本文選題：富血小板血漿　切入點(diǎn)：骨髓基質(zhì)干細(xì)胞　出處：《成都醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：股骨頭缺血性壞死是常見的骨科疾病,常常會降低患者生活質(zhì)量,給家庭經(jīng)濟(jì)帶來負(fù)擔(dān),其常見的病因有創(chuàng)傷、酒精性、激素等,該病的發(fā)病率呈現(xiàn)一個(gè)上升趨勢[1]。近年來由于激素的廣泛應(yīng)用,激素性股骨頭壞死的發(fā)生率較高,而且有實(shí)驗(yàn)研究表明,激素原因造成的股骨頭壞死中股骨頭內(nèi)的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow stromal cells,BMSCs)的數(shù)量減少,而且也已經(jīng)證實(shí)激素會影響骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的活性,使其分化能力降低,所以針對激素性股骨頭壞死的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的研究不斷深入,甚至認(rèn)為激素性股骨頭壞死是與骨髓基質(zhì)干細(xì)胞相關(guān)的一類疾病。目的觀察自體富血小板血漿誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合同種骨軟骨支架治療早期兔激素性股骨頭壞死的療效,探索早期股骨頭壞死治療的新方法。方法采用含有抗凝劑的真空采血管從實(shí)驗(yàn)兔子的耳中央動脈采取動脈血5 ml,再通過離心方法獲取富血小板血漿(platelet rich plasma,PRP),用16號骨髓穿刺針從實(shí)驗(yàn)兔自體股骨髓腔抽取骨髓5 ml,把抽取的骨髓進(jìn)行密度梯度離心,即可獲取兔骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,并進(jìn)行細(xì)胞的原代培養(yǎng)和成骨誘導(dǎo)。對已經(jīng)獲取富血小板血漿和骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行激素性股骨頭壞死造模,取同種股骨髁部骨軟骨制作軟骨支架,最后以制備的軟骨支架為載體,將經(jīng)過成骨誘導(dǎo)的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞移植到軟骨支架上,形成細(xì)胞-支架復(fù)合物,用16號骨髓穿刺針對壞死的股骨頭進(jìn)行髓芯減壓術(shù),術(shù)中將細(xì)胞-支架復(fù)合物植入壞死的股骨頭下。對實(shí)驗(yàn)動物進(jìn)行分組,一共4組,不同組別采取不同的干預(yù)措施。A組空白對照;B組僅僅進(jìn)行髓芯減壓;C組髓芯減壓后植入經(jīng)過成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞;D組髓芯減壓后植入細(xì)胞-支架復(fù)合物,每組20只,試驗(yàn)后在第2、4、8 W各組分別處死6、6、8只,每只實(shí)驗(yàn)兔子的股骨頭行大體標(biāo)本及組織學(xué)檢查。結(jié)果通過各組間在不同時(shí)間段的治療效果比較,D組治療效果最顯著,通過空骨陷窩計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn)D組與其他各組的差異明顯,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論骨髓基質(zhì)干細(xì)胞通過富血小板血漿的誘導(dǎo)向成骨細(xì)胞分化;軟骨支架材料為骨髓基質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化提供良好的空間結(jié)構(gòu),有利于其向成骨細(xì)胞分化;富血小板血漿誘導(dǎo)培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞和軟骨支架材料聯(lián)合應(yīng)用可以促進(jìn)早期兔激素性股骨頭壞死的修復(fù)。
[Abstract]:Avascular necrosis of the femoral head is a common orthopedic disease, which often reduces the quality of life of the patients and brings a burden to the family economy. Its common causes include trauma, alcohol, hormones, etc. The incidence of the disease is on the rise [1]. In recent years, due to the widespread use of hormones, the incidence of steroid-induced necrosis of the femoral head is relatively high, and some experimental studies have shown that, The number of bone marrow stromal cells in the femoral head of osteonecrosis caused by hormones has been reduced, and it has also been shown that hormones affect the activity of bone marrow stromal cells and reduce their differentiation ability. So the research on bone marrow stromal cells caused by steroid-induced femoral head necrosis is getting deeper and deeper. It is even considered that steroid-induced osteonecrosis of femoral head is a kind of disease associated with bone marrow stromal cells. Objective to observe the effect of autologous platelet-rich plasma induced bone marrow stromal cells combined with osteochondral stents in the treatment of early steroid-induced femoral head necrosis in rabbits. A new method for the treatment of early femoral head necrosis was explored. Methods A vacuum vessel containing anticoagulant was used to take 5 ml of arterial blood from the central ear artery of experimental rabbits, and then centrifugation was used to obtain platelet rich plasma-protopril. Bone marrow was extracted from rabbit autologous femoral medullary cavity by bone marrow puncture needle, and the bone marrow was centrifuged by density gradient centrifugation. Rabbit bone marrow stromal stem cells (BMSCs) were obtained, primary culture and osteogenesis induction were performed. The experimental rabbits which had obtained platelet-rich plasma and bone marrow stromal stem cells (BMSCs) were treated with steroid-induced osteonecrosis of femoral head. The cartilage scaffold was made from the osteochondral cartilage of the femoral condyle. Finally, the bone marrow stromal stem cells (BMSCs) induced by osteogenesis were transplanted onto the cartilage scaffold to form the cell-scaffold complex. The necrotic femoral head was decompressed with 16 bone marrow puncture. The cell-stent composite was implanted under the necrotic femoral head during the operation. The experimental animals were divided into 4 groups. Different intervention measures were taken in different groups. Group A, blank control group B was treated with core decompression and group C, after decompression, bone marrow stromal stem cells cultured in group D were implanted with cell-stent complex after decompression, 20 rats in each group. After the experiment, 8 rats were killed in each group at the 2nd hour and 4th week respectively. The femoral head of each rabbit was examined by gross specimen and histology. Results the therapeutic effect of group D was the most significant compared with that of group D at different time intervals. The difference between group D and other groups was significant (P 0.05). Conclusion Bone marrow stromal cells can differentiate into osteoblasts by platelet-rich plasma. Cartilage scaffolds provide a good spatial structure for the differentiation of bone marrow stromal cells into osteoblasts, which is beneficial to the differentiation of bone marrow stromal cells into osteoblasts. Combined use of platelet-rich plasma induced bone marrow stromal stem cells and cartilage scaffolds can promote the repair of early steroid-induced osteonecrosis of femoral head in rabbits.
【學(xué)位授予單位】：成都醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R681.8

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本文編號：1585420