【摘要】：[目的]探討L-型電壓依賴性鈣通道在NFAT1調節(jié)軟骨細胞基質代謝中的作用。[方法]Hulth法制作兔骨關節(jié)炎(KOA)模型。使用q RT-PCR法觀察對照組和KOA組兔軟骨細胞5種NFAT亞型的m RNA表達情況,然后使用L-型鈣通道阻斷劑硝苯地平,檢測軟骨細胞NFAT各亞型和基質代謝各標記物的改變,以及膜片鉗技術觀察KOA細胞膜電位的變化。[結果]與對照組相比,KOA組軟骨細胞5種NFAT的m RNA表達變化并不一致。KOA組軟骨細胞NFAT1明顯升高,是對照組的2.42倍(P0.01),NFAT2顯著降低,是對照組的0.34倍(P0.01),而NFAT3、NFAT4和NFAT5的m RNA表達沒有改變。與單純DMSO培養(yǎng)基對照組相比,10μmol/L硝苯地平對KOA軟骨細胞的活力沒有影響,但完全阻斷了KOA軟骨細胞Cav1的m RNA表達,增加了軟骨細胞內基質成分II型膠原(7.46倍,P0.01)、聚集蛋白聚糖(4.98倍,P0.05)和轉化生長因子-β的m RNA表達(4.37倍,P0.01),降低了分解酶基質金屬蛋白酶-1(0.17倍,P0.01),含血小板反應蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶-4(ADAMTS)(0.29倍,P0.01)和ADAMTS-5的表達(0.10倍,P0.01),與對照組的差異均具有統(tǒng)計學意義。同時,硝苯地平顯著降低了NFAT1的表達,是對照組的0.20倍(P0.05),但對NFAT2的m RNA表達沒有影響。此外,硝苯地平使KOA組細胞膜電位顯著增加(P0.01)。[結論]L-型鈣通道通過上調NFAT1.的m RNA表達參與調控KOA軟骨細胞基質代謝。
[Abstract]:[objective] to investigate the role of L-type voltage-dependent calcium channel in regulating matrix metabolism of chondrocytes by NFAT1. [methods] (KOA) model of rabbit osteoarthritis was made by Hulth method. The expression of m RNA in 5 NFAT subtypes of chondrocytes in control group and KOA group was observed by Q RT-PCR method. Then nifedipine, a calcium channel blocker, was used to detect the changes of NFAT subtypes and matrix metabolism markers in chondrocytes. The changes of membrane potential of KOA were observed by patch clamp technique. [results] the expression of m RNA in chondrocytes of KOA group was different from that of control group. The expression of m RNA in chondrocytes of KOA group was significantly higher than that in control group, 2.42 times of that in control group (P0.01), and NFAT2 was significantly decreased in KOA group. The expression of m RNA in NFAT3,NFAT4 and NFAT5 was not changed. Compared with the control group of DMSO medium alone, 10 渭 mol/L nifedipine had no effect on the activity of KOA chondrocytes, but completely blocked the expression of m RNA of Cav1 in KOA chondrocytes and increased II collagen (7.46 times), the matrix component of chondrocytes. P0.01), the expression of m RNA of aggregation proteoglycan (4.98 times, P0.05) and transforming growth factor- 尾 (4.37 times, P0.01) decreased the expression of matrix metalloproteinase-1 (0.17 times, P0.01). The expression of depolymerized protein-like metalloproteinase-4 (ADAMTS) (0.29 times, P0.01) and the expression of ADAMTS-5 (0.10 times, P0.01) were significantly different from those of the control group. At the same time, nifedipine significantly decreased the expression of NFAT1, which was 0.20 times of the control group (P0.05), but had no effect on the expression of m RNA of NFAT2. In addition, nifedipine significantly increased the cell membrane potential in KOA group (P0.01). [conclusion] L-type calcium channels up-regulate NFAT1. The expression of m RNA was involved in regulating the matrix metabolism of KOA chondrocytes.
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學;河北醫(yī)科大學第三醫(yī)院關節(jié)外科;
【基金】：河北省科技計劃項目(16277785D) 河北省高等學校科學技術研究項目(ZD20131059) 國家級大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目(2016100890014)
【分類號】：R684.3

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