【摘要】：目的: 臂叢神經(jīng)根性撕脫傷后脊髓神經(jīng)元大量死亡，神經(jīng)再生缺乏“原動(dòng)力”，嚴(yán)重影響術(shù)后肢體功能的恢復(fù)。促紅細(xì)胞生成素（EPO）是調(diào)節(jié)紅細(xì)胞生成的常用藥物，也對(duì)多種中樞及外周神經(jīng)系統(tǒng)損傷有治療作用。本研究旨在，利用全臂叢神經(jīng)撕脫傷模型，研究傷后即刻，皮下注射低劑量EPO對(duì)根性撕脫傷后神經(jīng)元的保護(hù)效果、副作用及其與JNK/c-Jun凋亡信號(hào)通路間的關(guān)系。 方法: 成年Wistar雄性大鼠180只，隨機(jī)等分為對(duì)照組（C組，根性撕脫+隔日皮下注射生理鹽水1mL）和促紅細(xì)胞生成素組（EPO組，根性撕脫傷+隔日皮下注射EPO1000U/kg）。兩組分別在術(shù)前（0天）、術(shù)后1、2、4、7和14天留取脊髓C5-T1段。H-E，尼氏體染色法觀察神經(jīng)元狀態(tài)；TUNEL和c-PARP檢測(cè)神經(jīng)元凋亡情況；免疫組化法，Western blot和Realtime PCR分別檢測(cè)p-JNK和c-Jun在脊髓神經(jīng)元內(nèi)的蛋白及mRNA表達(dá)變化。 結(jié)果: 1．存活神經(jīng)元計(jì)數(shù)：與損傷前相比，C組和EPO組損傷后1、2、4天神經(jīng)元數(shù)量均無(wú)明顯變化，7、14天數(shù)量急劇減少。兩組比較，EPO組存活神經(jīng)元數(shù)量在第7、14天明顯高于C組。 2．脊髓神經(jīng)元TUNEL情況： C組和EPO組傷后第2~14天可見(jiàn)凋亡細(xì)胞。兩組比較，EPO組TUNEL陽(yáng)性IOD值低于C組，在第4、7天差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3．脊髓神經(jīng)元c-PARP含量：其免疫組化的IOD值，與損傷前相比，傷后第2~14天升高明顯，C組第4天達(dá)峰值，EPO組第7天達(dá)峰值。兩組間比較，第2、4天，EPO組明顯低于C組。 4．兩組血常規(guī)組間比較：相同時(shí)間點(diǎn)，EPO組與C組的血紅蛋白量、紅細(xì)胞數(shù)、血細(xì)胞壓積，均無(wú)顯著性差異。 5．脊髓神經(jīng)元c-Jun蛋白及mRNA：組內(nèi)比較，撕脫后第2~7天升高明顯，第2天達(dá)到峰值。組間比較，EPO組第2~7天，c-Jun明顯低于C組。 6．脊髓神經(jīng)元p-JNK蛋白表達(dá)：組內(nèi)比較，撕脫后1~7天升高明顯，第2天達(dá)峰值。組間比較，EPO組第1~4天，p-JNK含量明顯低于C組。 7．梯度離心法能夠提高脊髓神經(jīng)元的提取數(shù)量和特異性，為后續(xù)的實(shí)驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。 結(jié)論: 1．改良全臂叢神經(jīng)根性撕脫傷動(dòng)物模型撕脫確切、副損傷小、符合實(shí)際致傷機(jī)制； 2．臂叢神經(jīng)根性撕脫傷可導(dǎo)致脊髓神經(jīng)元凋亡，EPO可減少神經(jīng)元凋亡、增加神經(jīng)元存活數(shù)量，發(fā)揮其保護(hù)神經(jīng)的作用； 3．臂叢神經(jīng)根性撕脫傷后可引起脊髓相應(yīng)節(jié)段神經(jīng)元p-JNK，c-Jun蛋白表達(dá)上調(diào)，，而應(yīng)用EPO則可抑制神經(jīng)元內(nèi)該蛋白的表達(dá)； 4．隔日皮下注射EPO1000U/kg幾乎不影響血常規(guī)結(jié)果。
[Abstract]:Purpose: There is a large number of death of the spinal cord after the brachial plexus nerve root avulsion and the lack of 鈥渕otive force鈥

本文編號(hào)：2426639