本文關(guān)鍵詞： 乳腺上皮細(xì)胞 Ilk基因 炎性因子　出處：《中國(guó)獸藥雜志》2017年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為探究Ilk對(duì)LPS誘導(dǎo)小鼠乳腺上皮細(xì)胞(MECs)分泌炎性因子IL-8、TNF-α的影響,采用siRNA技術(shù)篩選最佳轉(zhuǎn)染條件,q PCR法和ELISA法檢測(cè)siRNA轉(zhuǎn)染后下游蛋白Akt1的表達(dá)來評(píng)價(jià)Ilk沉默,ELISA法檢測(cè)Ilk沉默后對(duì)小鼠MECs分泌炎性因子IL-8、TNF-α的影響。結(jié)果顯示:選用Ilk-mus-595片段的20 n M轉(zhuǎn)染組可極顯著抑制Ilk的mRNA表達(dá)(P0.01),轉(zhuǎn)染效率最好,達(dá)84.83%;Ilk轉(zhuǎn)染后可顯著減少LPS介導(dǎo)的Akt1 mRNA的轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)(P0.05);可顯著減少LPS介導(dǎo)的TNF-α分泌(P0.05),但各組IL-8的量無變化(P0.05)。結(jié)果提示:利用siRNA成功轉(zhuǎn)染的Ilk可以影響細(xì)胞內(nèi)Akt1的表達(dá),降低細(xì)胞分泌的TNF-α含量,Ilk可能與小鼠MECs的抗炎有關(guān),可作為靶基因進(jìn)行更加深入的研究,以期為乳腺炎癥的治療提供新的思路及數(shù)據(jù)參考。
[Abstract]:In order to explore Ilk on LPS induced mouse mammary epithelial cells (MECs) secretion of inflammatory cytokines IL-8, TNF- alpha, using siRNA technology to screen the best conditions of transfection, the expression of Q PCR and ELISA siRNA was detected after transfection of downstream protein Akt1 to evaluate Ilk silencing, detection of Ilk silencing ELISA method after the secretion of inflammatory factor of IL-8 effect of mouse MECs, TNF- alpha. The results showed that 20 N M transfection group selected fragments of Ilk-mus-595 could significantly inhibit the expression of Ilk mRNA (P0.01), the best transfection efficiency, up to 84.83%; after Ilk transfection can significantly reduce transcription and protein expression of LPS mediated Akt1 mRNA (P0.05) can significantly reduce the LPS; mediated by TNF- secretion (P0.05), but no change in the amount of IL-8 groups (P0.05). The results showed that: using siRNA successfully transfected Ilk can affect the expression of Akt1, reduce the TNF- content of alpha cells, Ilk may be related to mouse MECs can be used as anti-inflammatory, target substrate In order to provide new ideas and data reference for the treatment of breast inflammation, a more in-depth study is carried out.

【作者單位】： 貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;貴州省生化工程中心;河南金泰生物技術(shù)股份有限公司;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31260618;31470128)
【分類號(hào)】：R655.8

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本文編號(hào)：1551613