本文選題：干細(xì)胞 + 組織工程��； 參考：《中國組織工程研究》2017年13期

【摘要】：背景:骼肌來源的間充質(zhì)干細(xì)胞,在骨形態(tài)發(fā)生蛋白4等因子的調(diào)節(jié)下具有多向分化潛能,但具體細(xì)胞亞群的分化情況尚不十分明確。目的:觀察人骨骼肌來源的不同表面標(biāo)志物的間充質(zhì)干細(xì)胞特定亞群的多向分化潛能。方法:應(yīng)用流式細(xì)胞分選技術(shù),分選出具有不同細(xì)胞表面標(biāo)志物的人骨骼肌干細(xì)胞亞群,根據(jù)CD56及CD34/CD144的表達(dá)差異,將細(xì)胞分成CD56~+,CD56~+CD34~+CD144~+,CD34~+CD144~+及未分選組共4組,對比不同細(xì)胞亞群組在骨形態(tài)發(fā)生蛋白4成骨誘導(dǎo)或骨形態(tài)發(fā)生蛋白4~+轉(zhuǎn)化生長因子β3成軟骨誘導(dǎo)后的差異。通過堿性磷酸酶染色后堿性磷酸酶陽性細(xì)胞的百分比評估細(xì)胞骨代謝情況。將各亞群細(xì)胞進(jìn)行3D培養(yǎng)和細(xì)胞因子處理后,通過硝酸銀染色評估其成骨分化程度,通過阿爾新藍(lán)染色評價成軟骨分化程度。結(jié)果與結(jié)論:(1)細(xì)胞骨代謝:經(jīng)骨形態(tài)發(fā)生蛋白4處理后,4組細(xì)胞的堿性磷酸酶陽性細(xì)胞的百分比差異無顯著性意義(P0.05);(2)細(xì)胞分化:不同表面標(biāo)記物的4組細(xì)胞成骨及成軟骨分化有明顯差異,在相同成骨培養(yǎng)條件下,CD56~+組成骨能力最強(qiáng);相同成軟骨培養(yǎng)條件下,CD56~+,CD56~+CD34~+CD144~+組呈阿爾新藍(lán)染色陽性,CD56~+CD34~+CD144~+組的染色更深且區(qū)域更大;(3)結(jié)果證實,成骨與成軟骨潛能與不同的人骨骼肌間充質(zhì)干細(xì)胞類型有關(guān)。人骨骼肌來源的間充質(zhì)干細(xì)胞CD56~+亞群和成骨潛能有密切關(guān)系。同時CD56~+CD34~+CD144~+亞群分化能力更強(qiáng),具有更強(qiáng)的成軟骨潛能。
[Abstract]:Background: mesenchymal stem cells (MSCs) derived from the iliac muscle have the potential to differentiate in many ways under the regulation of bone morphogenetic protein 4 (BMP 4), but the differentiation of specific cell subsets is not very clear. Aim: to observe the multidirectional differentiation potential of mesenchymal stem cells (MSCs) with different surface markers derived from human skeletal muscle. Methods: the subsets of human skeletal muscle stem cells with different cell surface markers were selected by flow cytometry. According to the expression of CD56 and CD34/CD144, the cells were divided into four groups: CD56 ~ + CD56 ~ CD34 ~ CD144 ~ + CD34 ~ CD144~ and no group (n = 4). The difference of osteogenesis induced by bone morphogenetic protein 4 (BMP 4) or osteogenesis induced by transforming growth factor 尾 3 (TGF- 尾 3) was compared between different cell subgroups. Bone metabolism was evaluated by percentage of alkaline phosphatase positive cells after alkaline phosphatase staining. After 3D culture and cytokine treatment, the osteogenic differentiation was evaluated by silver nitrate staining and cartilage differentiation was evaluated by new blue staining. Results and conclusion: bone metabolism: the percentage of alkaline phosphatase positive cells in the 4 groups treated with bone morphogenetic protein 4 had no significant difference (P 0.05); osteoblasts of 4 groups with different surface markers were differentiated. And chondrogenic differentiation, In the same osteogenic culture condition, the ability of CD56 ~ + to form bone was the strongest, and in the same condition of chondrogenic culture, the positive staining of CD56 ~ + CD56 ~ CD34 ~ CD144 ~ ~ ~ + was found to be deeper and the area was larger than that of the control group (P < 0.05). Osteogenic and chondrogenic potential are associated with different types of human skeletal mesenchymal stem cells. CD56 ~ subsets of mesenchymal stem cells derived from human skeletal muscle are closely related to osteogenic potential. At the same time, CD56 ~ CD34 ~ CD144- subgroup differentiation ability is stronger, have stronger cartilage forming potential.
【作者單位】： 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81472136)~~
【分類號】：R318.08;R68

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本文編號：1788025