本文選題：兔 + 軟骨損傷　； 參考：《河北醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：目的:由于關(guān)節(jié)軟骨自身無血管淋巴管及神經(jīng)分布,損傷后很難自身修復(fù)。如何處理膝關(guān)節(jié)軟骨全層損傷是骨科領(lǐng)域的一大難題。目前臨床有多種關(guān)節(jié)軟骨修復(fù)的手術(shù)方法:組織移植術(shù)和細(xì)胞移植術(shù)等新興技術(shù),僅在試驗(yàn)階段,因其操作復(fù)雜,價(jià)格昂貴,目前還難以在臨床廣泛開展;微骨折技術(shù)(microfracture,MF)通過刺激未分化的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為軟骨細(xì)胞,最終修復(fù)軟骨缺損;富血小板血漿(platelet rich plasma,PRP)通過濃集的生長因子促進(jìn)細(xì)胞活化、增殖等參與損傷組織的愈合。由于后兩者可以提供類似組織工程的種子細(xì)胞及生長因子,而且操作簡單,因此微骨折技術(shù)結(jié)合富血小板血漿治療軟骨損傷是很有前景的研究方向,但目前關(guān)于其研究的報(bào)道甚少。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察不同時(shí)間、微骨折技術(shù)、自體富血小板血漿以及應(yīng)用微骨折技術(shù)聯(lián)合富血小板血漿對膝關(guān)節(jié)軟骨全層缺損進(jìn)行修復(fù)的組織學(xué)變化,以探討采用微骨折技術(shù)聯(lián)合富血小板血漿治療關(guān)節(jié)軟骨缺損的療效,從而為臨床工作提供實(shí)驗(yàn)理論依據(jù)及指導(dǎo)意見。方法:1實(shí)驗(yàn)分組及模型制備:新西蘭大白兔48只,進(jìn)行隨機(jī)分組,為A、B、C、D四組每組各12只。于兔右膝股骨內(nèi)側(cè)髁負(fù)重區(qū)建立全層軟骨缺損的模型。A組:軟骨缺損區(qū)不予處理;B組:關(guān)節(jié)內(nèi)注射自體富血小板血漿;C組:軟骨缺損區(qū)行微骨折術(shù);D組:軟骨缺損區(qū)行微骨折術(shù)并在膝關(guān)節(jié)內(nèi)注射自體富血小板血漿。2采血:B與D組均于兔耳緣靜脈取7-9ml靜脈血,其中5ml注入肝素鋰抗凝的真空采血管中,2 ml注入EDTA-K2抗凝真空采血管中,已備用。3自體PRP的制備:當(dāng)中5ml靜脈血進(jìn)行二次離心,即第一次離心以2000r/min,離心10min,第二次離心轉(zhuǎn)速時(shí)間均同上,制備PRP約0.5ml,術(shù)中注射關(guān)節(jié)腔內(nèi)。4血小板計(jì)數(shù):將EDTA-K2抗凝真空采血管中2ml靜脈血放入血細(xì)胞分析儀中進(jìn)行血小板計(jì)數(shù),然后同樣二次離心制備PRP,再將PRP進(jìn)行血小板計(jì)數(shù),驗(yàn)證制備出的PRP是否符合實(shí)驗(yàn)要求。5觀察指標(biāo):術(shù)后8、12周每組隨機(jī)處死6只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,其中隨機(jī)5只切開暴露右膝,對其進(jìn)行大體觀察并對其進(jìn)行大體評價(jià),隨后對損傷修復(fù)部位標(biāo)本進(jìn)行取材制成組織切片并行HE和甲苯胺藍(lán)染色,另一組織標(biāo)本行電鏡(scanning electron microscope,SEM)制片。組織學(xué)制片完成后分別對標(biāo)本行光鏡和電鏡觀察各組并對其進(jìn)行相應(yīng)組織學(xué)評價(jià)。結(jié)果:1大體觀察:術(shù)后8周:A組:缺損區(qū)修復(fù)組織未能平整修復(fù)軟骨缺損,缺損區(qū)與周邊正常軟骨邊界清晰;B組:缺損區(qū)修復(fù)組織修復(fù)軟骨缺損較平整,缺損區(qū)與周邊正常軟骨邊界較模糊;C組:缺損區(qū)修復(fù)組織修復(fù)軟骨缺損較平整,缺損區(qū)與周邊正常軟骨邊界較模糊;D組:缺損區(qū)修復(fù)組織修復(fù)軟骨缺損較平整,缺損區(qū)與周邊正常軟骨邊界模糊。術(shù)后12周:A組:缺損區(qū)修復(fù)組織未能平整修復(fù)軟骨缺損,缺損區(qū)仍可見明顯凹凸不平;B組:缺損區(qū)修復(fù)組織未能平整的修復(fù)軟骨缺損,修復(fù)區(qū)與周邊正常軟骨邊界清晰;C組:缺損區(qū)修復(fù)組織修復(fù)軟骨缺損較平整,修復(fù)區(qū)與周邊正常軟骨邊界較清晰;D組:缺損區(qū)修復(fù)組織平整修復(fù)軟骨缺損,修復(fù)區(qū)與周邊正常軟骨邊界迷糊,與周圍的軟骨色澤相近。2組織學(xué)觀察:術(shù)后8周:A組顯微鏡下觀察可見軟骨缺損區(qū)與正常軟骨區(qū)邊界明顯存在較大裂隙,新生細(xì)胞排列紊亂;B組顯微鏡下觀察軟骨缺損區(qū)細(xì)胞增生較為旺盛且豐富,排列有方向性;C組顯微鏡下觀察軟骨缺損區(qū)軟骨細(xì)胞增生旺盛與正常軟骨組織交界存在一定裂隙;D組顯微鏡下觀察軟骨缺損區(qū)細(xì)胞增生旺盛且豐富,排列有方向性,少部分新生軟骨近似透明軟骨。術(shù)后12周:A組顯微鏡下觀察可見軟骨缺損區(qū)細(xì)胞增生旺盛排列紊亂生,增生組織基本為纖維結(jié)締組織,未見明顯的軟骨組織增生;B、C兩組顯微鏡下觀察軟骨損傷區(qū)細(xì)胞增生旺盛且豐富,排列有方向性,交界區(qū)模糊,整合良好,未見明顯呈簇狀分布的增生區(qū)域大量纖維結(jié)締組織,有少量細(xì)胞向透明軟骨細(xì)胞分化;D組顯微鏡下觀察軟骨損傷區(qū)細(xì)胞增生旺盛且豐富,排列有方向性,部分新生軟骨近似透明軟骨。3掃描電鏡觀察:正常軟骨:可見關(guān)節(jié)軟骨表面平坦,未見表面存在扭曲和皺縮紋理。造模后軟骨:正常軟骨區(qū)與缺損區(qū)可見明顯階梯狀改變,正常軟骨區(qū)規(guī)整平滑,未出現(xiàn)皺縮紋理,缺損區(qū)表面可見凹凸不平,猶如不平整的坑洼路面。術(shù)后12周D組軟骨:電鏡下觀察可見交界區(qū)存在裂隙,缺損區(qū)修復(fù)組織靠近前叉韌帶側(cè)略顯規(guī)整。結(jié)論:1微骨折技術(shù)、富血小板血漿及二者聯(lián)合應(yīng)用均能有效的促進(jìn)軟骨全層缺損的修復(fù)作用。2單獨(dú)應(yīng)用微骨折技術(shù)或富血小板血漿12周組相比8周組并未有進(jìn)一步改善甚至出現(xiàn)退變。3微骨折技術(shù)結(jié)合富血小板血漿12周組相比8周組未發(fā)生退變,并且達(dá)到比較良好的修復(fù)效果,是一種修復(fù)全層軟骨損傷的有效方法。
[Abstract]:Objective : To study the effect of microfracture technique combined with platelet rich plasma ( PRP ) on articular cartilage defects . The results showed that the repairing tissue of the defect area could repair the defect of cartilage defect , the defect area and the peripheral normal cartilage boundary were more blurred . The results showed that the defect area repaired the tissue to repair the defect of cartilage , the defect area was more blurred with the peripheral normal cartilage . In group D , the proliferation of articular cartilage was observed under the microscope of group D . There were no significant changes in the area of articular cartilage . The results showed that there was no further improvement or even retrogression in the normal cartilage area .

【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R687.3

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

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本文編號：1789909