新生大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及分化研究
本文選題:海馬 切入點(diǎn):神經(jīng)干細(xì)胞 出處:《生物醫(yī)學(xué)工程研究》2016年04期 論文類型:期刊論文
【摘要】:研究新生大鼠海馬區(qū)腦組織中神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)方法,為治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病尋找合適的細(xì)胞來源。取新生SD大鼠的海馬區(qū)腦組織,采用accutase結(jié)合機(jī)械分離法獲取神經(jīng)干細(xì)胞,在含有B-27、堿性成纖維生長因子和表皮生長因子的DMEM/F12無血清培養(yǎng)液中培養(yǎng);Accutase酶消化后傳代培養(yǎng),取第3代細(xì)胞行抗巢蛋白免疫熒光染色鑒定并以含10%胎牛血清培養(yǎng)液誘導(dǎo)分化,神經(jīng)元特異烯醇化酶和膠質(zhì)纖維酸性蛋白免疫熒光染色檢測(cè)NSCs向神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞分化的能力。分離的新生大鼠海馬區(qū)腦組織中細(xì)胞,在無血清培養(yǎng)液中形成大量的神經(jīng)球,部分神經(jīng)球出現(xiàn)融合及貼壁分化現(xiàn)象,細(xì)胞呈典型NSCs形態(tài)。經(jīng)巢蛋白染色鑒定,大部分為陽性細(xì)胞。神經(jīng)細(xì)胞球經(jīng)含有胎牛血清培養(yǎng)液培養(yǎng)后,可分化為神經(jīng)元特異烯醇化酶和膠質(zhì)纖維酸性蛋白表達(dá)陽性的細(xì)胞。從新生大鼠海馬組織分離培養(yǎng)的NSCs具有自我更新和增殖能力,在含胎牛血清培養(yǎng)液中具有向神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分化的潛能。
[Abstract]:In order to find a suitable cell source for the treatment of nervous system diseases, the neural stem cells in the hippocampus of newborn rats were cultured in vitro. Neural stem cells were obtained from the hippocampal brain tissues of newborn SD rats by accutase and mechanical separation. DMEM/F12 containing B-27, basic fibroblast growth factor and epidermal growth factor was cultured in serum-free medium after digestion and subculture. The third passage cells were identified by anti-nestin immunofluorescence staining and differentiated with 10% fetal bovine serum culture medium. Neuron-specific enolase and glial fibrillary acidic protein immunofluorescence staining were used to detect the ability of NSCs to differentiate into neurons and glial cells. Fusion and adherent differentiation were observed in some of the neurons, and the cells showed typical NSCs morphology. Most of the neurons were positive cells identified by nestin staining. The neuronal balls were cultured in the culture medium containing fetal bovine serum. NSCs isolated from hippocampal tissue of newborn rats has the ability to self-renew and proliferate, and can differentiate into neuron-specific enolase and glial fibrillary acidic protein (GFAP) positive cells. It has the potential to differentiate into neurons and glial cells in fetal bovine serum culture medium.
【作者單位】: 江蘇無錫市第三人民醫(yī)院;
【分類號(hào)】:R651.2
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,本文編號(hào):1560622
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