小鼠標準化脊髓損傷模型的建立及miR-31轉(zhuǎn)基因小鼠脊髓損傷機制研究
發(fā)布時間:2018-03-28 00:23
本文選題:脊髓 切入點:損傷 出處:《山西醫(yī)科大學》2015年碩士論文
【摘要】:目的:1.通過比較兩種構建小鼠脊髓擊打損傷模型儀器各自的特點和優(yōu)勢,以期探索脊髓擊打損傷模型建立的標準化。2.對脊髓損傷的mi R-31轉(zhuǎn)基因小鼠繼發(fā)性損傷的恢復狀況進行了解,進一步掌握mi R-31調(diào)控或改善脊髓損傷微循環(huán)的機制。方法:第一部分:比較兩種構建小鼠脊髓擊打損傷模型儀器將40只小鼠隨機分為兩組,分別采用自制Allen脊髓打擊器(A組,n=20)和Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器(B組,n=20)進行擊打,建立小鼠脊髓損傷模型。術后,于1d、3d、5d、7d、14d、21d六個時間節(jié)點,采用BBB運動功能評分對小鼠下肢恢復情況進行評估,記錄數(shù)據(jù)。并在3d、7d、14d、21d四個時間節(jié)點取實驗小鼠脊髓損傷處進行HE染色。第二部分:mi R-31轉(zhuǎn)基因小鼠脊髓損傷機制研究使用Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器分別對FVB小鼠(A組,n=30)和mi R-31轉(zhuǎn)基因小鼠(B組,n=30)進行擊打,成功建立小鼠脊髓損傷模型。術后,于3d、7d、14d、21d進行BBB評分、H E染色、免疫熒光檢測和熒光定量PCR檢測。結果:第一部分:兩組脊髓損傷模型在1d、3d、5d、21d四個時間節(jié)點恢復情況無明顯差異(P0.05)。而在7d、14d,B組小鼠的脊髓損傷恢復狀況明顯優(yōu)于A組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。在組織形態(tài)切片上差異不大。第二部分:兩組不同小鼠在制作脊髓損傷模型后,恢復趨勢雖大體相同,但仍有差異存在。BBB評分顯示在7d、14d,B組小鼠的脊髓損傷恢復狀況優(yōu)于A組。在組織形態(tài)上差異不大,只在14d、21d兩個時間點上存在少量差異。熒光和PCR結果顯示:Nestin的表達量趨勢兩組基本相同,只在14d、21d兩個時間點上B組優(yōu)于A組;NSE在表達上兩組存在差異,B組的表達量大于A組。結論:第一部分:兩種擊打脊髓的實驗儀器均可成功建立小鼠的脊髓損傷模型,采用Impactor M-Ⅲ脊髓撞擊器構建的脊髓擊打損傷模型小鼠恢復較自制Allen脊髓打擊器更快速、穩(wěn)定。第二部分:推測mi R-31在脊髓損傷后可能發(fā)揮著促進神經(jīng)干細胞再生,改善脊髓損傷模型脊髓內(nèi)微環(huán)境,促進脊髓損傷的恢復的作用。
[Abstract]:Objective 1. To compare the characteristics and advantages of two kinds of instruments for constructing mouse spinal cord injury model. In order to explore the establishment of spinal cord hit injury model standardized .2. to understand the spinal cord injury of mi R-31 transgenic mice secondary injury recovery, Methods: methods: the first part: comparing two kinds of instruments to construct mouse spinal cord injury model, 40 mice were randomly divided into two groups. The spinal cord injury model of mice was established by using Allen spinal cord impactor group A (group A) and group Impactor M- 鈪,
本文編號:1673935
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