【摘要】：目的對同時(shí)服用普伐他汀與依那普利后出現(xiàn)橫紋肌溶解癥的機(jī)制進(jìn)行初步探討。方法1.對一例同時(shí)服用普伐他汀與依那普利導(dǎo)致橫紋肌溶解癥的臨床病例進(jìn)行分析。2.建立同時(shí)測定普伐他汀、依那普利、依那普利拉的HPLC-MS/MS方法：30μL血漿樣品經(jīng)蛋白沉淀處理后取上清液,以甲醇-0.1%甲酸水溶液(75：25,V:V)為流動(dòng)相,流速為1 mL·min-1,經(jīng)Agilent HC-C18 (4.6×250 mm,5 μm)色譜柱進(jìn)行洗脫分離。采用Agelent 6460型三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀,電噴霧離子源(ESI源),多反應(yīng)監(jiān)測(MRM),正離子方式檢測。用于定量分析的離子反應(yīng)分別為m/z 447.0→326.8(普伐他汀鈉)、m/z 377.2→234.2(依那普利)、m/z 349.2→206.2(依那普利拉)和m/z 285.0→192.9(內(nèi)標(biāo),地西泮)。3.藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)：取18只Wistar雄性大鼠,隨機(jī)分為三組：普伐他汀(PV)組(普伐他汀鈉20mg·kg-1, i.g.)、依那普利(EN)組(馬來酸依那普利30 mg·kg-1, i.g.)、普伐他汀與依那普利聯(lián)用(PV+EN)組(普伐他汀鈉20mg·kg-1、馬來酸依那普利30mg·kg-1, i.g.)。單次給藥后,取不同時(shí)間大鼠血漿,通過HPLC-MS/MS測定普伐他汀、依那普利、依那普利拉的藥物濃度。使用DAS2.1.1軟件計(jì)算血漿中各藥物成分主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。4.組織分布實(shí)驗(yàn)：取24只Wistar雄性大鼠,隨機(jī)分為兩組：普伐他汀(PV)組(普伐他汀鈉20mg·kg-1, i.g., Qd)、普伐他汀與依那普利聯(lián)用(PV+EN)組：(普伐他汀鈉20 mg·kg-1、馬來酸依那普利30mg·kg-1, i.g., Qd)。分別在連續(xù)給藥的第7、14天末次給藥2h后,取大鼠的血漿、肝臟、腎臟與肌肉組織,測定血漿與各組織中普伐他汀的藥物濃度,計(jì)算普伐他汀在肝臟、腎臟、肌肉組織的攝取率(liver/kidney/muscle-to-blood concentration ratio, Kp)。5.免疫蛋白印跡實(shí)驗(yàn)：取36只Wistar雄性大鼠,隨機(jī)分為三組,空白(Control)組(生理鹽水3 mL, i.g., Qd)、普伐他汀(PV)組(普伐他汀鈉20mg·kg-1, i.g., Qd)、依那普利(EN)組(馬來酸依那普利30mg·kg-1,i.g.,Qd)。分別在連續(xù)給藥的第7、14天取大鼠肝臟組織,采用免疫蛋白印跡(Western Blotting)法測定大鼠肝臟中Oatp1a4、 Mrp2的蛋白表達(dá)量。結(jié)果1.普伐他汀與依那普利聯(lián)用可能是導(dǎo)致該患者發(fā)生橫紋肌溶解癥的原因。2.同時(shí)測定普伐他汀、依那普利、依那普利拉的HPLC-MS/MS方法可行。該方法測定普伐他汀的線性范圍為1.47～1500 ng·mL-1,定量限為1.47 ng·mL-1,日內(nèi)、日間精密度(RSD%)均小于8%,準(zhǔn)確度(RE%)在-2.37%-4.76%。測定依那普利的線性范圍11.72～12000 ng·mL-1,定量限為2.93 ng·mL-1,日內(nèi)、日間精密度(RSD%)均小于6%；準(zhǔn)確度(RE)在-1.62%-1.56%。測定依那普利拉的線性范圍11.72～12000 ng·mL-1,定量限為3.91 ng·mL-1,日內(nèi)、日間精密度(RSD%)均小于6%,準(zhǔn)確度(RE%)在-0.94%-4.71%。三種藥物穩(wěn)定性良好(RSD5%),提取回收率均90%,不受基質(zhì)效應(yīng)影響。3.藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)：普伐他汀在(PV+EN)組的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)與PV組相比有顯著性變化。其中：Cmax增加了15.28%、AUC0-36h增加了32.11%、AUC0-∞增加了32.40%、MRTo-36h增加了13.41%、MRT0-∞增加了13.59%(P0.05)；CL、V分別顯著性下降了24.89%、18.72%(P0.05)。相對于EN組,在(PV+EN)組依那普利的Tmax延后了21.52%(P0.05),其它藥動(dòng)學(xué)參數(shù)無明顯變化(P0.05)。依那普利拉在(PV+EN)組的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)與EN組相比無明顯變化(P0.05)。4.組織分布實(shí)驗(yàn)：(PV+EN)組與PV組相比,連續(xù)給藥7天,末次給藥2h后,血漿中普伐他汀的濃度增加了30.34%(P0.05),肝臟中普伐他汀的濃度降低了21.91%(P0.05),腎臟與肌肉組織中普伐他汀的濃度無明顯變化(P0.05)。普伐他汀在肝臟的攝取率降低了33.59%(P0.05),在腎臟、肌肉中的攝取率無明顯變化(P0.05)。連續(xù)給藥14天,末次給藥2h后,血漿中普伐他汀的濃度增加了25.50%(P0.05),肝臟中普伐他汀的濃度降低了35.82%(P0.05),腎臟中普伐他汀的濃度無明顯變化(P0.05),肌肉中普伐他汀的濃度升高了76.41%(P0.05)。普伐他汀在肝臟的攝取率降低了52.18%(P0.05),在腎臟、肌肉中的攝取率無明顯變化(P0.05)。5.免疫蛋白印跡實(shí)驗(yàn)：與空白組相比,連續(xù)給予普伐他汀7、14天后,肝細(xì)胞膜攝入型轉(zhuǎn)運(yùn)體Oatp1a4與外排型轉(zhuǎn)運(yùn)體Mrp2的表達(dá)均無明顯差異(P0.05)。與空白組相比,連續(xù)給予依那普利7、14天后,肝細(xì)胞膜外排型轉(zhuǎn)運(yùn)體Mrp2的表達(dá)無明顯差異(P0.05),而連續(xù)給予依那普利7天后,肝細(xì)胞膜攝入型轉(zhuǎn)運(yùn)體Oatp1a4的表達(dá)有降低的趨勢,但無顯著性差異(P0.05)；連續(xù)給予依那普利14天后,肝細(xì)胞膜攝入型轉(zhuǎn)運(yùn)體Oatp1a4的表達(dá)著性下降了34.10%(P0.05)。結(jié)論1.所建立的HPLC-MS/MS方法具有較高的靈敏度,且操作簡便、專屬性強(qiáng),能夠用于同時(shí)測定大鼠血漿中普伐他汀、依那普利、依那普利拉的血藥濃度。2.單次聯(lián)用普伐他汀與依那普利會(huì)在大鼠體內(nèi)產(chǎn)生藥動(dòng)學(xué)相互作用,導(dǎo)致普伐他汀的血藥濃度升高,清除率降低。3.多次服用依那普利,可使肝臟中Oatp1a4蛋白表達(dá)量的下降,從而降低普伐他汀在肝臟中的攝取能力,導(dǎo)致普伐他汀在血漿、肌肉中藥物濃度升高。這可能是普伐他汀與依那普利聯(lián)用導(dǎo)致橫紋肌溶解癥發(fā)生的原因之一。
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【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R685.5

【共引文獻(xiàn)】

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1 蘇菲;益氣涼血生肌方干預(yù)冠心病介入術(shù)遠(yuǎn)期預(yù)后的臨床與機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：2424700