【摘要】：目的:探討兔同種異體ADSCs細胞膜片可以作為軟骨缺損修復的種子細胞;且在兔膝關節(jié)腔內微環(huán)境作用下可被誘導生長分化成透明軟骨組織。人自體脂肪間充質干細胞(Human adipose derived mesenchymal stem cells,hADSCs)復合玻璃酸鈉、富血小板血漿(platelet rich plasma,PRP)注射治療膝關節(jié)骨性關節(jié)炎(Osteoarthritis,OA)的安全性和有效性。方法:實驗一:(1)取新西蘭大白兔腹股溝脂肪組織,分離、培養(yǎng)脂肪間充質干細胞。制備成ADSCs膜片。(2)新西蘭大白兔膝關節(jié)股骨髁部軟骨損傷造模后行ADSCs膜片移植。(3)ADSC修復兔軟骨損傷大體照及組織學評價。實驗二:(1)取人腹部脂肪組織,分離獲取human ADSCs,經體外培養(yǎng)獲得足量的ADSCS,并以流式細胞儀檢測其表面標志物,分析成軟骨細胞分化能力。(2)選擇咸陽市第一人民醫(yī)院骨科中心門診30例膝關節(jié)輕中度骨性關節(jié)炎患者,關節(jié)腔內注射人ADSCs復合玻璃酸鈉、富血小板血漿(PRP),評價觀察干預前、后的患者是否有不良反應以及膝關節(jié)活動度的評分和疼痛視覺模擬評分法(VAS)評分,以及核磁共振下膝關節(jié)面影像變化。結果:ADSCs膜片移植在兔膝關節(jié)股骨髁部軟骨損傷的大體照呈透明狀,觸摸較硬,甲苯胺藍染色顯示有透明軟骨組織生成。人腹部脂肪組織分離出來的hADSCs均陽性表達CD105、CD29,陰性表達CD45、CD34,體外具有良好的成骨、成脂、成軟骨能力;臨床治療干預后患者無不良反應,膝疼痛減輕,關節(jié)活動度較前增大,核磁共振可見關節(jié)面較治療前斑片狀影較治療前顯著減少,低信號區(qū)顯著減少,T2值減低,未見明顯關節(jié)腔積液,關節(jié)面厚度增加。結論:ADSCs在兔關節(jié)內環(huán)境作用下可被誘導分化成透明軟骨組織。ADSCs可以作為軟骨缺損修復或者骨性關節(jié)炎修復的種子細胞。關節(jié)腔注射hADSCs復合玻璃酸鈉、富血小板血漿(PRP)治療骨性關節(jié)炎能有效改善患者膝關節(jié)活動度,減少疼痛,提高生活質量;通過核磁共振檢查發(fā)現關節(jié)面厚度增加,原軟骨損傷部位顯示修復影像。采用規(guī)范的關節(jié)穿刺注射技術安全可靠,臨床適用性強。此方法安全有效,可以延緩關節(jié)退化,提高患者生活質量。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of allogeneic ADSCs cell membrane as seed cell for repairing cartilage defect and to induce growth and differentiation into hyaline cartilage tissue under the action of rabbit knee joint cavity microenvironment. Safety and efficacy of injection of autologous adipose-derived mesenchymal stem cells (Human adipose derived mesenchymal stem cells,hADSCs) combined with sodium hyaluronate and platelet-rich plasma (platelet rich plasma,PRP) in the treatment of knee osteoarthritis (Osteoarthritis,OA). Methods: experiment 1: (1) adipose tissue of New Zealand white rabbits was isolated and cultured. ADSCs membrane was prepared. (2) New Zealand white rabbit knee joint femoral condylar cartilage injury model was transplanted with ADSCs membrane. (3) ADSC repair rabbit cartilage injury large body radiography and histological evaluation. Experiment 2: (1) Human abdominal adipose tissue was isolated from human abdominal adipose tissue, human ADSCs, was isolated and cultured in vitro to obtain a sufficient amount of ADSCS, and its surface markers were detected by flow cytometry. The differentiation ability of chondrocytes was analyzed. (2) 30 patients with mild to moderate osteoarthritis of knee joint were selected from the outpatient department of orthopedics center of first people's Hospital of Xianyang City. Human ADSCs combined with sodium hyaluronate was injected into articular cavity and platelet-rich plasma (PRP), was injected into the joint. To evaluate whether the patients before and after intervention had adverse reactions, knee motion score and pain visual analogue score (VAS), as well as the changes of knee joint surface image under magnetic resonance imaging (MRI). Results: ADSCs membrane transplantation in rabbit knee joint femoral condylar cartilage injury of the large body is transparent, hard touch, toluene blue staining showed hyaline cartilage tissue formation. The hADSCs positive expression CD105,CD29, negative expression CD45,CD34, in human abdominal adipose tissue had good osteogenic, lipogenic and chondrogenic ability in vitro. No adverse reaction was found in the patients after clinical intervention, the knee pain was relieved, and the motion of the joint was increased. MRI showed that the patchy shadow of the articular surface decreased significantly, the low signal area decreased significantly, and the T _ 2 value decreased significantly compared with the pre-treatment patchy shadow of the joint surface before the treatment. There was no obvious hydrops in the joint cavity, and the thickness of the articular surface increased. Conclusion: ADSCs can be induced to differentiate into hyaline cartilage tissue in rabbit articular environment. ADSCs can be used as seed cells for repair of cartilage defect or repair of osteoarthritis. Intra-articular injection of hADSCs combined with sodium hyaluronate and platelet-rich plasma (PRP) in the treatment of osteoarthritis can effectively improve the knee joint activity, reduce pain, and improve the quality of life. The thickness of articular surface was increased by magnetic resonance imaging (MRI), and the repair images of the original cartilage were displayed. The standard technique of joint puncture injection is safe and reliable, and its clinical applicability is strong. This method is safe and effective and can delay joint degeneration and improve the quality of life of patients.
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R684.3

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本文編號：2449519