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巨噬細(xì)胞移動抑制因子治療糖皮質(zhì)激素性股骨頭壞死的細(xì)胞學(xué)研究

發(fā)布時間:2018-07-12 15:49

  本文選題:股骨頭壞死 + 糖皮質(zhì)激素 ; 參考:《西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2017年02期


【摘要】:目的探討巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)對糖皮質(zhì)激素(Glc)誘導(dǎo)的股骨頭內(nèi)微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)損傷的治療作用。方法從人股骨頭標(biāo)本分離、培養(yǎng)以及鑒定HUVECs,構(gòu)建Glc誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型,分為空白對照組、低劑量MIF組、高劑量MIF組,予以對應(yīng)干預(yù)。AlamarBlue檢測評估細(xì)胞活性,Live/Dead細(xì)胞染色檢測活細(xì)胞數(shù)目,細(xì)胞骨架染色觀察各組細(xì)胞形態(tài),劃痕實驗對比各組細(xì)胞的遷徙能力,ELISA方法檢測細(xì)胞分泌VEGF的水平。結(jié)果細(xì)胞模型構(gòu)建成功。高劑量MIF組細(xì)胞活性百分比為(178.3±15.2)%,顯著高于空白對照組(100±8.4)%及低劑量MIF組(149.1±13.8)%(P0.05)。高劑量MIF組相對活細(xì)胞數(shù)量(139.5±14.3)%高于低劑量MIF組(121.3±12.9)%,兩組均高于空白對照組(100±8.4)%(P0.05)?瞻讓φ战M細(xì)胞骨架形態(tài)異常,MIF干預(yù)組細(xì)胞骨架形態(tài)正常。劃痕實驗結(jié)果提示,高劑量MIF組細(xì)胞遷移能力最強,劃線后24h劃痕消失。干預(yù)24h空白對照組VEGF表達(dá)量為(170±15.7)pg/mL,低劑量MIF組VEGF表達(dá)量為(328±25.3)pg/mL,高劑量MIF組VEGF表達(dá)量為(405±31.2)pg/mL。低劑量組的VEGF表達(dá)水平低于高劑量組(P0.05),但高于空白對照組(P0.01)。結(jié)論 MIF具有促進(jìn)HUVECs增殖、遷徙作用,具有劑量依賴關(guān)系,同時可以上調(diào)VEGF的表達(dá),可以改善Glc誘導(dǎo)的受損內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)和功能。
[Abstract]:Objective to investigate the therapeutic effect of macrophage migration inhibitor (MIF) on glucocorticoid (Glc) -induced injury of vascular endothelial cells (HUVECs) in femoral head. Methods HUVECs were isolated, cultured and identified from human femoral head specimens. The model of endothelial cell injury induced by Glc was established and divided into three groups: blank control group, low dose MIF group and high dose MIF group. The number of living cells was detected by living / Dead cell staining, the morphology of each group was observed by cytoskeleton staining, the migration ability of each group was compared by scratch test and the level of VEGF secreted by cells was detected by Elisa. Results the cell model was successfully constructed. The percentage of cell activity in the high dose MIF group was (178.3 鹵15.2), significantly higher than that in the blank control group (100 鹵8.4)% and the low dose MIF group (149.1 鹵13.8)% (P0.05). The number of relative living cells in the high dose MIF group (139.5 鹵14.3)% was higher than that in the low dose MIF group (121.3 鹵12.9), and both groups were higher than the blank control group (100 鹵8.4)% (P0.05). The morphology of cytoskeleton was normal in MIF intervention group. The results of scratch test showed that the migration ability of high dose MIF group was the strongest, and the scratch disappeared 24 hours after marking. The expression of VEGF was (170 鹵15.7) PG / mL in control group, (328 鹵25.3) PG / mL in low dose MIF group, and (405 鹵31.2) PG / mL in high dose MIF group. The expression of VEGF in low dose group was lower than that in high dose group (P0.05), but higher than that in blank control group (P0.01). Conclusion MIF can promote the proliferation and migration of HUVECs in a dose-dependent manner. MIF can up-regulate the expression of VEGF and improve the morphology and function of injured endothelial cells induced by Glc.
【作者單位】: 西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院骨一科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81301562)~~
【分類號】:R681.8

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本文編號:2117660

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