本文選題：丙泊酚　切入點：缺血再灌注損傷　出處：《廣東醫(yī)學(xué)》2017年20期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討丙泊酚對人腎小管上皮細(xì)胞(HK-2細(xì)胞)缺血再灌注損傷后纖維化的作用及轉(zhuǎn)化生長因子β激活激酶(TAK1)在其中的可能作用機制。方法采用隨機數(shù)字表法將HK-2細(xì)胞分為6組(n=36):空白對照組(C組)、缺血再灌注組(IR組)、丙泊酚組(IRP組)、脂肪乳劑組(IRF組)、TAK1過表達(dá)組(IRPT組)、TAK1過表達(dá)陰性病毒對照組(IRPTI組)。采用抗霉素A耗竭HK-2細(xì)胞ATP后更換正常培養(yǎng)液恢復(fù)補充代謝底物的方法制備ATP耗竭再恢復(fù)損傷模型模擬體內(nèi)細(xì)胞缺血再灌注損傷狀態(tài)。C組正常培養(yǎng),不作任何處理;IR組:正常培養(yǎng)的HK-2細(xì)胞更換為含10μmol/L抗霉素A及1μmol/L鈣離子通道載體A23187的無血清DMEM培養(yǎng)基孵育1 h,PBS清洗之后再換成正常含血清培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)12、24、48 h;IRP組于ATP耗竭前1 h,正常培養(yǎng)基中加入丙泊酚(終濃度20μmol/L)預(yù)孵育1 h;IRPT組于正常培養(yǎng)基中加入丙泊酚(終濃度20μmol/L)及TAK1慢病毒(滴度為2×107TU/mL)預(yù)孵育1 h;IRF組正常培養(yǎng)基中加入10%脂肪乳劑預(yù)孵育1 h;IRPTI組正常培養(yǎng)基中加入丙泊酚(終濃度20μmol/L)及TAK1陰性慢病毒預(yù)孵育1 h,其余處理均同IR組。于ATP再恢復(fù)12 h時,采用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡,MTT法測定細(xì)胞活力;于ATP再恢復(fù)12、24和48 h時,采用Western blot法測定TAK1的表達(dá)水平,于ATP再恢復(fù)48 h時Western blot法檢測α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、纖維粘連蛋白(FN)、膠原蛋白1(COL 1)的表達(dá)水平。結(jié)果與C組比較,IR組細(xì)胞凋亡率增加,細(xì)胞活力降低,ATP再恢復(fù)后TAK1、COL1、α-SMA和FN表達(dá)均上調(diào)(P0.05);與IR組比較,IRP組細(xì)胞凋亡率減少,細(xì)胞活力增強,ATP再恢復(fù)后TAK1、COL1、α-SMA和FN表達(dá)均下調(diào)(P0.05);與IRP組比較,IRPT組細(xì)胞凋亡率增加,細(xì)胞活力降低,再恢復(fù)后TAK1、COL1、α-SMA和FN表達(dá)均上調(diào)(P0.05)。結(jié)論丙泊酚預(yù)處理可減輕ATP耗竭再恢復(fù)誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞纖維化,其機制可能是通過下調(diào)TAK1表達(dá),進(jìn)而抑制了早期細(xì)胞凋亡,從而減輕了HK-2細(xì)胞纖維化程度。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of propofol on fibrosis after ischemia-reperfusion injury in human renal tubular epithelial cells (HK-2) and the possible mechanism of transforming growth factor 尾 -activated kinase (TGF- 尾 -activated kinase 1) in the process. The cells were divided into 6 groups: control group C, ischemia reperfusion group, propofol group IRP group, fat emulsion group IRF group, IRF group IRF group, HK-2 group with negative expression of TAK1. The HK-2 cells were depleted by anti-mycin A. Methods the model of ATP depletion and recovery injury was made by replacing the normal culture medium after ATP. The model was used to simulate the ischemia reperfusion injury of cells in vivo. Group C was cultured in normal condition. No treatment: normal cultured HK-2 cells were replaced by serum-free DMEM medium containing 10 渭 mol/L anti-mycin A and 1 渭 mol/L calcium channel carrier A23187, incubated for 1 hour, then washed, then replaced with normal serum-containing medium for 12244h. One hour before ATP depletion, propofol (final concentration 20 渭 mol / L) was preincubated in normal culture medium for 1 hour. In IRPT group, propofol (final concentration 20 渭 mol / L) and TAK1 lentivirus (titer was 2 脳 10 7 Tu / mL) preincubated for 1 h were added to normal culture medium. 10% lipid emulsion preincubated for 1 hour in normal culture medium with propofol (final concentration 20 渭 mol / L) and TAK1 negative lentivirus preincubated for 1 hour. The cell viability was detected by flow cytometry and the expression of TAK1 was detected by Western blot method at 1224 and 48 h after ATP was restored. The expression of 偽 -smooth muscle actin (偽 -SMAN), fibronectin (FN) and collagen 1 (Col 1) were detected by Western blot assay at 48 h after the recovery of ATP. Results compared with group C, the apoptosis rate of IR group was higher than that of C group. Compared with IR group, the apoptotic rate of IRP group decreased, and the expression of 偽 -SMA and FN decreased after the recovery of ATP. Compared with IRP group, the apoptosis rate of IRP group increased and the cell viability decreased, and the expression of 偽 -SMA and FN decreased in IRP group compared with that in IRP group. Conclusion Propofol pretreatment can reduce the fibrosis of HK-2 cells induced by ATP depletion and recovery, and its mechanism may be by down-regulating the expression of TAK1, and then inhibiting the early apoptosis of HK-2 cells by down-regulating the expression of TAK1, 偽 -SMA and FN. Thus, the degree of HK-2 cell fibrosis was alleviated.
【作者單位】： 佛山市第一人民醫(yī)院麻醉科;
【基金】：佛山市自籌經(jīng)費類科技計劃項目(編號:2016AB002761)
【分類號】：R614

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王宇歆;馬濤;李鳳娟;楊成民;;缺血再灌注損傷機制及其對策的初步探討[J];中國輸血雜志;2010年S1期

2 陶平;雌激素防治缺血再灌注損傷的研究現(xiàn)狀(文獻(xiàn)綜述)[J];國外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊;2003年05期

3 胡佳樂;血管性缺血再灌注損傷的基礎(chǔ)與臨床[J];海軍醫(yī)學(xué)雜志;2003年03期

4 怡悅;續(xù)命湯預(yù)防腦缺血再灌注損傷[J];國外醫(yī)學(xué)(中醫(yī)中藥分冊);2005年05期

5 謝明劍,薛偉新,岑家福;腦缺血再灌注損傷的中醫(yī)藥研究概況[J];華夏醫(yī)學(xué);2005年05期

6 魯力;張俐;;骨骼肌缺血再灌注損傷機制研究進(jìn)展[J];中國中醫(yī)骨傷科雜志;2005年06期

7 文靜;鐘森;董繼萍;陳麗娜;;腦缺血再灌注損傷中醫(yī)藥防治研究進(jìn)展[J];中國中醫(yī)急癥;2007年06期

8 王燕榮;愛民;謝軍;周建秀;李蘭誠;丹丹;;蒙藥防治缺血再灌注損傷的研究進(jìn)展[J];中國民族醫(yī)藥雜志;2007年08期

9 張幫健;劉進(jìn);;抗壞血酸在缺血再灌注損傷中的保護(hù)機制[J];實用醫(yī)院臨床雜志;2009年05期

10 徐辰;李潤平;;氫在治療缺血再灌注損傷的研究進(jìn)展[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2010年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 王宇歆;馬濤;李鳳娟;楊成民;;缺血再灌注損傷機制及其對策的初步探討[A];中國輸血協(xié)會第五屆輸血大會論文專集（摘要篇）[C];2010年

2 吳艷;李春英;賈旭峰;何穎;;椒苯酮胺對腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[A];中國藥理學(xué)會第十一次全國學(xué)術(shù)會議�？痆C];2011年

3 莫書榮;李德劍;;諾迪康對離體豚鼠心臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[A];中國生理學(xué)會第五屆全國心血管、呼吸和腎臟生理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2005年

4 朱賢富;;腦缺血再灌注損傷機制的研究現(xiàn)狀[A];中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)外科學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

5 于吉人;嚴(yán)盛;劉小孫;鄭樹森;;尿胰蛋白酶抑制劑減輕移植腸的缺血再灌注損傷[A];2004年浙江省外科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2004年

6 黃賢華;黃常亮;宋微微;方偉;楊芳炬;;迎春花對腦缺血再灌注損傷小鼠的保護(hù)作用[A];第十屆全國中藥藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

7 劉德強;趙德化;盛寶恒;;呋喃二氫吡啶Ⅰ對離體兔心缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[A];第二屆全國心功能學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];1990年

8 劉建修;;缺血再灌注損傷發(fā)生機制及防治最新進(jìn)展[A];江西省第四次中西醫(yī)結(jié)合心血管學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2008年

9 黃唯佳;陳壽權(quán);李惠萍;程俊彥;趙初環(huán);李章平;王明山;王萬鐵;王衛(wèi);;家兔腦缺血再灌注損傷時血栓素B_2/6-酮-前列腺素F_(1α)的變化及醒腦靜的保護(hù)作用[A];2005急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會暨《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》第四屆組稿會論文匯編[C];2005年

10 高立建;謝榮愛;田建會;;四氫生物喋呤在新西蘭兔缺血再灌注損傷中的保護(hù)作用[A];中國心臟大會（CHC）2011暨北京國際心血管病論壇論文集[C];2011年

相關(guān)重要報紙文章 前6條

1 衣曉峰　岳金鳳 記者　 李麗云;我科學(xué)家揭示腦缺血再灌注損傷奧秘[N];科技日報;2007年

2 衣曉峰　靳萬慶;靜脈麻醉藥保護(hù)腦缺血再灌注損傷機制被揭示[N];中國中醫(yī)藥報;2007年

3 ;抗呆I號可恢復(fù)腦缺血再灌注損傷細(xì)胞功能[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

4 張中橋;黃芪對腦缺血再灌注損傷有神經(jīng)保護(hù)作用[N];中國醫(yī)藥報;2006年

5 張中橋;黃芪對腦缺血再灌注損傷有神經(jīng)保護(hù)作用[N];中國中醫(yī)藥報;2006年

6 張茨;扭轉(zhuǎn)的睪丸切還是�！t(yī)生有新說[N];健康報;2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 黃薇園;功能MRI動態(tài)監(jiān)測大鼠急性缺血性腦卒中缺血再灌注損傷及其與預(yù)后相關(guān)的實驗研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 王震;不同藥物干預(yù)心、腎缺血再灌注損傷的作用與機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 凡進(jìn);自噬在脊髓缺血再灌注損傷過程中作用機制的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

4 楊偉;miR-208a在心肌缺血再灌注損傷中作用及相關(guān)機制的研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2016年

5 姚勇剛;MG53對腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2016年

6 侯帥;腦缺血再灌注損傷中線粒體縫隙連接蛋白43對神經(jīng)血管單元的保護(hù)作用及丹參多酚酸干預(yù)[D];吉林大學(xué);2016年

7 劉桂勇;右美托嘧啶對腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機制研究[D];武漢大學(xué);2015年

8 邢澤剛;受體相互作用蛋白3及經(jīng)典程序性壞死信號通路在腦缺血再灌注損傷中的作用研究[D];華中科技大學(xué);2015年

9 高翔;甘氨酸—氮氧自由基綴合物對缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其內(nèi)在機制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2017年

10 張騁;TSGL-Ig在肝缺血再灌注損傷中的作用和機制研究[D];浙江大學(xué);2017年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李盼;肢體缺血后適應(yīng)對缺血再灌注損傷小鼠腦保護(hù)作用及機制研究[D];河北大學(xué);2015年

2 蒲舉;遠(yuǎn)隔缺血后適應(yīng)對腦缺血再灌注損傷及相關(guān)VEGF、MMP-9表達(dá)的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2015年

3 王富明;針刺對腦缺血再灌注損傷大鼠外周血清SOD、MDA、miRNA-126及VEGF表達(dá)的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

4 趙層閃;化濁解毒活血通絡(luò)法對腦缺血再灌注損傷大鼠模型VEGF表達(dá)及微血管密度的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 曲欣;解偶聯(lián)蛋白2通過線粒體介導(dǎo)參與高血糖加重腦缺血再灌注損傷的實驗研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2015年

6 程浩;1β-羥基土木香內(nèi)酯對腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用研究[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2015年

7 吳建龍;p38MAPK信號通路參與雌二醇減輕皮瓣缺血再灌注損傷機制的初步研究[D];蘇州大學(xué);2015年

8 李婷婷;安菲博肽對小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其機制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

9 吳加元;Omi切割Hax-1加劇腦缺血再灌注損傷的機制研究[D];蘇州大學(xué);2015年

10 朱田豐;PDCD4在腦缺血再灌注損傷中的作用及機制研究[D];山東大學(xué);2015年

，

本文編號：1608805