發(fā)布時間：2018-03-15 04:16

  本文選題：骨關(guān)節(jié)炎　切入點(diǎn)：軟骨細(xì)胞周基質(zhì)　出處：《中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的：探討Ⅵ型膠原蛋白在OA軟骨中的空間分布較健康軟骨Ⅵ型膠原的變化規(guī)律；其次通過研究HtrA1在OA軟骨中的分布規(guī)律及其與Ⅵ型膠原分布改變的關(guān)系,探討HtrA1在OA發(fā)病中的作用。方法：利用模型組Hartley豚鼠自發(fā)性骨關(guān)節(jié)炎模型和對照組健康組豚鼠,取膝關(guān)節(jié)軟骨做冰凍切片,進(jìn)行HE染色和Ⅵ型膠原免疫熒光染色,而后利用Delta-Vision Elite成像系統(tǒng)和Imaris軟件進(jìn)行斷層掃描、3D重建和定量分析,比較模型組和對照組軟骨組織的細(xì)胞數(shù)量和體積、Ⅵ型膠原的厚度與體積以及Ⅵ型膠原體積與細(xì)胞體積比值的差異：其次,利用以上模型及對照組,取膝關(guān)節(jié)軟骨做石蠟切片,進(jìn)行番紅O染色、HtrA1免疫組化染色以及HtrA1、Ⅵ型膠原免疫熒光雙染色,比較兩組軟骨在大體形態(tài)、HtrA1免疫組化染色陽性率等方面的差異以及HtrA1與Ⅵ型膠原分布關(guān)系。結(jié)果：正常軟骨中,薄層Ⅵ型膠原層均勻包裹軟骨細(xì)胞,各層細(xì)胞外Ⅵ型膠原層厚度無明顯差別(P0.05),體積隨細(xì)胞深度增加而增加(P0.01)：骨關(guān)節(jié)炎軟骨中,Ⅵ型膠原體積減小(P0.01)且空間分布不規(guī)則,移行層呈蜂窩狀或出現(xiàn)空洞,放射層中呈點(diǎn)、片狀彌散分布,且在細(xì)胞周基質(zhì)外出現(xiàn)散在的Ⅵ型膠原。隨著軟骨組織的退化,OA組番紅0染色與健康對照組軟骨相比,軟骨細(xì)胞外基質(zhì)中的蛋白多糖含量明顯減少,且蛋白多糖多集中與軟骨囊(PCM和TM)內(nèi),符合OA關(guān)節(jié)退化特征。正常關(guān)節(jié)軟骨組織內(nèi)HtrA1的染色陽性細(xì)胞數(shù)較少,且在移行層和放射層較表面層較多(P0.01)；OA軟骨內(nèi)HtrA1的染色陽性細(xì)胞數(shù)接近100%,各層細(xì)胞陽性率無明顯差別(P0.05),且染色陽性的區(qū)域局限于胞核和胞質(zhì),胞外基質(zhì)呈陰性。正常軟骨中,移行層和放射層的Ⅵ型膠原和HtrA1共存：OA軟骨中,移行層和放射層的Ⅵ型膠原分布不規(guī)則,且Ⅵ型膠原缺失的部位呈HtrA1熒光強(qiáng)陽性.表明HtrA1在Ⅵ型膠原分布的改變中有重要作用。結(jié)論：在骨關(guān)節(jié)炎軟骨中Ⅵ型膠原體積減少,不完全包裹軟骨細(xì)胞,出現(xiàn)蜂窩、空洞和彌散分布的現(xiàn)象；骨關(guān)節(jié)炎軟骨中幾乎所有軟骨細(xì)胞分泌的HtrA1增多,且分布于胞質(zhì)和胞核內(nèi),其有可能在Ⅵ型膠原空間分布的變化中發(fā)揮重要作用,并通過誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞分化和基質(zhì)降解,促進(jìn)關(guān)節(jié)軟骨退化和OA形成。
[Abstract]:Objective: to investigate the spatial distribution of collagen 鈪，

本文編號：1614383