本文關(guān)鍵詞： 胰腺炎 腸屏障 CD3+、CD4+、CD8+ HMGB1 流式細胞術(shù)　出處：《遵義醫(yī)學(xué)院》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:通過建立SAP大鼠模型,檢測HMGB1、D-乳酸、IL-1、IL-10及T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+凋亡率,探討HMGB1的釋放在大鼠SAP時腸黏膜免疫屏障損傷中的作用及機制,為急性胰腺炎治療研究提供新的思路和理論依據(jù)。方法:將體重在200g-250g健康SD大鼠(雌雄不限)104只,隨機分為五組:假手術(shù)組(A組,n=8只);SAP模型組(B組,n=24只);清胰Ⅱ號干預(yù)組(C組,n=24只);谷氨酰胺干預(yù)組(D組,n=24只);清胰Ⅱ號+谷氨酰胺干預(yù)組(E組,n=24只)。假手術(shù)組大鼠開腹后僅翻動腸管;采用膽胰管逆行注射5%牛磺膽酸鈉建SAP模型;于SAP制模蘇醒后予清胰Ⅱ號灌胃,建立清胰Ⅱ號干預(yù)組;于SAP制模蘇醒后予谷氨酰胺灌胃,建立谷氨酰胺干預(yù)組;于SAP制模蘇醒后予清胰Ⅱ號+谷氨酰胺灌胃,建立清胰Ⅱ號+谷氨酰胺干預(yù)組。每組于制模后按6h、12h、24h分成3個亞組,于上述時間點處死大鼠取靜脈血、胰腺組織、回腸及回腸Peyer’s結(jié),每時點取大鼠8只。以酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測血清中HMGB1、D-乳酸、IL-1、IL-10的濃度;實時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)測腸組織HMGB1m RNA的表達;流式細胞術(shù)測小腸Peyer’s結(jié)T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+凋亡率;光鏡觀察胰腺病理變化,光鏡及電鏡觀察腸黏膜病理變化。并對各組檢測指標作統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果:1.與A組比較,B組大鼠回腸HMGB1m RNA表達量、血清HMGB1、D-乳酸、IL-1、IL-10濃度以及Peyer’s結(jié)CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞凋亡率升高(P0.01),胰腺發(fā)生明顯損傷(P0.01),且血清HMGB1濃度與胰腺損傷程度呈正相關(guān)(r=0.912,P0.01)。2.C組、D組、E組與B組比較,胰腺損傷程度減輕(P0.01,P0.05),各對應(yīng)時間點回腸HMGB1m RNA表達量、血清HMGB1、D-乳酸、IL-1濃度以及Peyer’s結(jié)CD3+、CD4+、CD8+凋亡率下降(P0.01,P0.05);血清IL-10濃度升高(P0.01,P0.05)。3.E組與C組、D組比較,各檢測指標無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);4.C組與D組比較,各檢測指標無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5.B組大鼠12h、24h回腸HMGB1m RNA表達量、血清HMGB1、D-乳酸、IL-1、IL-10、以 CD3+、CD4+淋巴細胞凋亡率均較6h升高(P0.01,P0.05),CD8+淋巴細胞凋亡率6h與12h比無明顯差異(P0.05),與24h比顯著升高(P0.01);12h與24h相比,各指標均升高(P0.01,P0.05)。6.C、D、E組12h、24h各指標與6h相比,HMGB1m RNA、IL-1、IL-10、D-乳酸、HMGB1表達升高(P0.01,P0.05),CD3+、CD4+淋巴細胞凋亡率下降,有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01,P0.05),CD8+淋巴細胞凋亡率6h與12h比無明顯差異(P0.05),與24h比顯著升高(P0.01);12h、24h相比,HMGB1m RNA、IL-1、IL-10、D-乳酸、HMGB1表達升高(P0.01,P0.05),CD3+、CD4+、CD8+淋巴細胞凋亡率顯著下降(P0.01)。結(jié)論:1、HMGB1參與了SAP的病程發(fā)展,且與SAP嚴重程度呈正相關(guān)。2、HMGB1可通過對T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+的調(diào)節(jié),從細胞免疫途徑介SAP時IBFD的發(fā)生。3、清胰Ⅱ號可通過降低HMGB1表達減輕腸免疫屏障損傷。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect and mechanism of HMGB1 release on intestinal mucosal immune barrier injury in rats by establishing SAP rat model and detecting the apoptosis rate of IL-10 and T lymphocyte subgroup CD3 CD4 / CD8 in rat model of SAP. Methods: 104 healthy SD rats weighing 200g-250g (male and female) were used to treat acute pancreatitis. Five groups were randomly divided into five groups: sham operation group (n = 8) and SAP model group (n = 24), group B (n = 24), group C (n = 24), group D (n = 24), group D (n = 24), group E (n 24), group E (n = 24). Only the intestinal canal was turned over after laparotomy. The SAP model was established by retrograde injection of 5% sodium taurocholate into the gallbladder and pancreatic duct, the intervention group of Qingyi 鈪，

本文編號：1552838