人表皮干細胞體外誘導(dǎo)分化為汗腺樣上皮細胞的研究
本文選題:表皮干細胞 + 汗腺樣細胞 ; 參考:《重慶醫(yī)學(xué)》2017年10期
【摘要】:目的探討體外人表皮干細胞向汗腺樣上皮分化的影響條件,并對誘導(dǎo)成的管腔樣結(jié)構(gòu)進行鑒定。方法將人表皮干細胞接種到復(fù)方殼多糖真皮基質(zhì)上和膠原凝膠中,加入不同濃度的表皮生長因子(EGF),體外垂直震蕩培養(yǎng),進行三維培養(yǎng)和定向誘導(dǎo)分化,采用HE染色、免疫熒光等手段觀察表皮干細胞定向分化為汗腺樣上皮的條件及形態(tài)、表型改變。結(jié)果 15~20ng/mL的EGF可誘導(dǎo)組織工程真皮上的表皮干細胞向真皮內(nèi)生長并可出現(xiàn)腺樣結(jié)構(gòu)。HE染色該結(jié)構(gòu),顯示為單層細胞連接為環(huán)狀,中間見明顯的腔隙,細胞質(zhì)嗜酸性。利用CK19熒光染色,在激光共聚焦顯微鏡下觀察到細胞團中央有管腔結(jié)構(gòu),同時此結(jié)構(gòu)表達CK18、癌胚抗原(CEA)。結(jié)論體外培養(yǎng)的人表皮干細胞接種在組織工程真皮上,在一定濃度的EGF誘導(dǎo)條件下,能形成管腔樣結(jié)構(gòu),該管腔樣結(jié)構(gòu)在形態(tài)學(xué)、組織學(xué)上與在體汗腺分泌部細胞相似。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of human epidermal stem cells on the differentiation of human epidermal stem cells into sweat gland epithelium in vitro and to identify the induced luminal structure. Methods Human epidermal stem cells were inoculated into compound chitosan dermal matrix and collagen gel. Different concentrations of epidermal growth factor (EGFN) were added to culture in vitro vertical shock culture, three-dimensional culture and directional differentiation, HE staining was used. The morphological and phenotypic changes of epidermal stem cells differentiated into sweat gland-like epithelium were observed by immunofluorescence. Results 15~20ng/mL EGF could induce the epidermal stem cells to grow into the dermis, and the glandular structure. He staining showed that the monolayer cells were connected to each other in annular shape, with obvious lacunae and eosinophilic cytoplasm. By using CK19 fluorescence staining, the lumen structure in the center of the cell was observed under laser confocal microscope, and the structure expressed CK18, carcinoembryonic antigen (CEA). Conclusion cultured human epidermal stem cells inoculated on tissue engineered dermis can form luminal structure under certain concentration of EGF induction. The morphology and histology of human epidermal stem cells are similar to those of sweat gland secretory cells in vivo.
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所整形美容科;第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所皮膚科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(81201244)
【分類號】:R622
【參考文獻】
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【共引文獻】
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【二級參考文獻】
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,本文編號:1787717
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