【摘要】：目的肝臟移植已成為目前治療各種終末期肝病的主要方式,由于供肝的嚴(yán)重短缺,世界各地的移植中心想盡各種辦法擴大供肝池,其中包括活體供肝移植(Living donor liver transplantation,LDLT)、劈離式肝移植(Split liver transplantation,SLT)、邊緣供肝(老年肝臟及心臟停跳后的肝臟)。LDLT膽管及血管并發(fā)癥機率比SLT較高,而SLT的優(yōu)點則是它排除了同LDLT相關(guān)的潛在的供體并發(fā)癥和死亡風(fēng)險。SLT分體外劈離和體內(nèi)劈離。國內(nèi)供肝多為心臟死亡器官捐獻(Donation after circulatory death,DCD),供肝在體外進行劈離,即在冷保存過程中劈離。SLT供肝體外劈離過程延長了供肝冷保存時間,加重了缺血再灌注損傷(Ischemia-reperfusion injury,IRI),研究表明供肝的冷缺血時間嚴(yán)重影響肝移植的預(yù)后,冷缺血時間過長與移植物原發(fā)無功能(Primary graft nonfunction,PNF)和術(shù)后膽道并發(fā)癥直接相關(guān)。常溫機械灌注(Normothermic machine perfusion,NMP)主要是通過連續(xù)提供氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)等模擬體內(nèi)生理環(huán)境,維持細(xì)胞的生理機能及代謝。本研究擬構(gòu)建簡單、穩(wěn)定、實用的NMP保存系統(tǒng),并探討NMP對豬SLT的保護作用。方法1.肝臟劈離過程中NMP保存裝置的建立與評價:利用蠕動泵、膜式氧合器、水浴箱、濾栓器、流量壓力傳感器等設(shè)備成功建立肝臟NMP裝置。通過對4只巴馬小型豬的肝臟在體外NMP保存過程中劈離,觀察保存劈離期間肝動脈、門靜脈的流量及壓力變化、保存的溫度、灌注液的血氣分析、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenase,LDH)、堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)指標(biāo)、膽汁量、肝組織的常規(guī)病理變化等,驗證在肝臟劈離過程中此NMP保存裝置的穩(wěn)定性及實用性;2.豬原位無轉(zhuǎn)流劈離式肝移植模型的建立:選用健康巴馬小型豬20只,在冷保存過程中進行劈離后,采用無轉(zhuǎn)流技術(shù)建立原位劈離式肝移植模型,觀察手術(shù)過程中的血流動力學(xué)指標(biāo)、術(shù)后5天ALT、AST、總膽紅素(Total bilirubin,TBIL)、直接膽紅素(Direct bilirubin,DBIL)等肝功能指標(biāo)及術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生情況,掌握劈離式肝移植手術(shù)技巧及驗證模型的穩(wěn)定性;3.NMP對豬劈離式肝移植的保護作用:選用健康巴馬小型豬24只,隨機分為兩組,A組在NMP保存過程中劈離,B組在UW液單純低溫保存過程中劈離,然后兩組均行原位無轉(zhuǎn)流劈離式肝移植術(shù),比較術(shù)后5d血清生化指標(biāo)、肝組織病理變化。結(jié)果1.成功建立了肝臟NMP裝置,對小型豬肝臟進行保存劈離過程中,門靜脈和肝動脈的壓力及流量控制、溫度控制均穩(wěn)定;保存劈離期間隨著劈離的進行,膽汁分泌量逐漸減少;保存劈離過程中隨著劈離的進行,ALT、LDH水平逐漸增高,而ALP保持在一個相對穩(wěn)定的水平,AST在灌注保存開始時的水平和基礎(chǔ)值接近,隨著劈離的進行,AST水平逐漸增高;肝組織常規(guī)病理提示常溫機械灌注保存劈離后肝臟細(xì)胞結(jié)構(gòu)及匯管區(qū)基本正常。2.經(jīng)過早期的技術(shù)訓(xùn)練后,豬肝移植術(shù)后5天存活率達50%,無手術(shù)相關(guān)并發(fā)癥,死亡5例,其中2例考慮腹腔內(nèi)出血,其余3例考慮腹腔滲出較多導(dǎo)致低血容量性休克。術(shù)中無肝期的平均動脈壓(Mean arterial pressure,MAP)明顯下降,心率(Heart rate,HR)明顯加快,再灌注后動脈血pH值、堿剩余(Base excess,BE)等指標(biāo)明顯降低;ALT、AST在術(shù)后5天基本穩(wěn)定在同一水平,TBIL,DBIL在術(shù)后逐漸升高,第2天達到高峰后逐漸下降。3.A組術(shù)中出血量明顯少于B組,兩組間比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);A組ALT、AST在術(shù)后3天以后明顯低于B組,LDH則在術(shù)后2天以后明顯低于B組,兩組間比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);肝臟常規(guī)病理提示,不管是保存劈離后還是再灌注后,A組肝組織細(xì)胞損傷程度明顯輕于B組。結(jié)論1、本研究中建立的肝臟NMP保存裝置,運行穩(wěn)定,對小型豬肝臟進行保存劈離過程中,無明顯肝組織損傷;2、本研究成功建立了穩(wěn)定的豬無轉(zhuǎn)流劈離式肝移植模型,經(jīng)過反復(fù)的技術(shù)訓(xùn)練后,提高了手術(shù)技巧,尤其在肝臟劈離斷面的止血方面。供肝占受體肝重的(40.50±4.83)%、占受體體重的(0.95±0.16)%時,會達到良好的手術(shù)效果;3、經(jīng)過豬劈離式肝移植模型證實,NMP對豬劈離式肝移植具有保護作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R657.3

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 ;Hyaluronic acid fragments evoke Kupffer cells via TLR4 signaling pathway[J];Science in China(Series C:Life Sciences);2009年02期

2 孫建軍;陳國勇;湯高楓;陳建斌;王謙;謝占濤;趙會博;季節(jié);;豬劈離式原位肝移植動物模型建立及麻醉處理[J];中國組織工程研究;2012年31期

3 陳新國;李威;吳風(fēng)東;鄒衛(wèi)龍;劉煜;王毅;臧運金;朱曉丹;關(guān)兆杰;范寧;岳揚;沈中陽;;劈離式肝移植的臨床應(yīng)用[J];中華肝臟外科手術(shù)學(xué)電子雜志;2014年03期

，

本文編號：2426349