本文選題：γδT細(xì)胞　切入點(diǎn)：DETC　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景異體皮膚移植以后引發(fā)的強(qiáng)烈免疫排斥反應(yīng)是阻礙大面積燒傷患者創(chuàng)面修復(fù)的關(guān)鍵問題。經(jīng)典免疫學(xué)觀點(diǎn)認(rèn)為,LCs是在異體皮膚移植免疫排斥反應(yīng)中起核心作用的免疫細(xì)胞。但通過LCs敲除小鼠皮膚移植模型發(fā)現(xiàn),與供受體都是野生型小鼠的皮膚移植相比,供體、受體以及供受體都缺乏LCs的小鼠之間的皮膚移植,移植物存活時(shí)間并沒有顯著延長(zhǎng)。提示在皮膚移植免疫排斥反應(yīng)中還存在其它細(xì)胞參與。而另外一種重要的構(gòu)成皮膚組織免疫微環(huán)境的細(xì)胞是γδT細(xì)胞,其在腫瘤、感染、創(chuàng)面愈合、自身免疫性疾病等發(fā)揮重要作用。我們前期預(yù)實(shí)驗(yàn)也通過小鼠皮膚移植模型發(fā)現(xiàn),對(duì)比野生型小鼠的皮膚移植物,TCRδ基因敲除小鼠的皮膚移植物存活時(shí)間明顯延長(zhǎng),提示γδT細(xì)胞可能在異體皮膚移植免疫排斥反應(yīng)中起重要作用,且γδT細(xì)胞是皮膚組織中分泌細(xì)胞因子的重要來源。而可能參與皮膚排斥反應(yīng)的有著不同功能的γδT細(xì)胞亞群包括:1.分布于表皮組織中的Vγ3 T細(xì)胞即樹突狀表皮T細(xì)胞(Dendritic Epidermal T Cells,DETCs);2.分布于真皮組織中的Vγ4 T細(xì)胞;3.分布于外周循環(huán)的Vγ4 T細(xì)胞。究竟是誰在皮膚移植免疫排斥反應(yīng)中起重要作用、如何發(fā)揮作用以及具體作用機(jī)制迄今尚不清楚,闡明這些問題,不僅能夠使我們進(jìn)一步了解皮膚移植免疫排斥反應(yīng)的特殊性,而且可以作為傳統(tǒng)移植排斥反應(yīng)的有益補(bǔ)充,并為臨床控制皮膚免疫排斥反應(yīng)提供新的細(xì)胞分子靶點(diǎn)。目的本研究擬探討γδT各亞群是否參與異體皮膚移植免疫排斥反應(yīng)以及相應(yīng)機(jī)制。方法1、通過建立同系MHC分子微小差異的不同性別小鼠(雄-雌)之間的皮膚移植模型,比較野生型組、TCRδ-/-組移植皮片存活時(shí)間。2、通過免疫熒光的方法觀察DETCs的一般形態(tài);流式細(xì)胞技術(shù)分析DETCs的表型及細(xì)胞因子的表達(dá)情況;通過將DETCs和na?ve CD4+T細(xì)胞體外進(jìn)行共培養(yǎng),觀察DETCs對(duì)na?ve CD4+T細(xì)胞分化方向的影響。3、通過建立小鼠皮膚移植模型,比較野生型組和Vγ4清除組移植皮片存活時(shí)間。并在移植后第5天,取野生型組移植皮片分離表皮細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)組,同體正常表皮作為對(duì)照組,流式細(xì)胞術(shù)分析Vγ4 T細(xì)胞的浸潤(rùn)情況,Western blot檢測(cè)移植皮片表皮組織中IL-17、IL-23、IL1β的表達(dá)情況。結(jié)果1、TCRδ-/-組皮膚移植物存活時(shí)間較野生型組皮膚移植物存活時(shí)間顯著延長(zhǎng)。皮膚移植物平均生存時(shí)間(MST)(TCRδ-/-組vs野生型組:22.30天vs 10.60天P0.001)。2、共聚焦顯微鏡下觀察DETCs的形態(tài),呈APC的樹突狀細(xì)胞的特征,活化后分泌一定水平的IFN-γ和IL-17A,體外與na?ve CD4+T細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)可以誘導(dǎo)后者向Th1方向分化。3、Vγ4清除組皮膚移植物較野生型組皮膚移植物存活時(shí)間顯著延長(zhǎng)。皮膚移植物平均生存時(shí)間(MST)(TCRδ-/-組vs野生型組:49.08天vs 11.00天P0.001)。4、野生型小鼠移植后第5天,皮膚移植物表皮組織較正常表皮浸潤(rùn)Vγ4 T細(xì)胞數(shù)量明顯增加,由0.86%增加到6.08%,而DETCs比例顯著下降,由2.38%下降到0.78%。移植物表皮組織中IL-17、IL-23、IL1β的表達(dá)較正常表皮顯著增強(qiáng)(P0.05)。結(jié)論本研究初步證實(shí)γδT細(xì)胞參與并加速了皮膚移植排斥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展過程,而不同亞型的γδT細(xì)胞在其中發(fā)揮的作用有所不同。Vγ3γδT細(xì)胞(即DETCs)具有抗原遞呈細(xì)胞的基本特征,可能是在異體皮膚免疫排斥反應(yīng)中起關(guān)鍵作用的DCs;而Vγ4γδT細(xì)胞通過早期提供IL-17來加速皮膚移植排斥反應(yīng)的發(fā)生。綜上所述,γδT細(xì)胞作為皮膚免疫微環(huán)境的重要組成部分,并在皮膚移植免疫排斥反應(yīng)中具有其特殊的作用。
[Abstract]:On the background of strong immune skin allograft rejection is caused after the key problems that hinder the repair of large area burn wound. The classical immunology point of view, LCs is in the immune skin allograft rejection plays a central role in the reaction of immune cells. But through the LCs knockout mouse model of skin transplantation, and for all the wild type receptor mice skin transplantation compared to donor, receptor and receptor for lack of LCs mice skin transplantation, graft survival was not significantly prolonged. In skin allograft rejection also exist in other cells. Another important constituent of skin tissue cells are the immune microenvironment of gamma delta T cells in the tumor, infection, wound healing, an important role in autoimmune disease. We play a pre experiment through mouse skin transplantation model and found that compared to the wild Type of mouse skin graft, TCR delta knockout mouse skin allograft survival time was significantly prolonged, suggesting that T cells may have immune rejection in allograft skin plays an important role in the reaction, and gamma delta T cells is an important source of cytokine secretion in skin tissue and may be involved in the rejection of skin there are different functions of gamma delta T cell subsets including V gamma 1. distributed in the epidermal tissue 3 T cells called dendritic epidermal T cells (Dendritic Epidermal T Cells, DETCs); V gamma 2. distributed in the dermal tissues of 4 T cells in the peripheral circulation; 3. V gamma ring 4 T who is in the cell. The skin graft rejection reaction plays an important role in how to play the role and the specific mechanism remains unclear. To clarify these issues, not only enables us to further understand the particularity of skin allograft rejection, and can be used as A useful complement to traditional transplant rejection, and reaction cell new molecular targets for the clinical control of skin immune rejection. The purpose of this study is to explore the gamma delta T subsets in immune skin allograft rejection and corresponding mechanism. 1, through different sex mice homologous MHC molecules to small differences (male - female) skin transplantation model between the wild type group, TCR 8 - group of skin graft survival time.2, we observed the morphology of DETCs by immunofluorescence; analysis of phenotype and cytokine DETCs flow cytometry the expression of DETCs and Na; the CD4+T cells were co cultured with ve? In vitro, the effect of DETCs on the na?.3 ve CD4+T influence cell differentiation direction, through the establishment of a mouse model of skin transplantation, compared with wild type group and V gamma 4 clearance group skin graft survival time. And in fifth days after transplantation, the wild type group Skin grafts isolated epidermal cells as the experimental group, normal skin as control group, the infiltration of flow cytometric analysis of V gamma 4 T cells, IL-17, Western blot detection of skin grafts in the epidermis of IL-23, expression of IL1 beta. 1, TCR 8 - group of skin allograft survival compared to the wild type of skin graft survival time was significantly prolonged. The average survival time of skin graft (MST) (TCR Delta - group vs wild type group: 22.30 days vs 10.60 days P0.001.2), to observe the morphology of DETCs confocal microscope, a feature of APC dendritic cells, secretion of a certain level of activation of IFN- and gamma IL-17A, Na and VE in vitro? CD4+T cells can induce the differentiation towards the direction of Th1.3 co cultured with V gamma 4 clearance group skin graft compared with the wild type group of skin graft survival time was significantly prolonged. The average survival time of skin graft (MST) - vs (TCR delta group of wild type Group: 49.08 days vs 11 days P0.001.4), wild type mice fifth days after transplantation, skin graft of epidermal tissue than normal epidermal infiltration of V gamma 4 the number of T cells increased significantly, increased from 0.86% to 6.08%, while the proportion of DETCs was significantly decreased, decreased from 2.38% to IL-17, 0.78%. graft in the epidermis of IL-23 expression IL1 beta than normal epidermis increased significantly (P0.05). Conclusion: T cells participate in and accelerate the process of the occurrence and development of skin allograft rejection, and different subtypes of gamma delta T cells which play the role of different.V Gamma 3 gamma delta T cells (DETCs) with antigen is the basic feature of cell, may be in the allograft immune rejection plays a key role in the reaction of DCs; and 4 V gamma gamma delta T cells by early IL-17 to accelerate the occurrence of skin allograft rejection. In conclusion, an important group of gamma delta T cells as the skin immune micro environment In part, it has a special role in the immune rejection of skin transplantation.

【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R622.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 彭整軍;鼠皮膚移植模型免疫排斥反應(yīng)的監(jiān)測(cè)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊(cè));1990年03期

2 趙普寧;林靜;鐘烈紅;李忠;史貽玉;;穿透性角膜移植術(shù)后免疫排斥反應(yīng)高危因素分析[J];中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué);2007年01期

3 周瑾;陸曉和;柯曉云;湯明芳;宮玉波;袁偉;鐘彥彥;;蛋白芯片技術(shù)監(jiān)測(cè)大鼠穿透性角膜移植術(shù)后免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生[J];廣東醫(yī)學(xué);2008年05期

4 李穎,段德義,楊慧;抑制移植免疫排斥反應(yīng)的研究進(jìn)展[J];中國(guó)生物工程雜志;2003年10期

5 潘樂;李世光;左健;;同種異體肌腱移植修復(fù)運(yùn)動(dòng)損傷:免疫排斥反應(yīng)及降低免疫排斥反應(yīng)的方法[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2011年53期

6 曾水林;韓洋;王磊;雷志年;朱建寶;李濤;;同種異體胚腦移植免疫排斥反應(yīng)實(shí)驗(yàn)研究[J];中華神經(jīng)外科疾病研究雜志;2006年02期

7 賈保祥;劉玉軍;張國(guó)風(fēng);曹家康;張茁;張瓦誠(chéng);;警惕腦內(nèi)異體組織移植產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)[J];首都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1992年01期

8 張廣忖,張洪偉,李小飛,周勇安,陸軍;免疫排斥反應(yīng)影響移植氣管存活的實(shí)驗(yàn)研究[J];陜西醫(yī)學(xué)雜志;1995年12期

9 高建華,楊麗霞,鄭金樹;全角膜移植術(shù)后免疫排斥反應(yīng)的探討[J];眼科;2003年01期

10 李兵;洪晶;趙力艷;魏杰;;雷帕霉素滴眼液抑制大鼠角膜移植的免疫排斥反應(yīng)[J];國(guó)際眼科雜志;2006年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 辛萌;史偉云;吳祥根;;霉酚酸酯植入型緩釋劑抑制兔高危角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[A];2009年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第九屆中國(guó)藥師周論文集[C];2009年

2 辛萌;史偉云;吳祥根;;霉酚酸酯植入型緩釋劑抑制兔高危角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[A];2010年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十屆中國(guó)藥師周論文集[C];2010年

3 陳敏;謝立信;史偉云;趙靖;羅琳;;真菌性角膜潰瘍行角膜移植術(shù)后免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生情況[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

4 蔡劍秋;徐栩;陳峰;吳煒;韓真真;施明光;;CTLA4-Ig抑制鼠高危角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[A];2006年浙江省眼科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

5 郝念;張明昌;;來氟米特活性代謝物A771726防治大鼠角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

6 接英;潘志強(qiáng);張文華;武宇影;;CD1分子在高危角膜移植免疫排斥反應(yīng)中表達(dá)的研究[A];全國(guó)臨床免疫檢驗(yàn)研討會(huì)暨第六屆全國(guó)臨床免疫學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

7 王振興;陳花;武小桐;;Th17/Treg失衡與腎移植免疫排斥反應(yīng)的關(guān)系[A];2012中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2012年

8 金繪祥;史偉云;高華;劉明娜;李素霞;;NF—κB圈套寡脫氧核苷酸抑制角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

9 王振興;陳花;武小桐;石韶華;武政華;馬永文;康彥;宿宇坤;;Th17/Treg失衡與腎移植免疫排斥反應(yīng)的關(guān)系[A];2013中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2013年

10 張淼;;防治角膜移植排斥反應(yīng)的藥物研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)院管理學(xué)會(huì)第十一屆全國(guó)醫(yī)院感染管理學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2004年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前9條

1 史偉云;角膜移植免疫排斥反應(yīng)機(jī)理及防治的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2005年

2 朱勇;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞干預(yù)異種氣管移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

3 周瑾;蛋白質(zhì)芯片技術(shù)對(duì)大鼠角膜移植免疫排斥反應(yīng)相關(guān)蛋白質(zhì)群的分析[D];南方醫(yī)科大學(xué);2008年

4 李兵;雷帕霉素抑制大鼠角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2006年

5 丁隆;細(xì)菌感染對(duì)移植肝免疫排斥反應(yīng)的影響及其機(jī)制的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

6 宮玉波;CD25單克隆抗體防治大鼠角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2008年

7 李紹偉;CTLA4-Ig基因轉(zhuǎn)移抑制角膜移植術(shù)后免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2003年

8 袁偉;ICOS共刺激通路參與角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2008年

9 牛曉霞;角膜不同保存方法與術(shù)后免疫排斥反應(yīng)相關(guān)性的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 燕榮帥;γδT細(xì)胞在皮膚移植免疫排斥反應(yīng)中的作用及機(jī)理初探[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 李婧;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1對(duì)犬穿透性角膜移植后免疫排斥的影響[D];西南大學(xué);2013年

3 胡小軍;核心蛋白聚糖抑制淋巴細(xì)胞增殖及皮膚移植免疫排斥反應(yīng)的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

4 劉軍彩;前房?jī)?nèi)免疫微環(huán)境的動(dòng)態(tài)變化與角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2010年

5 聶唯;MRI納米生物探針檢測(cè)胰島移植免疫排斥反應(yīng)[D];中南大學(xué);2007年

6 俞益豐;緩釋膠原膜載FK506抗兔角膜移植術(shù)后免疫排斥反應(yīng)實(shí)驗(yàn)研究[D];江西醫(yī)學(xué)院;2004年

7 趙鶯;沙利度胺治療鴕鳥-兔異種板層角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

8 程琳;內(nèi)皮抑制素抑制大鼠角膜移植術(shù)后新生血管及免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

9 王超;1，25-二羥維生素D3抑制小鼠角膜移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];暨南大學(xué);2014年

10 王巧玲;色素上皮細(xì)胞衍生因子抑制大鼠角膜移植術(shù)后免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2005年

，

本文編號(hào)：1629743