本文選題：PC12細(xì)胞　切入點(diǎn)：低溫　出處：《昆明醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：[目的]在不同溫度梯度下培養(yǎng)pc12細(xì)胞,檢測不同溫度梯度下pcl2細(xì)胞谷氨酸受體蛋白質(zhì)、mRNA的表達(dá)量,并闡明溫度對其表達(dá)量的影響和深低溫腦保護(hù)作用在谷氨酸受體方面的可能機(jī)制。[方法]將pc12細(xì)胞株隨機(jī)分為四組：①深度低溫組(將傳代的細(xì)胞置于20℃,5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天),②中度低溫組： (將傳代的細(xì)胞置于26℃,5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天),③輕度低溫組(將傳代的細(xì)胞置于30℃,5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天)。④常溫對照組(將傳代的細(xì)胞置于37℃,5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天)。每組12例標(biāo)本(Western-Blot、RT-PCR各用6例標(biāo)本)。利用電泳和蛋白質(zhì)印跡(Western-Blot)技術(shù)和逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測離子型谷氨酸受體G1uR2和代謝性谷氨酸受體mGluRl-a在不同溫度梯度組的蛋白質(zhì)和mRNA含量變化情況,結(jié)果采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。[結(jié)果](1)pc12細(xì)胞可以在外界溫度為20℃-37-C范圍內(nèi)培養(yǎng)生長良好(2)低溫組離子型谷氨酸受體GluR2的蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)量均較常溫組高且溫度越低表達(dá)量越高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 (3)低溫組代謝性谷氨酸受體mGluRl-a的蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)量均較常溫組低且溫度越低表達(dá)量越低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。[結(jié)論](1)體外培養(yǎng)大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤(pc12)細(xì)胞模型操作簡便,重復(fù)性好,能模擬低溫治療過程,是一種較好的體外神經(jīng)元低溫模型。(2)溫度可影響谷氨酸受體的表達(dá)量。(3)在20℃-37℃范圍內(nèi),隨著溫度的降低離子型谷氨酸受體GluR2的蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)量逐漸升高,低溫促進(jìn)G1uR2受體蛋白質(zhì)形成。 (4)在20℃-37℃范圍內(nèi),隨著溫度的降低代謝性谷氨酸受體mGluR1-a的蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)量逐漸降低,低溫抑制mGluR1-a受體蛋白質(zhì)形成。(5)低溫提高離子型谷氨酸受體G1uR2的蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)量和降低代謝性谷氨酸受體mGluR1-a的蛋白質(zhì)和mRNA表達(dá)量可能是低溫腦保護(hù)的作用機(jī)制之一。
[Abstract]:[objective] to investigate the expression of glutamate receptor protein in pc12 cells at different temperature gradients, and to detect the expression of glutamate receptor protein in pcl2 cells at different temperature gradients. The effect of temperature on the expression of Glutamic acid receptor and the possible mechanism of deep hypothermia brain protection on glutamate receptor were also elucidated. [methods] pc12 cell lines were randomly divided into four groups: 1: 1 deep hypothermia group (cultured cells were placed at 20 鈩，

本文編號：1645870