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脊髓損傷大鼠中觸液神經(jīng)元ERK5的表達情況分析

發(fā)布時間:2018-06-28 18:17

  本文選題:脊髓損傷 + 觸液神經(jīng)元�。� 參考:《貴州醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:目的:觀察大鼠脊髓損傷后觸液神經(jīng)元(CSF-CNs)上ERK5表達水平的變化,探討其與觸液神經(jīng)元的關(guān)系以及是否在脊髓損傷修復(fù)過程中發(fā)揮作用,通過利用信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路為脊髓損傷的治療提供新的實驗基礎(chǔ)和研究思路。方法:取成年健康SD雌性大鼠60只隨機分為三組:實驗組(脊髓損傷造模),假手術(shù)組(打開椎板,不作脊髓損傷造模)和對照組(不作處理)。采用改良Allen’s打擊法建立大鼠胸10脊髓損傷模型,按照《大鼠腦立體坐標圖譜》在處死大鼠前48h利用腦立體定位儀定位后,向單側(cè)側(cè)腦室注射霍亂毒素亞單位B結(jié)合辣根過氧化物酶(CB-HRP)3μl,分別在造模后1d、3d、7d、14d、28d時間點對實驗大鼠進行BBB評分,評價后肢運動功能情況,各組于相同時間點取胸10上下1cm脊髓組織節(jié)段制作石蠟切片,利用免疫熒光技術(shù)檢測觸液神經(jīng)元和磷酸化ERK5的表達情況,并以圖像分析軟件分析不同時間點兩者的表達變化,得出數(shù)據(jù)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行分析。結(jié)果:1、BBB評分:實驗組大鼠脊髓損傷造模后,后肢出現(xiàn)嚴重的運動功能障礙,雙下肢癱瘓無自主活動,BBB評分為0分,以前3d最為嚴重,BBB評分約為0-2分,隨著時間的延長,7-14d恢復(fù)較明顯,后肢運動能力不同程度的恢復(fù),28d左右趨于穩(wěn)定,BBB評分約為16-20分。假手術(shù)組在前3d左右評分稍低于正常,約為19分,考慮因為背部創(chuàng)傷引起的疼痛導(dǎo)致老鼠活動受限,而對照組在前后的行為學(xué)評分中無明顯變化,并且明顯高于實驗組的評分,假手術(shù)組、對照組在各時間點分別與實驗組比較,BBB評分差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);2、在脊髓組織中,實驗組的觸液神經(jīng)元和磷酸化ERK5的陽性細胞表達水平在脊髓損傷后1d開始增高,隨著時間的延長,7d左右上升到最大值,然后慢慢開始下降。假手術(shù)組和對照組的結(jié)果類似,陽性細胞表達水平較低,隨著時間的推移,觸液神經(jīng)元和活化的ERK5陽性細胞表達處于比較穩(wěn)定的狀態(tài),實驗組各個時間點陽性細胞的表達與對照組和假手術(shù)組比較,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而假手術(shù)組和對照組相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);假手術(shù)組和對照組中,CSF-CNs和磷酸化ERK5(p-ERK5)的共表達很少,各個時間點無明顯差異。在實驗組中,脊髓損傷后3d,CSF-CNs和p-ERK5雙標陽性細胞開始增多,7d左右兩者的共表達繼續(xù)增加,14d左右CSF-CNs和p-ERK5的共表達達到最大值,在28d的時候共表達的陽性細胞有一定降低,在傷后3d、7d、14d、28d時間點上CSF-CNs和p-ERK5雙標陽性細胞和對照組及假手術(shù)組比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),損傷后1d點的共表達與對照組及假手術(shù)組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:側(cè)腦室注射CB-HRP可以很好的標記CSF-CNs,且位置比較固定;大鼠脊髓損傷后CSF-CNs、p-ERK5和CSF-CNs/p-ERK5隨著時間的變化表達明顯增多,呈一個先上升再下降的趨勢,表明急性脊髓損傷之后可能激活CSF-CNs上的ERK5信號通路,參與到后續(xù)神經(jīng)元的分化和保護中,但是具體機制還有待進一步研究和探索。
[Abstract]:Objective : To observe the changes of ER5 expression level in cerebrospinal fluid ( CSF ) in rats after spinal cord injury in rats , and to explore the relationship between different time points and to provide a new experimental basis and research thought for the treatment of spinal cord injury . The results showed that the rats were divided into three groups : experimental group ( spinal cord injury model ) , sham operation group ( open vertebral plate , no spinal cord injury model ) and control group ( not treated ) . Compared with control group and sham operation group , there was no significant difference in the co - expression between the two groups ( P0.05 ) .
【學(xué)位授予單位】:貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R651.2

【參考文獻】

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本文編號:2078907

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