【摘要】：目的探討microR NA-203(miR-203)對骨肉瘤細胞增殖和遷移的影響及機制。方法通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)測定miR-203在正常成骨細胞hF OB及骨肉瘤細胞系中的表達,將MG-63細胞系分成miR-203組、Scramble組、RAB22A組、NC組,Lipofectamine 2000分別轉(zhuǎn)染miR-203 mimics、Scrambles、pcD NA3.1-RAB22A、空白對照質(zhì)粒;通過噻唑藍(MTT)實驗測定增殖能力,細胞劃痕實驗測定遷移能力;通過Target Scan和雙熒光素酶實驗預(yù)測及驗證miR-203與RAB22A基因的靶向調(diào)節(jié)關(guān)系;RT-PCR測定RAB22A mR NA表達水平;Western blot測定E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表達水平。結(jié)果 miR-203在骨肉瘤細胞系SAOS-2、SOSP-9607、U2OS及MG-63中較hF OB細胞系表達降低。MTT顯示,在培養(yǎng)48和72 h后,miR-203組相對細胞數(shù)少于Scramble組(P0.05);培養(yǎng)24 h后,Scramble組細胞相對劃痕面積小于miR-203組(P0.05);雙熒光素酶實驗示,miR-203與RAB22A基因存在靶向調(diào)節(jié)關(guān)系。RAB22A組相對劃痕面積小于NC組(P0.05);MTT顯示,在培養(yǎng)24、48和72 h后,RAB22A組相對細胞數(shù)多于NC組(P0.05);RAB22A組與NC組比較,E-cadherin下調(diào)表達,N-cadherin上調(diào)表達,Vimentin上調(diào)表達。結(jié)論 miR-203通過下調(diào)RAB22A基因表達,抑制上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化,進而抑制骨肉瘤細胞增殖與遷移。
[Abstract]:Objective to investigate the effect and mechanism of microR NA-203 (miR-203) on proliferation and migration of osteosarcoma cells. Methods the expression of miR-203 in normal osteoblast hFOB and osteosarcoma cell line was determined by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). MG-63 cell line was divided into miR-203 group, scramble group, RAB22A group and NC group, respectively transfected with miR-203 mimicsScramblespcNA3.1-RAB22A, blank control plasmid. The proliferation ability was measured by MTT assay and the migration ability was measured by cell scratch assay. The target regulatory relationship between miR-203 and RAB22A gene was predicted and verified by Target scan and double luciferase assay. RT-PCR was used to detect the expression level of RAB22A mRNA. Western blot was used to detect the expression of E-cadherin N-cadherinnin Vimentin protein. Results the expression of miR-203 in osteosarcoma cell line SAOS-2OS-9607 U2OS and MG-63 was lower than that in HF-OB cell line. After 48 and 72 hours of culture, the number of relative cells in miR-203 group was less than that in scramble group (P0.05), the relative scratch area in scramble group was smaller than that in miR-203 group after 24 hours culture (P0.05), and the relative scratch area in RAB22A group was lower than that in NC group (P0.05). The number of relative cells in RAB22A group was higher than that in NC group (P0.05). The down-regulated expression of N-cadherin and Vimentin upregulation in RAB22A group were higher than those in NC group. Conclusion miR-203 inhibits the proliferation and migration of osteosarcoma cells by down-regulating RAB22A gene expression and inhibiting epithelial mesenchymal transformation.
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬武漢中心醫(yī)院急診創(chuàng)傷外科;
【分類號】：R738.1

【參考文獻】

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2 梁佳;董稚明;李宏;韓立杰;郭艷麗;沈素朋;郭煒;;MicroRNA-203在人食管鱗癌組織和細胞中的表達及其基因的甲基化狀態(tài)[J];中國腫瘤生物治療雜志;2014年04期

3 徐磊;蔣峰;楊欣;笪良山;錢亦淳;王潔;尹榮;許林;;miR-203下調(diào)Bmi-1基因?qū)Ψ蜗侔┘毎忠u轉(zhuǎn)移的影響[J];臨床腫瘤學(xué)雜志;2014年04期

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6 蔡華榮;江躍全;;Notch1和Bmi-1蛋白在肺癌組織中的表達及意義[J];中國組織工程研究;2016年05期

7 梁佳;董稚明;郭艷麗;韓立杰;沈素朋;郭煒;;微RNA-203b基因在食管鱗癌中的表達及其甲基化狀態(tài)分析[J];腫瘤;2014年09期

8 馬婉玲;徐俊卿;葛雅麗;韓月東;印弘;魏光全;劉瑩;常英娟;趙海濤;宦怡;;骨肉瘤的MRI及DWI表現(xiàn)[J];實用放射學(xué)雜志;2008年04期

【二級參考文獻】

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3 賀菊香;吳建芳;趙久達;耿排力;;胃癌組織中Snai2 mRNA的表達及意義[J];臨床與實驗病理學(xué)雜志;2009年06期

4 賀菊香;趙久達;耿排力;;SNAI2蛋白在胃癌組織中的差異表達及意義[J];中國誤診學(xué)雜志;2009年01期

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10 郭喬楠,陳意生;骨肉瘤細胞增殖活性的測定及其與預(yù)后的關(guān)系[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2000年12期

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4 李進;楊述華;鄒利軍;邵增務(wù);廖翔;;單啟動子雙表達載體pIRES-p14ARF-p53的構(gòu)建及其對骨肉瘤細胞增殖的抑制作用[A];第八屆全國脊柱脊髓損傷學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2007年

5 胡宏偉;孫其志;;骨肉瘤的治療進展[A];第十七屆中國康協(xié)肢殘康復(fù)學(xué)術(shù)年會暨第三屆海峽兩岸OS會議論文匯編[C];2008年

6 于秀淳;王偉;;影響骨肉瘤新輔助化療療效的多因素分析[A];第四屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會議教育集[C];2006年

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8 張瑤;;四肢長骨骨肉瘤合并病理性骨折圍手術(shù)期的護理[A];全國第八屆骨科護理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會議論文匯編[C];2006年

9 張志明;;外傷誘發(fā)骨肉瘤一例分析[A];第四次全國法醫(yī)學(xué)術(shù)交流會論文集（上卷）[C];1991年

10 楊迪生;解先寬;葉招明;陶惠民;;反義C-myc重組腺病毒的構(gòu)建及其抗骨肉瘤細胞作用的實驗研究[A];2004年浙江省骨科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

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9 朱U，

本文編號：2121285