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miR-646抑制骨肉瘤細(xì)胞的增殖和遷移的機(jī)制初探

發(fā)布時(shí)間:2018-03-27 15:26

  本文選題:miR- 切入點(diǎn):骨肉瘤 出處:《中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年08期


【摘要】:目的探討mi R-646對骨肉瘤細(xì)胞增殖和遷移的抑制作用。方法通過MTT實(shí)驗(yàn)檢測mi R-646過表達(dá)或受到抑制后對U2OS細(xì)胞增殖的影響。Transwell實(shí)驗(yàn)分析mi R-646過表達(dá)或受到抑制后對U2OS細(xì)胞遷移的影響。MIRDB預(yù)測mi R-646與表皮生長因子受體(EGFR)的位點(diǎn)結(jié)合后,利用熒光素酶報(bào)告及實(shí)驗(yàn)檢測mi R-646對EGFR的靶向作用,并通過Western blotting檢測mi R-646對EGFR通路的作用。結(jié)果 MTT結(jié)果表明,轉(zhuǎn)染mi R-646后U2OS細(xì)胞的增殖受到了顯著地抑制,24 h時(shí)抑制率為21.76%±1.05%,相反,當(dāng)mi R-646受到抑制后U2OS細(xì)胞的增殖得到了促進(jìn),24 h時(shí)促進(jìn)的比率為18.89%±0.81%。Transwell實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)mi R-646可以抑制骨肉瘤細(xì)胞系U2OS的遷移能力。隨后MIRDB預(yù)測發(fā)現(xiàn)mi R-646與EGFR的3’UTR區(qū)域具有結(jié)合位點(diǎn),熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證明了mi R-646可以直接作用于EGFR。Western blotting結(jié)果證明mi R-646對U2OS細(xì)胞增殖遷移能力的抑制在一定程度上是通過mi R-646對EGFR通路的抑制實(shí)現(xiàn)的。結(jié)論 mi R-646可以通過抑制EGFR通路的活性,進(jìn)而抑制骨肉瘤細(xì)胞的增殖和遷移功能。
[Abstract]:Objective to investigate the inhibitory effect of mi R-646 on proliferation and migration of osteosarcoma cells. Methods MTT assay was used to detect the effect of mi R-646 overexpression or inhibition on the proliferation of U2OS cells. Transwell experiment was used to analyze the overexpression or inhibition of mi R-646 on U2OS cells. Effects of cell migration. MIRDB predicts that the site of mi R-646 binds to the epidermal growth factor receptor (EGFRR). Luciferase reports and experiments were used to detect the targeting effect of mi R-646 on EGFR and Western blotting to detect the effect of mi R-646 on EGFR pathway. After transfection of miR-646, the proliferation of U2OS cells was significantly inhibited by 21.76% 鹵1.05% at 24 h. When the proliferation of U2OS cells was inhibited after MIR-646 was inhibited, the promotion rate of U2OS cells was 18.89% 鹵0.81%.Transwell for 24 h. It was found that mi R-646 could inhibit the migration ability of osteosarcoma cell line U2OS. Subsequently, MIRDB predicted that mi R-646 had binding sites with 3'UTR region of EGFR. The experiment of luciferase reporter gene proved that mi R-646 could directly act on EGFR.Western blotting. The results showed that the inhibition of U2OS cell proliferation and migration by mi R-646 was to some extent realized by the inhibition of EGFR pathway by mi R-646. Conclusion\\\; By inhibiting the activity of the EGFR pathway, Furthermore, the proliferation and migration of osteosarcoma cells were inhibited.
【作者單位】: 中國醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院遼寧省腫瘤醫(yī)院骨與軟組織腫瘤科;中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院骨科;沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院手外科;
【分類號】:R738.1

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9 朱U,

本文編號:1672103


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