個(gè),下調(diào)的蛋白40個(gè)；B1和B0相比較,共101個(gè)差異蛋白,上調(diào)的蛋白49個(gè),下調(diào)的蛋白52個(gè)。說明兩種手術(shù)方式對(duì)比相比較,CPB-CABG后差異蛋白的總數(shù)較多；兩種手術(shù)方式有其同的差異蛋白(48個(gè)),在手術(shù)后出現(xiàn)共同下調(diào)(11個(gè))、共同上調(diào)(14個(gè))也有相同的差異蛋白在不同的手術(shù)方式表達(dá)相反。經(jīng)CABG后,參與血小板活化過程的纖維蛋白原γ鏈(P02679)、血漿血管因子(P04275)表達(dá)均上調(diào),它們的比值分別為1.337和2.336；參與補(bǔ)體系統(tǒng)激活過程的補(bǔ)體因子Ⅰ(P05156)補(bǔ)體C5(P01031)表達(dá)均上調(diào),它們的比值分別為2.445和1.450；參與凝血過程的凝血因子Ⅻ(P00748)、凝血因子Ⅻ鏈(P00488)表達(dá)均上調(diào),它們的比值分別為1.220和1.745；參與炎癥趨化過程的血小板因子-4(P02776)、血小板堿性蛋白(P02775),它們的比值分別為1.479和1.274；參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程的脂聯(lián)素(Q15848)、載脂蛋白a(P08519)表達(dá)均上調(diào),它們的比值分別為1.235和1.473。因此,這些蛋白的變化提示MPs參與血小板活化的過程、補(bǔ)體系統(tǒng)激活的過程、凝血過程、炎癥的趨化過程和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的過程。結(jié)論：1.在CABG后血液中MPs的水平升高,無論從數(shù)量、來源及蛋白組學(xué)都有顯著變化,與BNP、CRP、MB的升高趨勢(shì)是一致的,且體外CABG的升高作用更顯著。2.CABG后,機(jī)體所產(chǎn)生的炎癥、凝血系統(tǒng)紊亂等病理過程可能導(dǎo)致MPs的水平升高,因此MPs的水平可反映外科手術(shù)對(duì)機(jī)體損傷的程度。3.MPs的計(jì)數(shù)、分類計(jì)數(shù)和蛋白組學(xué)分析結(jié)果提示：MPs水平的升高及成分改變參與了全身炎癥反應(yīng)及凝血機(jī)制紊亂的過程,是體外循環(huán)機(jī)和外科手術(shù)創(chuàng)傷對(duì)機(jī)體產(chǎn)生病理損傷的因素之一。這種病理意義具有很大的研究必要性。4.MPs既是CABG圍手術(shù)期機(jī)體損傷的結(jié)果,又是參與其病理過程的因素之一,MPs可能作為預(yù)測(cè)體外循環(huán)術(shù)后并發(fā)癥的一個(gè)生物標(biāo)志物。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R654.2

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本文編號(hào)：2457157