本文選題：瘢痕 + 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1�。� 參考：《浙江大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：目的研究可溶性TGF-β受體Ⅱ(sTβRⅡ, TGF-β受體Ⅱ胞外區(qū))及突變型Smad4(Smad4△M4,野生型Smad4去除連接部位氨基酸序列)阻斷TGF-β/Smads通路雙位點(diǎn)較阻斷單一位點(diǎn)在抑制瘢痕相關(guān)蛋白生成方面的優(yōu)越性。 方法構(gòu)建分別含sTβRⅡ和Smad4AM4序列的兩種慢病毒,并以不同感染復(fù)數(shù)(MOI)轉(zhuǎn)染人皮膚成纖維細(xì)胞(HFF-1),篩選最適MOI值。將培養(yǎng)的HFF-1分為6組：共轉(zhuǎn)染組、sTβRⅡ組、Smad4AM4組、陰性病毒對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組及空白對(duì)照組。共轉(zhuǎn)染組為兩種病毒1：1比例共轉(zhuǎn)染HFF-1; sTβRⅡ組及Smad4AM4組分別為單一病毒轉(zhuǎn)染HFF-1；陰性病毒對(duì)照組為空載體病毒轉(zhuǎn)染HFF-1,均采用TGF-β1刺激轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞。陽(yáng)性對(duì)照組為單用TGF-β1刺激HFF-1；空白對(duì)照組為未作任何處理的HFF-1。采用Western Blot/qPCR法檢測(cè)各組纖連蛋白的相對(duì)表達(dá)量；ELISA法、Sircol膠原定量試劑盒分別檢測(cè)各組結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)及總膠原蛋白表達(dá)量。采用SNK-q檢驗(yàn)對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。 結(jié)果兩種慢病毒轉(zhuǎn)染HFF-1最適MOI均為50。相對(duì)于空白對(duì)照組,陽(yáng)性對(duì)照組及陰性病毒對(duì)照組纖連蛋白、CTGF及膠原蛋白的表達(dá)量最高(P0.05),但兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P0.05)；sTβRII組及Smad4△M4組表達(dá)量均低于陽(yáng)性對(duì)照組及陰性病毒對(duì)照組(P0.05)；共轉(zhuǎn)染組表達(dá)量更低(P0.05)。 結(jié)論sTβRII、Smad4AM4均可顯著抑制TGF-β1對(duì)HFF-1的刺激作用,且共轉(zhuǎn)染比單基因轉(zhuǎn)染的抑制作用更強(qiáng),從而為臨床抗瘢痕的基因治療提供新思路。
[Abstract]:Objective to study the effects of soluble TGF- 尾 receptor 鈪，

本文編號(hào)：1841389